衰老脂肪组织的微环境

脂肪组织是人体重要的能量储存库,也是最大的内分泌器官,在衰老过程中发生显著变化。脂肪组织中衰老的细胞通过分泌细胞因子、释放代谢物质等与邻近细胞相互作用,可造成脂肪组织功能异常,并引发全身性的慢性炎症或代谢紊乱。目前,对衰老过程中脂肪组织微环境的变化及其机制并不完全清楚。本文概述了衰老脂肪组织微环境的改变,包括脂肪组织中多种细胞类型的变化、细胞外基质堆积造成的纤维化、细胞因子等分泌表型和代谢物的改变;归纳总结了衰老脂肪组织微环境如何影响脂肪组织功能以及全身慢性低度炎症、胰岛素抵抗和早衰等;最后介绍了几种有望延缓脂肪组织衰老的策略,包括改善脂肪细胞产热、衰老细胞消融药物、饮食和锻炼。本综述对衰老脂肪组织微环境的深入探讨,有望为衰老相关疾病的治疗提供理论支撑。

树突状细胞在过敏性哮喘发病中的作用及机制研究新进展

过敏性哮喘是一种针对无害空气过敏原发生的以Th2细胞过度激活为特征的气道慢性炎症性疾病,其发病率高且易反复发作,严重危害人类健康。近年来研究表明树突状细胞(dendritic cell,DC)在启动和维持过敏性哮喘的Th2型免疫反应中发挥关键作用,但机制不是十分清楚。因此,研究DC调控过敏性哮喘发病的机制具有重要意义。本文回顾了免疫代谢、细胞因子和表观遗传学因素调控DC功能及DC介导的Th2免疫反应,进而影响过敏性哮喘的最新进展,为通过靶向DC治疗过敏性哮喘提供新策略。

胰岛素受体底物1 rs1801278基因多态性TaqMan-MGB双荧光探针法的建立与验证

目的建立一种适合临床常规检测胰岛素受体底物1 (IRS1)rs1801278基因多态性的实验方法。方法随机收集2015年3月~2016年6月解放军第三〇二医院200名健康体检者的外周血标本,设计针对IRS1 rs1801278基因多态性位点的特异性引物和荧光探针,通过TaqMan-MGB实时荧光聚合酶链反应法检测rs1801278基因多态性,以基因测序法(金标准)进行验证,同时初步探讨IRS1 rs1801278不同基因型在本研究人群中的分布频率。结果 TaqMan-MGB双荧光探针法鉴别IRS1 rs1801278的3种基因型,与基因测序法结果一致率为100%。IRS1 rs1801278基因多态性中T/T、C/T和C/C基因型在本研究人群中的分布频率分别为0%、1%和99%。结论根据单核苷酸多态性基因型特异性探针和引物所建立的TaqMan-MGB荧光探针法能快速有效地进行IRS1rs1801278基因多态性分型,结果可靠,操作易行,然而对中国汉族2型糖尿病患者个体化治疗效果的预测价值有限,不建议临床常规开展。

角质形成细胞在银屑病中作用的研究进展

银屑病是慢性复发性皮肤疾病,其发生与免疫功能失调、环境因素、信号转导通路紊乱及银屑病易感基因相关。既往研究表明角质形成细胞(KC)在银屑病的发生发展中发挥重要作用。银屑病中KC如何影响炎症细胞的募集、活化,及炎症因子如何导致炎症级联放大尚不明确。KC作为银屑病治疗的靶标,具有广泛的应用前景。本文从银屑病中KC的屏障功能、增殖分化及角质形成细胞与免疫细胞的相互作用作综述。

管家基因GAPDH在肿瘤与衰老组织中作为内参应慎重

甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是糖酵解过程中的一个酶,编码该酶的基因为管家基因,几乎在所有组织中呈高水平、恒定表达,常用作蛋白质、RNA、DNA等分子生物学相关实验的标准化内参。但近年来,GAPDH作为内参受到质疑,特别是在肿瘤组织、衰老组织。大量研究证实,GAPDH在多种肿瘤中表达上调,衰老的骨骼肌中下调。其中GAPDH在肿瘤中的高表达可能与肿瘤的侵袭性转移和细胞增殖相关。本文就GAPDH在肿瘤、衰老组织或细胞中的表达情况以及可能机制作一综述,旨在更全面地了解管家基因GAPDH在肿瘤与衰老组织、细胞中是否恒定表达,以便在研究中可以选择最优的内参做参照。

