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猪圆环病毒2型ORF2和ORF1-2串联基因重组腺病毒对小鼠的免疫效果
被引量:
1
1
作者
刘建营
丛丽媛
+4 位作者
赵路易
王建龙
王晶钰
徐维加
宋长绪
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期641-645,共5页
为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)基因的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,利用本实验室构建的PCV2的ORF2和ORF1-2串联基因的重组腺病毒对小鼠进行了免疫并对其免疫效果进行了研究。分别用表达ORF2和...
为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)基因的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,利用本实验室构建的PCV2的ORF2和ORF1-2串联基因的重组腺病毒对小鼠进行了免疫并对其免疫效果进行了研究。分别用表达ORF2和OFR1-2基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠,对免疫后小鼠的血清抗体和脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例及其增殖反应、自然杀伤活性和特异性杀伤活性进行了检测和比较。结果表明,用表达ORF2基因和ORF1-2串联基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠后,随着免疫次数的增加,小鼠产生的针对PCV2ORF2基因的特异性抗体水平不断升高,第3次免疫后2周达到最高,但第3次免疫后4周有所下降;免疫重组腺病毒的试验组小鼠的脾淋巴细胞增殖活性、CTL杀伤活性和NK细胞杀伤活性与免疫空载体的对照组和免疫PBS的对照组比较均有显著的差异(P<0.05)。本研究为PCV-2基因工程疫苗的深入研究及应用奠定了基础。
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关键词
猪圆环病毒
ORF2基因
ORF1-2基因
重组腺病毒
免疫效果
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职称材料
猪圆环病毒1型ORF2基因的改造及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
2
2
作者
张福良
孙利华
宋长绪
《中国动物检疫》
CAS
2009年第6期33-35,共3页
根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计合成了一对引物,对PCV1ORF2基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF2基因(702bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF2。由于ORF2前面有120多个信号肽和序列中有大量的稀有密码...
根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计合成了一对引物,对PCV1ORF2基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF2基因(702bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF2。由于ORF2前面有120多个信号肽和序列中有大量的稀有密码子,所以将ORF2进行改造并将改造的ORF2双酶切产物插入原核表达载体pET-32α与pET-41α,得到重组子命名为pET-ORF2-1与pET-ORF2-2。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Westernblot分析,结果表明PCV1-ORF2在pET-32α和pET-41α中获得了高效融合表达,其表达蛋白分子量约为30Kda和45Kda。
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关键词
PCV1
ORF2
克隆
改造
表达
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职称材料
题名
猪圆环病毒2型ORF2和ORF1-2串联基因重组腺病毒对小鼠的免疫效果
被引量:
1
1
作者
刘建营
丛丽媛
赵路易
王建龙
王晶钰
徐维加
宋长绪
机构
西北农林
科
技大学
云南出入境检验检疫局
广东省农业科院兽医研究所
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期641-645,共5页
基金
国家“863”科技攻关计划资助项目(2003AA241110)
国家食品安全重大专项基金资助项目(2001BA804A31)
+2 种基金
广东省农业科技攻关计划资助项目(2003B21404,20052490100)
广东省自然基金重点资助项目(06105311)
广东省自然基金资助项目(031990)
文摘
为了研究含有猪圆环病毒2型(porcine circovirus type2,PCV2)基因的重组腺病毒作为基因工程疫苗的潜在应用价值,利用本实验室构建的PCV2的ORF2和ORF1-2串联基因的重组腺病毒对小鼠进行了免疫并对其免疫效果进行了研究。分别用表达ORF2和OFR1-2基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠,对免疫后小鼠的血清抗体和脾淋巴细胞中各细胞亚群的比例及其增殖反应、自然杀伤活性和特异性杀伤活性进行了检测和比较。结果表明,用表达ORF2基因和ORF1-2串联基因的重组腺病毒Ad-ORF2、Ad-ORF1-2经肌肉途径免疫Balb/c小鼠后,随着免疫次数的增加,小鼠产生的针对PCV2ORF2基因的特异性抗体水平不断升高,第3次免疫后2周达到最高,但第3次免疫后4周有所下降;免疫重组腺病毒的试验组小鼠的脾淋巴细胞增殖活性、CTL杀伤活性和NK细胞杀伤活性与免疫空载体的对照组和免疫PBS的对照组比较均有显著的差异(P<0.05)。本研究为PCV-2基因工程疫苗的深入研究及应用奠定了基础。
关键词
猪圆环病毒
ORF2基因
ORF1-2基因
重组腺病毒
免疫效果
Keywords
PCV-2
ORF2 gene
ORF1-2 gene
recombinant adenoviruses
immune response
分类号
S852.5 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
猪圆环病毒1型ORF2基因的改造及其在大肠杆菌中的表达
被引量:
2
2
作者
张福良
孙利华
宋长绪
机构
安阳工学
院
生物与食品学
院
广东省农业科院兽医研究所
出处
《中国动物检疫》
CAS
2009年第6期33-35,共3页
基金
国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110)
文摘
根据GenBank中猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因序列,设计合成了一对引物,对PCV1ORF2基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF2基因(702bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF2。由于ORF2前面有120多个信号肽和序列中有大量的稀有密码子,所以将ORF2进行改造并将改造的ORF2双酶切产物插入原核表达载体pET-32α与pET-41α,得到重组子命名为pET-ORF2-1与pET-ORF2-2。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Westernblot分析,结果表明PCV1-ORF2在pET-32α和pET-41α中获得了高效融合表达,其表达蛋白分子量约为30Kda和45Kda。
关键词
PCV1
ORF2
克隆
改造
表达
Keywords
PCV1 ORF2
cloning
reconstructing
expression
分类号
S852.659.6 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪圆环病毒2型ORF2和ORF1-2串联基因重组腺病毒对小鼠的免疫效果
刘建营
丛丽媛
赵路易
王建龙
王晶钰
徐维加
宋长绪
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
1
下载PDF
职称材料
2
猪圆环病毒1型ORF2基因的改造及其在大肠杆菌中的表达
张福良
孙利华
宋长绪
《中国动物检疫》
CAS
2009
2
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