乌司他丁对热打击诱导人肠上皮细胞释放白细胞介素-8与p38信号通路的研究

目的 研究乌司他丁对热打击诱导人肠上皮细胞释放细胞因子的影响以及可能参与调控的信号通路.方法 用不同温度的热打击(39、41、43 ℃)1 h刺激培养的人肠上皮细胞株(SW480)后,继续于37 ℃下培养24 h,收集细胞和细胞上清液.另将细胞进行热打击(43 ℃,1 h),同时加用100 kU/L和1 000 kU/L的乌司他丁继续于37 ℃下培养24 h后收集细胞和细胞上清液;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液中白细胞介素-8(IL-8)的含量,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测细胞裂解液中p38蛋白表达.结果 低温度的热打击(39 ℃)对SW480细胞分泌IL-8没有诱导作用,但高温(41 ℃、43 ℃)可明显诱导IL-8水平的升高(均P【0.01);而乌司他丁可明显抑制热打击对SW480细胞IL-8的诱导表达作用(均P【0.01),尽管大剂量乌司他丁对IL-8的抑制作用较小剂量组更加明显,但两个剂量乌司他丁组间无明显差异.不同温度的热打击可诱导SW480细胞p38表达上调,并具有一定剂量依赖效应(均P【0.01).而乌司他丁不仅可以抑制SW480细胞p38的基础表达水平,并且小剂量的乌司他丁即可明显抑制热打击对p38的诱导表达作用(P【0.01),但两个剂量乌司他丁组间无明显差异.结论 乌司他丁可能通过降低p38表达来抑制热打击对肠上皮细胞释放IL-8的诱导作用,但同时也存在其他信号通路参与的可能,这为理解肠屏障细胞的炎症反应在重症中暑中肠道细菌和内毒素移位中的作用机制提供了一定的实验基础,也为乌司他丁作为免疫调节剂未来用于治疗重症中暑提供了实验依据.

脂多糖和热打击联合作用对人肠上皮细胞细胞骨架的影响

目的观察脂多糖(LPS)与热打击单独和联合作用对人肠上皮细胞细胞骨架的影响。方法培养人肠上皮细胞株(SW 480),实验分组为:对照组,热打击组(又分为热打击1、3、6 h组),LPS刺激组,热打击和LPS联合刺激组,用骨架蛋白(肌动蛋白F-actin)的特异性染料罗丹明标记的F-actin特异性结合物鬼笔环肽(rhodam ine-phalloid in)和细胞核特异性染色剂(DAPI)行免疫荧光,检测在上述刺激作用下细胞形态的改变和F-actin在细胞内分布的变化。结果相比于对照组,热打击1 h就可以使细胞轮廓变圆,细胞伪足变短变粗,细胞间间隙变大。热打击3 h时上述情况更加明显,而热打击6 h时,细胞几乎全部坏死漂浮。单独LPS作用6 h时也能看到多数细胞出现伪足变短变粗,细胞间间隙增大情况,但较单独热打击1 h组程度轻。而热打击和LPS联合作用则可看到二者间存在一定的协同作用。正常对照组细胞的F-actin呈相对均匀分布,但以细胞周边和核的周围居多,而单独LPS作用即可看到细胞骨架发生重组,出现应力纤维,而和热打击联合作用时,细胞周边的F-actin明显减少,出现明显的应力纤维(变粗、变短、紊乱,排列呈明显的非极性单向分布)。结论热打击和LPS单独作用均可使细胞形态发生明显改变,细胞骨架发生重组,细胞间间隙增大,并且二者之间存在一定的协同效应,这为理解重症中暑至多脏器功能衰竭(MODS)发生发展过程中,肠屏障细胞的通透性增加进而引发肠道细菌和内毒素移位的作用机制提供了直观的实验依据。