DC介导的Th2细胞免疫紊乱在Th2细胞免疫紊乱相关过敏性疾病中的研究进展

辅助性T细胞2(Th2细胞)是体液免疫的重要组成部分,其通过分泌白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13等细胞因子参与2型免疫反应。树突状细胞(DC)是主要的抗原呈递细胞,其通过分泌CC趋化因子配体(CCL) 17、CCL22等趋化因子,摄取、加工、处理变应原,并上调自身表面共刺激分子。随后,DC将抗原肽呈递给初始T细胞并使其进一步分化为Th2细胞。特应性皮炎、变应性哮喘和食物过敏是DC介导的Th2免疫紊乱相关过敏性疾病,近年来针对这些疾病的发病机制研究已取得一定进展。为研发出更加个性化和靶向性的药物,未来DC的异质性及在不同器官中的功能差异仍需进一步研究。

早老素导致基因组不稳定的机制

基因组不稳定(genomic instability)是机体衰老的标志之一,也是儿童早老症(HutchinsonGilford progeria syndrome,HGPS)患者细胞的典型特征。HGPS的发生与早老素(progerin)堆积密切相关,但早老素如何引起基因组不稳定尚缺乏系统性的阐述。基因组的结构稳定与DNA的正确复制、DNA损伤修复、端粒的维持和稳定以及表观遗传学修饰密切相关。本文主要讨论早老素在改变正常核纤层结构的基础上,通过影响相关通路关键蛋白质的水平或者定位,引起细胞内氧化应激增强、DNA复制应激和DNA损伤修复障碍,细胞DNA损伤增多和端粒的加速缩短,并在改变组蛋白甲基化和乙酰化方面导致基因组不稳定的机制。

炎症性肠病的免疫调控研究进展

炎症性肠病(IBD)是一类高发、病因尚未明确的慢性自身免疫性疾病,在全世界范围内发病率呈上升趋势。肠道微环境稳态失衡、免疫功能失调、环境变化或遗传因素都可能导致疾病的发生。免疫细胞,如巨噬细胞、树突状细胞、固有淋巴细胞以及T细胞、B细胞在IBD中发挥重要作用。巨噬细胞或树突状细胞通过上调炎症细胞因子表达,T细胞、B细胞通过分泌细胞因子或抗体参与IBD免疫调控。阐明IBD免疫作用的机制,可能为IBD的治疗提供新靶点。

沉默信息调节因子1通过诱导miR-221/222表达促进细胞自噬

微小RNA(microRNAs,miRNAs,)是一类强大的基因表达调控子,可在转录及转录后水平负调控靶基因的表达来参与生物学过程。沉默信息调节因子1(silent information regulator1,SIRT1)底物众多,可通过去乙酰化作用参与多种细胞生命活动进程。尽管如此,SIRT1与非编码RNA如miRNA的表达调控关系仍有待深入研究。本文利用荧光定量PCR检测发现,SIRT1与miR-221和miR-222的表达呈正相关:干扰SIRT1后,miR-221/222呈低水平表达;而过表达SIRT1则促进miR-221/222的表达。将miR-221/222基因簇启动子区序列插入p EZX-GA01构建双荧光素酶报告载体,与SIRT1过表达质粒或干扰序列共转至细胞。结果显示,SIRT1可显著提高miR-221/222启动子区活性,提示SIRT1可在转录水平调节miR-221/222的表达。进一步运用Western印迹研究发现,在HEK293细胞中过表达miR-221/222可促进细胞的自噬能力,而抑制miR-221/222的表达可减弱自噬。此外,过表达SIRT1的同时抑制miR-221/222的表达可减弱SIRT1的自噬诱导作用。综上所述,SIRT1可通过诱导miR-221/222的表达促进细胞自噬,其具体作用机制有待进一步探讨。

