动态浊度法定量检测猫粮中细菌内毒素含量的研究

试验旨在建立一种动态浊度法定量测定猫粮中细菌内毒素含量的检测方法。猫粮样品中的细菌内毒素用水提取,离心,过滤,滤液适当稀释,采用动态浊度法在细菌内毒素测定仪上进行定量测定。结果显示:在0.040~5.000 EU/mL的范围内细菌内毒素的线性良好(相关系数r=-0.9953,|r|>0.980),标准曲线有效,重复测定的相对标准偏差(RSD)为8.9%~14.0%(n=6),当稀释因子≥1000时干扰试验的回收率均在50%~200%之间,方法定量限(LOQ)为0.04 EU/mg。研究表明,该方法操作简便,可靠准确,重现性好,能够有效检测猫粮样品中细菌内毒素含量,具有较好的应用前景。

高效液相色谱法测定保健食品中红景天苷及方法学优化

对保健食品中红景天苷的高效液相色谱分析方法进行优化。以80%甲醇溶液为提取剂,样品经超声波辅助提取后进行测定。色谱柱为Unitary C 8柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈/水(12:88,V/V),流速1.0 mL/min。结果表明:红景天苷在1.00~50.0 mg/L范围内呈现良好线性,加标回收率为95.6%~99.3%,该方法简便快速、准确度高和通用性好,适用于保健食品中红景天苷的分析测定和质量监控。

快速溶剂萃取-LC-MS/MS法测定污泥中的6种邻苯二甲酸酯

建立了快速溶剂萃取-LC-MS/MS法测定污泥中的6种邻苯二甲酸酯的分析检测方法。污泥经冷冻干燥,研磨过0.250 mm(60目)筛,在快速溶剂萃取仪上用正己烷-丙酮(V_(正己烷)∶V_(丙酮)=1∶1)溶剂萃取,经干燥、浓缩,加入内标。先经C_(18)捕获柱分离开液相自带的酯类污染,再在第二根C_(18)柱子进行第二次分离,在质谱上使用MRM模式进行分析,内标法定量。结果表明,6种邻苯二甲酸酯在5~500 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数(R)均大于0.999。检出限(LOD)为0.41~0.99μg/kg,定量限(LOQ)为1.23~2.97μg/kg;在3个浓度添加水平(5.00,10.0,50.0μg/kg)内,回收率为74.2%~110%,相对标准偏差为1.4%~12%。该方法快速、准确、稳定,能够满足污泥中6种邻苯二甲酸酯的痕量测定。

广东部分地区食品中环己基氨基磺酸钠的含量调查

目的了解广东部分地区食品中环己基氨基磺酸钠添加情况。方法采用气相色谱法对458个随机在大型商场和小型超市售卖的包装食品进行环己基氨基磺酸钠含量的检测。结果本次测试共458个,14大类食品,其中19.2%食品添加了环己基氨基磺酸钠,且大部分食品中的添加量在GB 2760—2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》内,属于可放心食用的食品,不过其中有2.8%的食品超出了标准范围。14大类中饮料类、腌渍的蔬菜、脱壳熟制坚果与籽类、熟制豆类、凉果类、冷冻饮品、果冻糕点、复合调味料、腐乳、带壳熟制坚果与籽类、饼干类食品的风险较低,方便食品(调味面制品)、蜜饯凉果食品的风险较高。结论食品监管部门仍需要继续保持在食品生产消费中对环己基磺胺酸钠的安全风险管理。

气相色谱-三重四极杆质谱法同时测定乌梅中25种多环芳烃及其污染来源分析

目的建立气相色谱-三重四极杆质谱法(gas chromatography-triple quadrupole mass spectrometry,GC-MS/MS)同时测定乌梅中25种多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs),并对污染来源进行分析。方法样品经二氯甲烷超声萃取,基质固相分散(matrix solid-phase dispersion,MSPD)净化,DB-EUPAH色谱柱分离,多反应监测(multiple reaction monitorin,MRM)采集,内标法定量。结果25种PAHs在1~500 ng/mL范围内线性良好(相关系数r 2>0.997),检出限(limits of detection,LODs)为0.05~0.40μg/kg,定量限(limits of quantitation,LOQs)为0.20~1.40μg/kg,在1、5和20μg/kg 3个浓度水平的加标回收率为63.3%~119.0%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为2.2%~6.5%(n=6)。乌梅样品中除二苯并[a,h]芘(DBahP)外,其余24种PAHs均有检出,菲(Phe)、荧蒽(Flt)、芘(Pyr)的含量较高,蒸晒与熏制乌梅中PAHs的污染分布存在明显差异。结论本方法前处理操作简单、灵敏度高、方法稳定、抗干扰性强,可同时实现乌梅中25种PAHs的测定。

