肝癌患者肝组织中螺杆菌感染研究

目的研究肝癌患者肝组织中螺杆菌(Hp)感染状况,进一步揭示Hp感染与肝癌的关系。方法收集正常人、慢性肝炎、肝癌患者肝组织各30例,均经病理证实。(1)在微需氧环境37℃下应用哥伦比亚培养基分离培养肝脏组织中Hp。(2)系列生化反应和速尿素酶检测。(3)免疫组化。(4)应用PCR扩增螺杆菌属16S rRNA基因及序列测定。结果 (1)所有的肝组织培养均未见细菌生长;(2)正常人、慢性肝炎患者肝组织快速尿素酶检测阳性率为0,肝癌为3%;1例肝癌组织硝酸盐试验和过氧化氢酶检测阳性。(3)免疫组化示9例肝癌组织发现Hp,检出率为30.0%。正常肝组织、慢性肝炎患者肝组织中未观察到Hp,与癌组织差异有统计学意义(P<0.05)。(4)PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳,于紫外检测仪下均可见16SrRNA基因阳性扩增带为109bp;30例原发性肝癌标本中有18例Hp16S rRNA基因,正常人、慢性肝炎组均无检出Hp16SrRNA基因,与癌组织差异有统计学意义(P<0.05)。肝组织16S rRNA PCR扩增产物测序对比分析,与Hp16SrRNA片段的基因有98.8%同源性。结论肝癌患者肝组织中存在Hp感染,可能与肝细胞癌存在相关性。

肝硬化患者肝组织中螺杆菌感染状况

目的研究肝硬化患者肝组织中螺杆菌(Hp)感染状况,进一步揭示Hp感染与肝硬化的关系。方法 (1)收集正常人、慢性肝炎、肝硬化患者肝组织各30例。(2)在微需氧环境(5%O2、10%CO2、85%N2),37℃培养肝脏组织中Hp。(3)免疫组化,肝脏组织均经常规脱水,石蜡包埋,4μm连续切片,HE染色,光镜观察。(4)应用PCR扩增螺杆菌属16SrRNA基因及序列测定。结果 (1)所有肝组织培养均未见细菌生长。(2)免疫组化显示5例肝硬化组织中观察到Hp存在,检出率为16.8%。正常肝组织、慢性肝炎患者肝组织中未观察到Hp存在,与肝硬化组织差异有统计学意义(P<0.05)。(3)30例肝硬化标本有14例检出螺杆菌16SrRNA基因,阳性率47%;正常人、慢性肝炎组织均无检出螺杆菌16SrRNA基因。肝硬化患者肝组织16SrRNAPCR扩增产物测序对比分析,与Hp16SrRNA片段的基因有98.8%同源性。结论肝硬化患者肝组织中存在Hp,Hp感染与肝硬化可能存在相关性。

CYP4F2基因多态性影响华法林初始治疗效果的临床研究

目的研究心脏瓣膜置换术后口服华法林抗凝治疗的初始剂量的个体化区别,分析CYP4F2 rs2108622基因型对口服华法林初始剂量的影响。方法入选广东省心血管病研究所2000年至2008年瓣膜置换术后口服华法林抗凝治疗的患者,回顾患者一般资料、临床资料、用药剂量、国际标准化比值(international normalizedratio,INR)和进入治疗窗时间(INR≥1.8)、超出治疗窗时间(INR>3.5)。结果本次研究共有769例患者资料齐全,民族均为中国汉族,其中CYP4F2基因型为CC型的患者占65.8%(n=506),CT型28.7%(n=221),TT型5.5%(n=42)。按基因型不同分别分析进入治疗窗(INR>1.8)和过度抗凝(INR>3.5)的时间发现,不同基因型之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CYP4F2基因型多态性对于口服华法林初始剂量存在一定的影响。

汉族早产儿支气管肺发育不良易感基因筛查

目的 探讨汉族早产儿支气管肺发育不良（BPD）易感基因位点多态性与BPD 发生发展的关系。方法 根据国内外文献，筛选出28个可能与 BPD 发生发展有关的候选基因位点；收集2013年4月至12月在广东省人民医院住院的胎龄≤32周、出生体质量≤1 500 g的46例汉族早产儿。其中 BPD 患儿31例（BPD组），非BPD患儿15例（对照组）。2组早产儿均于入院3 d内采血，提取DNA后应用PCR扩增、单碱基延伸及DNA质谱法对28个基因位点进行检测，并分析基因位点与 BPD 发生的关系。结果 28个基因位点中，14个基因型分布符合Hardy-W einberg平衡定律（P 〉0.05），具有群体代表性，列入候选基因。BPD 组患儿肿瘤坏死因子α（TNF-α）基因位点rs1799724和 Toll样受体-10（TLR-10）基因位点 rs11096955基因型发生变异，TNF-α基因位点 rs1799724 CC明显增多［93.5%（29/31例）］、TT明显减少［0（0/31例）］，与对照组［33.3%（5/15例）、20.0%（3/15例）］比较差异有统计学意义（χ^2=18.044，P 〈0.01）；TLR-10基因位点 rs11096955 AC明显增多［64.5%（20/31例）］、CC明显减少［12.9%（4/31例）］，与对照组［33.3%（5/15例）、46.7%（7/15例）］比较差异有统计学意义（χ^2=6.252，P =0.043）；BPD 组 TNF-α 基因位点 rs1799724中 C等位基因分布频率［93.5%（29/31例）］明显增高，与对照组［46.7%（7/15例）］比较差异有统计学意义（χ^2=23.833，P 〈0.01）。未发现与BPD严重程度有关的基因位点（P 〉0.05）。结论 TNF-α、TLR-10基因位点多态性可能与汉族早产儿BPD发生有关；TNF-α基因位点rs1799724 CC基因型和TLR-10基因位点rs11096955 AC基因型可能是 BPD易感基因型，而携带TNF-α基因位点rs1799724 C等位基因者BPD风险较高。