高龄PCI患者使用等渗对比剂联合术后定量饮水预防对比剂肾病的疗效

目的:探讨冠状动脉介入治疗(PCI)后不同的饮水方法联合使用等渗性对比剂预防高龄患者对比剂肾病(CIN)的疗效。方法:将222例接受PCI的高龄(≥70岁)患者随机分为自由饮水组(111例)和强化饮水组(111例),自由饮水组术后6h内嘱患者尽量饮水,24h总饮水量大于2000mL,但对术后6h的饮水量无明确要求;强化饮水组术后6h内饮水量1000mL以上,24h总饮水量大于2000mL。观察术后72h肌酐最高值、术后72h肌酐升高值及CIN发生率。结果:强化饮水组术后6h入量较自由饮水组明显增多,两组24h总饮水量无明显差异。自由饮水组较强化饮水组术后72h血清Cr最高值和升高值明显增加,CIN发生率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:术中使用等渗对比剂联合术后6h内指导患者强化饮水可减少高龄PCI患者CIN发生率。

高温高压蒸汽消毒对聚羟基乙酸生物性能的影响

目的探讨应用高温高压蒸汽消毒对聚羟基乙酸(PGA)材料生物性能的影响。方法高温高压蒸汽消毒处理PGA支架,行相关的细菌学实验,扫描电镜下观察材料形态,并对比不同处理方式的PGA的水解时间。将体外扩增的人脐静脉细胞种植于消毒后PGA支架上,观察细胞与支架的吸附情况。结果高温高压蒸汽消毒效果肯定,且不改变PGA三维形态,消毒后PGA应用氢氧化钠水解时间明显缩短,与平滑肌细胞组织相容性好。结论应用高温高压蒸汽消毒PGA支架具有一定的可行性。

老年高血压前期患者血管内皮功能的临床研究

目的研究生活方式和伊贝沙坦干预对老年高血压前期者血管内皮功能的影响。方法 70例老年高血压前期者随机分为生活方式干预组及伊贝沙坦干预组,观察1年,比较二组干预前后循环内皮细胞微颗粒(EMPS)水平及肱-踝脉搏波传导速度(baPWV)水平的变化。结果生活方式干预前后循环EMPs[(1 946±234)个/μl和(1 745±416)个/μl,t=2.530、P=0.011]水平及baPWV[(1 653±172)cm/s和(1 511±230)cm/s,t=2.448、P=0.017]水平比较差异均有统计学意义;伊贝沙坦干预前后循环EMPs[(19 507±146)个/μl和(1 446±286)个/μl,t=3.340、P=0.002]水平及baPWV[(1 639±165)cm/s和(1 361±211)cm/s,t=3.156、P=0.005]比较差异均有统计学意义;1年后伊贝沙坦干预组循环EMPs水平及baPWV水平与生活方式干预组比较有统计学差异(t=2.238、2.475,均P<0.05)。结论老年高血压前期者生活方式干预和伊贝沙坦干预对血管内皮功能都有保护作用,延缓动脉粥样硬化的发生和发展;伊贝沙坦干预较生活方式干预对血管内皮功能保护作用,延缓动脉粥样硬化的发生和发展效果更明显。

急性心肌梗死急诊介入治疗中血栓抽吸治疗对预后的影响

目的评价在急性sT段抬高型心肌梗死（STEMI）急诊介入治疗中应用血栓抽吸导管治疗后，不同抽吸结果对患者微循环和临床预后的影响。方法选择2008年7月至2011年2月在广东省老年医学研究所心内科接受急诊经皮冠状动脉介入治疗并使用血栓抽吸导管治疗的STEMI患者，根据抽吸结果分为抽吸阳性组（38例）和抽吸阴性组（28例），同期仅行介入治疗而未使用血栓抽吸导管治疗者为对照组（66例）。比较组间的基础资料、术后即刻冠状动脉造影以及住院期间和随访情况。结果3组间基础和临床资料相似；抽吸阴性组在无复流或慢血流及远端栓塞、主要心血管病事件改善方面的差异无统计学意义（P〉0．05）。抽吸阳性组比抽吸阴性组可显著改善cTFC帧数[（29±9）帧／s比（354-11）帧／s，P〈0．05]，心电图ST段回落[（90±20）％比（76±25）％，P〈0．05）]、心肌血清标志物浓度[肌酸激酶同工酶：（201±86）U／L比（264±93）U／L，P〈0．05；肌钙蛋白T：（41±21）μg／L比（60±24）μg/L，P〈0．05]。结论血栓抽吸导管在STEMI急诊PCI中应用安全可行，特别是抽吸阳性者能显著提高心肌灌注水平，改善临床预后。抽吸阴性者能改善微循环，但对临床预后的改善还有待进一步探讨。