超高效液相色谱-串联质谱法测定大豆分离蛋白中的嘌呤

[目的]建立同时测定大豆分离蛋白中4种嘌呤的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。[方法]采用三氟乙酸∶甲酸(V∶V=1∶1)将样品中的嘌呤进行水解和提取,并用水稀释。以含0.002%甲酸水溶液-甲醇体系为流动相,选择安捷伦超高压色谱柱Poroshell 120 EC-C_(18)分离4种嘌呤化合物(鸟嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤),以质谱条件为电喷雾(ESI)正离子电离,MRM模式,外标法定量测定。[结果]在1~200 ng/mL浓度范围内,4种嘌呤均具有较好的线性关系,相关系数(r)均不低于0.9991,定量限(LOQ)和检出限(LOD)分别在0.24~3.00和0.08~1.00 mg/kg。在3个浓度级别的加标水平下,4种嘌呤的平均回收率在81.7%~95.2%,相对标准偏差(RSD)均低于8.6%(n=6)。[结论]该方法可操作性强、简捷快速,具有较高的灵敏度、回收率和精密度,可以同时检测大豆分离蛋白中的4种嘌呤化合物。

UHPLC-MS/MS法测定酱油中的焦谷氨酸

建立了测定酱油中焦谷氨酸的超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)分析方法。采用水直接提取样品中的焦谷氨酸,并适当稀释,将供试液用安捷伦InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18(Φ4.6 mm×50 mm, 2.7μm)进行色谱分离,使用0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液流动相体系梯度洗脱。电喷雾离子源正离子(ESI+)模式,多反应监测(MRM)模式进行测定。实验结果显示,焦谷氨酸的线性范围为0.025~2.5μg/mL,线性关系良好,相关系数(R^(2))为0.9992,检出限(LOD)和定量限(LOQ)为0.45 mg/kg和1.5 mg/kg。加标样品的回收率在80.7%~101.1%之间,精密度(RSD)(n=6)为2.4%~8.3%。该方法简单高效,灵敏准确,能应用于酱油中焦谷氨酸含量的定量检测。

超高效液相色谱-串联质谱法测定枸杞提取物中的甜菜碱

建立了超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)测定枸杞提取物中甜菜碱的方法。采用50%甲醇超声提取样品中的甜菜碱,用水稀释后,以含5 mmoL/L乙酸铵水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,以Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC(∅2.1 mm×150 mm,2.7μm)为色谱柱分离甜菜碱目标物,并在正离子模式下,采用MRM模式,外标法定量分析。结果显示,在10~500 ng/mL质量浓度范围内,甜菜碱具有良好的线性关系,相关系数(r^(2))为0.9994,检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.12 mg/kg和0.35 mg/kg。在3个质量浓度级别的加标水平下,甜菜碱的平均回收率在81.5%~102.7%之间,相对标准偏差(RSD)(n=6)为1.0%~7.5%。方法可行性强、简单快速,具有较高的灵敏度、回收率和精密度,可用于高效检测枸杞提取物中的甜菜碱。

气相色谱法测定维生素预混料中肌醇的含量

建立了气相色谱法测定维生素预混料中肌醇含量的方法。维生素预混料样品中的肌醇经过水溶液提取,氮气吹干,采用硅烷化试剂进行衍生反应后,再采用正己烷提取,最后在气相色谱仪上进行分析,外标法定量。结果表明,肌醇在2~200μg/mL质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))大于0.999;检出限(LOD)为0.04 mg/g,定量限(LOQ)为0.12 mg/g;相对标准偏差(RSD)为0.43%;在3个浓度添加水平(1.0,3.0,10.0 mg/g)内,回收率为95.0%~98.1%。该方法快速、准确、稳定,能够满足维生素预混料中肌醇含量的测定。

高效液相色谱法快速测定鱼类鲜度指标K值及方法学优化

对行业标准SC/T3048-2014测定鱼类鲜度K值(三磷酸腺苷,二磷酸腺苷,腺苷酸,肌苷酸,肌苷和次黄嘌呤)的分析方法进行优化。优化后的条件:以高氯酸溶液为提取剂,样品经高速均质结合超声波辅助提取后,用氢氧化钠溶液调节pH至6.0~6.4,一级水定容。采用C_(4)柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,以磷酸二氢钾溶液(0.048mol/L,pH=5.7)~甲醇/磷酸二氢钾溶液(9/1,v/v)为流动相进行梯度洗脱,检测波长254nm,流速1.0mL/min,柱温30℃,外标法定量。优化结果表明:6种化合物的分析时间由行业标准方法的38min减少至11min。该方法的加标回收率(77.2%~112%),相对标准偏差(4.69%~7.81%),检出限(0.648~2.15mg/kg)和定量限(2.16~7.18mg/kg)均优于行业标准方法。结果表明该方法操作简便,分析快速,干扰较小,灵敏度高和重现性好,具有一定的实用价值。