抗HER-2纳米抗体的筛选、表达及功能鉴定

目的筛选获取抗HER-2纳米抗体序列,偶联人IgG1 Fc片段,采用原核表达系统表达重组抗HER-2纳米抗体并验证其生物学特征。方法基于天然噬菌体纳米抗体展示库,采用生物素-链霉亲和素液相筛选法,以生物素化HER-2抗原为靶点经三轮淘选,随机挑取单克隆进行ELISA鉴定并测序。获得抗HER-2纳米抗体序列,将其偶联人IgG1 Fc片段,并将重组抗HER-2纳米抗体序列克隆至原核表达载体pET-30a,转化至表达菌Arctic Express,诱导重组抗HER-2纳米抗体表达并纯化,采用SPR、Western blot、细胞免疫荧光对纯化后的重组抗HER-2纳米抗体特征和功能进行验证。结果经淘选获得了一条抗HER-2纳米抗体序列,与人IgG1 Fc片段偶联,成功构建了原核表达载体,并表达纯化获得的重组抗HER-2纳米抗体;SPR显示其亲和力较好,Western blot表明其可与HER-2抗原结合,细胞免疫荧光实验结果提示其可与人乳腺癌细胞SKBR-3结合。结论本实验获得了亲和力、特异性均良好且具有一定生物学功能的重组抗HER-2纳米抗体,可为其后续临床应用提供基础。

树突状细胞生物学、功能及其在肿瘤免疫治疗中的应用

树突状细胞(dendriticcell,DC)是目前发现的功能最强大的抗原提呈细胞(antigen-presentingcell,APC),在介导天然免疫与适应性免疫反应中发挥重要的作用。该文论述了DC的特征及功能、发育及调控、MAPK信号通路调控DC的可塑性和功能,以及DC在肿瘤免疫治疗中的作用,提出目前DC领域研究的重点、难点及展望。

PCK1通过能量代谢调控细胞衰老的研究进展

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)由磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)基因编码,是生物体内糖异生途径的第一个限速酶,在调控血糖水平和能量代谢等方面有重要作用。能量代谢的改变与细胞衰老进程密切相关,能量的产生和消耗失衡不利于个体长寿并会诱发多种衰老相关疾病。本文总结了PCK1通过影响能量代谢水平从而调控细胞衰老进程的研究进展,旨在阐明PCK1、能量代谢和细胞衰老之间的联系,为进一步研究PCK1作为潜在的衰老靶点在恢复身体机能和预防衰老相关疾病等领域的作用提供理论基础。

细胞色素P450基因多态性与药物代谢研究进展

细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP450)是参与人类药物代谢过程的重要酶,在肝细胞和小肠上皮细胞的光滑内质网中含量丰富,其主要功能是氧化还原各种内源性物质和外源性物质。CYP450酶参与80%目前应用药物的I相代谢,参与各种激素合成,影响与激素相关的肿瘤疾病发展。CYP450基因和表型存在高度多态性,体现在个体对于各种物质的代谢存在明显差异。本文综述了CYP450的基因多态性、与药物代谢相关的CYP450各亚型特点和临床意义,对发展以指导个体化用药为基础的精准医学具有重要意义。

丝状肌动蛋白的组装及其生物学功能

丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)是细胞骨架的组分之一,是由球状单体肌动蛋白(globular actin,G-actin)组装而成的多聚体。细胞中的F-actin聚合过程复杂而有序,并处于动态平衡。F-actin的聚合、解聚由许多结合因子调节,与胞内物质运输、细胞分裂、细胞骨架重排和细胞运动特性等相关。本文介绍了F-actin的组装过程及一些相关的结合蛋白在其中的作用,并着重阐述了胞质中F-actin在肿瘤细胞迁移和免疫逃逸、锚定细胞核、参与病毒感染和衰老,以及核内F-actin参与应激反应、调控基因表达和DNA损伤修复及构成核骨架方面的功能。