基于斑马鱼模型的黄芩提取物抗炎和抗氧化活性评价

目的采用斑马鱼模型研究黄芩提取物毒性、抗炎作用和抗氧化作用。方法采用截断转基因斑马鱼Tg(colo1a:EGFp)的尾鳍构建损伤炎症模型,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(EGFp)标记的中性粒细胞和巨噬细胞数量,评价黄芩提取物抗炎症细胞聚集和反向迁移能力;采用LPS诱导构建氧化应激模型,DCFH-DA荧光探针染色斑马鱼体内活性氧(ROS)含量水平评价黄芩提取物对斑马鱼的抗氧化作用。结果黄芩提取物在质量浓度为0.60和1.25 mg/mL均能抑制炎症细胞聚集和促进炎症细胞清除,且呈现剂量依赖效应;黄芩提取物在质量浓度为0.02、0.04 mg/mL均具有减弱斑马鱼ROS相对荧光强度的作用,且呈剂量依赖效应。结论黄芩提取物具有明显的抗炎和抗氧化作用。

红山茶组合物诱导的人皮肤成纤维细胞自噬

通过研究确定红山茶组合物(m_(红山茶花提取物):m_(红山茶叶提取物):m_(红山茶籽油)=2:1:17),进而研究红山茶组合物诱导的人皮肤成纤维细胞自噬。采用DPPH清除率来评价红山茶花提取物和红山茶叶提取物的组合物抗氧化能力;红山茶组合物处理后显微镜观察人皮肤成纤维细胞中的自噬小泡;透射电镜观察细胞中自噬溶酶体的出现;Western Blot检测自噬关键蛋白LC3II的表达水平。结果表明:红山茶花提取物和红山茶叶提取物质量比为2:1时,DPPH清除率最高;与对照组相比,体积分数为0.20%、0.40%的红山茶组合物处理人皮肤成纤维细胞72 h后可以诱导细胞自噬,说明红山茶组合物可以诱导人皮肤成纤维细胞自噬。

双水相体系萃取分离发酵液中的裂褶菌多糖

以裂褶菌发酵液为原料,采用双水相体系对裂褶菌多糖(SPG)的提取工艺进行优化。通过比较乙醇/Na_2CO_3、乙醇/K_2HPO_4、乙醇/(NH_4)_2SO_4、PEG/(NH_4)_2SO_4 4种组成的双水相体系对SPG的萃取率和分配系数的影响,确定最佳双水相体系;考察有机相和无机相的质量分数及料液比对SPG萃取率及蛋白质清除率的影响,进一步优化了萃取条件;最后采用红外光谱验证了多糖的结构。结果表明:最佳双水相萃取体系为25%乙醇/20%Na_2CO_3,最适料液比(v/w)为1:15时,SPG的萃取率达94.14%±1.59%,蛋白质清除率为93.35%±5.73%;红外光谱可以推断分离的多糖为裂褶菌多糖,含有呋喃环,糖苷键可能为α型。