人工神经网络基于食用油脂肪酸组成解析二组分食用油混合模型研究

通过气相色谱法分析花生油和棕榈油的混合油的脂肪酸组成,建立了人工神经网络分析二组分食用油混合模型的方法。分别基于混合油样品中棕榈酸和亚油酸含量变化的一元线性回归模型和基于全部脂肪酸组成的BP神经网络建立定量模型对花生油中棕榈油的掺杂量进行预报。结果表明,BP神经网络的预报准确率为96.7%,当棕榈油掺杂量≥0.050(V/V)时,相对偏差≤6%,其准确度高,能够实现二组分混合油掺混量的准确预报,为调和油的组成分析提供了新思路。

乙醇沉淀结合酶解—高效液相色谱法测定固体饮料中透明质酸钠

目的:建立反相液相色谱测定固体饮料中透明质酸钠的分析方法。方法:以透明质酸钠含量为评价指标,样品提取液经乙醇沉淀后,采用透明质酸酶对沉淀物进行酶解处理,通过单因素试验和正交试验法优化得到最佳酶解条件:酶解时间120 min,酶解温度34℃,pH值6.5。色谱柱为Ulitimate C18(4.6 mm×250 mm, 5μm),流动相:乙腈10 mmol/L辛烷磺酸钠溶液(V乙腈∶V辛烷磺酸钠=10∶90),流速0.6 mL/min;检测波长232 nm,外标法定量。结果:透明质酸钠的相关系数为0.999 9,加标回收率96.4%~101%,相对标准偏差3.16%,检出限为0.062 g/kg。结论:乙醇沉淀结合酶解—反相色谱专属性强、准确度高、重复性好和干扰较小,适用于固体饮料中透明质酸钠的含量测定。

气相色谱法测定黑蒜中两种二烯丙基硫化物含量的不确定度评定

试验旨在采用气相色谱法测定黑蒜中两种二烯丙基硫化物的不确定度。黑蒜中的蒜氨酸在一定的p H和温度下转化为二烯丙基三硫醚(DATS)和二烯丙基二硫醚(DADS),经乙醇溶液提取、正己烷萃取后,用带有氢火焰离子化检测器的气相色谱测定,用外标法定量。通过数学建模对两种试验过程中引入的不确定各分量进行分析与评定。结果表明,取消过滤提取液并分取稀释的操作步骤能够有效提高DATS和DADS的测量准确度,并降低结果的分散程度;不确定度主要来源于标准曲线拟合、样品重复性、标准工作溶液配制、样品加标回收率、标准物质纯度。在气相色谱法测定黑蒜中两种二烯丙基硫化物中,应选择合适的标准曲线范围、使用纯度高的标准物质、减少标准溶液的稀释过程、把握过程中的关键控制点,以提高结果的准确性。

抑制电导离子色谱法测定奶酪中硫氰酸根的不确定度评定

目的:对采用抑制电导离子色谱法测定奶酪中硫氰酸根含量的不确定度进行评定。方法:用抑制电导离子色谱法对奶酪中硫氰酸根的含量进行测定并建立数学模型。分析了试验过程中所引入不确定度的来源,通过对各不确定度分量计算合成不确定度。结果:硫氰酸根的测定结果为(10.2±0.56)mg/kg,k=2,p=95%。结论:测量过程中的不确定度主要来自测试供试液中硫氰酸根浓度,样品回收率和重复性试验次之。

高效液相色谱-蒸发光散射法测定虫草头孢菌粉中D-甘露醇

建立了高效液相色谱-蒸发光散射测定虫草头孢菌粉中D-甘露醇的分析方法。样品经过超声波辅助提取后,以Shodex Asahipak NH2P-504E(4.6 mm×250 mm,5μm)为分离柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min。蒸发光散射检测器参数:漂移管温度35℃,氮气流速1.60 SLM。在0.100~2.00 g/L范围内D-甘露醇质量浓度的自然对数与峰面积的自然对数呈良好线性。相对标准偏差为5.8%,加标回收率为93.5%~97.5%。该方法基质干扰较小,简单快速,结果准确可靠和灵敏度高,适用于虫草头孢菌粉中D-甘露醇含量的测定。

气质联用法测定叶菜类蔬菜中的氟虫腈及其代谢物残留量

[目的]建立叶菜类蔬菜中氟虫腈及其代谢物残留量的气相色谱-质谱联用法。[方法]样品经乙腈萃取,N-丙基乙二胺键合硅胶固相萃取柱净化,采用气相色谱-质谱仪进行确认和定量。[结果]氟虫腈及其代谢物在0.005~0.500μg/mL范围内呈良好线性关系(R^2>0.999),方法检出限为0.5μg/kg,定量限为2μg/kg;氟虫腈及其代谢物的回收率为81.06%~107.1%,精密度为4.66%~18.90%。通过对100批次5种常见市售叶菜类蔬菜的筛查,阳性主要为小白菜。[结论]该方法灵敏度高,定性及定量准确,适用于叶菜类蔬菜中氟虫腈及其代谢物残留量的测定。

花生油挥发性风味物质SPME-GC/MS指纹图谱的研究

建立一种快速、高效检测花生油中挥发性风味物质的方法对花生油的质量控制具有重要意义。采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用(SPME-GC/MS)技术对花生油中风味物质进行快速分析鉴定,并对采集大量SPME-GC/MS数据进行对比分析,比较30批不同花生油样品所得GC/MS色谱图生成标准指纹图谱(R)。该法可同时检测花生油中醛类、杂环类、烃类、酯类等56种挥发性成分。与标准指纹图谱比较,各批次相似度范围为0.918~0.990。该方法重复性和稳定性的RSD值均小于0.51%,说明该方法稳定可靠。将所建立的标准指纹图谱应用于10批次不同原料的食用油进行识别,相似度为0.114~0.775,均小于0.9。该方法建立的花生油指纹图谱质控模式能有效识别原料来源,可用于花生油的评价与甄别,可为花生油的质量控制提供相关检测依据。

用DNA条形码鉴定常见鱼翅的种类与真伪

用形态鉴定了物种的市面上常见的6种正品鱼翅作标准样品,以明胶为主要原料制作的2种假鱼翅作阴性对照,用DNA条形码技术研究了广东省市场流通的35种鱼翅的遗传多样性,探讨从基因水平鉴别鱼翅制品真伪的方法,提高鱼翅产品标识准确性。采用不同基因组DNA提取方法比对,选择适合鱼翅DNA的提取方法,筛选出COI序列DNA条形码通用引物,对鱼翅DNA进行PCR扩增并测序,应用MEGA 6.0软件对64条鱼翅COI序列进行多序列比对,基于邻接法(N-J)构建进化树,分析遗传距离。同时应用DNAman构建相应COI序列的聚类同源树。结果表明,本研究所建立的条形码技术能鉴别13种鱼翅物种。分子系统发育树显示,同一个物种的不同个体基本都能形成单系,节点支持率大都为99%~100%。聚类分析显示,同一物种都位于同一个分支,不同个体的鱼类的COI序列相似度均大于95%。该方法可为广东省流通的鱼翅制品的鉴定提供分子生物学基础。

气相色谱-质谱联用法测定红糖中的丙烯酰胺

通过响应面优化法确认溴化衍生条件,采用DB-Heavywax毛细管柱分离,建立了使用气相色谱-质谱联用仪检测红糖中丙烯酰胺含量的方法。样品用水溶解,经过溴化衍生,乙二胺-N-丙基硅烷和十八烷基硅胶PSA+C18净化后,采用气相色谱-质谱联用仪进行分析。结果表明,在10~1000 ng/mL范围内线性关系良好(R^(2)为0.9999),方法检出限(LOD)可达0.4μg/kg,满足红糖中丙烯酰胺的检测要求。通过加标验证,回收率介于91.6%~97.7%之间,相对标准偏差在1.9%~6.2%之间。对6个不同产地的14批次红糖样品进行丙烯酰胺含量检测,结果介于25~960μg/kg之间,存在一定的安全风险。该方法简单、准确、高效,可以作为红糖中丙烯酰胺的检测技术而被广泛应用。

同位素内标-气相色谱-质谱法测定食用植物油中缩水甘油酯

建立了一种同位素内标-气相色谱-质谱法测定食用植物油中缩水甘油酯(GEs)的检测方法。先将GEs转化成3-溴-1,2-丙二醇(3-MBPD)单酯,再通过水解、衍生化,然后气相色谱-质谱法测定3-溴-1,2-丙二醇(3-MBPD)含量,并对衍生条件进行优化。结果表明:优化的衍生条件为GEs质量浓度为21.78μg/mL时,苯硼酸(PBA)用量100μL,衍生温度50℃,衍生时间10 min。该方法在GEs质量浓度为0.0218~2.178μg/mL范围内线性关系良好(R=0.9999),检出限为25μg/kg,平均加标回收率为91.4%~97.0%,相对标准偏差为4.4%~8.6%。该方法的可操作性强、重现性好,灵敏度、准确度和精密度均能满足实际工作中食用植物油中GEs的定性定量检测。