抗磷脂抗体与自然流产患者既往流产次数的相关性分析

目的探讨典型和非典型抗磷脂抗体与自然流产患者既往流产次数的相关性。方法选择2019年5月至2022年8月于深圳中山泌尿外科医院就诊的自然流产患者878例,根据患者既往流产次数分为1次流产组(S1组,n=478)、2次流产组(S2组,n=292)、3次流产组(S3组,n=73)及≥4次流产组(S4组,n=35)。采用化学发光法和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测患者未孕状态下血清中典型抗磷脂抗体[抗β2糖蛋白1抗体(aβ2GPI)、抗心磷脂抗体(aCL)]和非典型抗磷脂抗体[抗磷脂酰丝氨酸/凝血酶原复合物抗体(aPS/PT)和抗膜联蛋白A5(aANXA5)]的IgM型和IgG型水平,并比较分析各组间不同类型抗磷脂抗体阳性率的差异。结果非典型抗磷脂抗体aPS/PT(IgM+IgG)和aPS/PT-IgM阳性率在4组间具有显著性差异(P<0.05),且S4组阳性率显著高于其余3组(P<0.05),但S1、S2和S3三组间均无统计学差异(P>0.05)。典型抗磷脂抗体aβ2GPI(IgM+IgG)、aCL(IgM+IgG)、aβ2GPI-IgM、aβ2GPI-IgG、aCL-IgM、aCL-IgG阳性检出率和非典型抗磷脂抗体aANXA5(IgM+IgG)、aANXA5-IgM、aANXA5-IgG及aPS/PT-IgG阳性检出率,在4组患者中的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论aβ2GPI、aCL、aANXA5及其分型抗体与既往自然流产次数无显著相关性,但aPS/PT抗体作为非典型的抗磷脂抗体,在≥4次的自然流产次数患者中具有更高的临床检测价值,可作为评估自然流产患者风险的实验室辅助诊断指标。

精子核成熟度与精液质量的相关性分析

目的探讨精子核成熟度与精子数量、活力、形态学和DNA完整性的相关性。方法回顾性分析2022年1月1日至12月31日在深圳中山泌尿外科医院行精子核成熟度检查的423例男性患者的临床资料,根据精子核成熟度不同将患者分为高成熟组(136例)、中成熟组(242例)和低成熟组(45例)。比较各组患者的精液常规参数(精子总数、精子浓度、前向运动精子百分率等)、DNA碎片指数(DFI)、顶体酶活性等,采用双变量、偏相关和线性回归分析精子核成熟度与精液质量的相关性。结果各组间精液常规参数比较:低成熟组的精子总数、精子浓度显著低于高成熟组(P<0.05);低成熟组和中成熟组的前向运动精子百分率显著低于高成熟组(P<0.05),非活动精子百分率显著高于高成熟组(P<0.05);正常形态精子百分率随着核成熟度的降低而显著降低(P<0.05),头部缺陷精子百分率随着核成熟度的降低而显著升高(P<0.05)。低成熟组和中成熟组的DFI和高DNA染色(HDS)显著高于高成熟组(P<0.05),低成熟组的HDS显著高于中成熟组(P<0.001);各组间精子顶体酶活性和活性氧(ROS)水平比较无显著性差异(P>0.05)。相关性分析结果显示:校正男方年龄因素后,除精子浓度与精子核成熟度未表现出明显相关性(P>0.05)外,精子总数、前向运动精子百分率、正常形态精子百分率与精子核成熟度均呈正相关(P<0.05),不活动精子百分率、头部缺陷精子百分率、DFI及HDS与精子核成熟度均呈负相关(P<0.05)。结论精子核成熟度与精子活力、形态学、DFI及HDS均存在一定相关性,尤其与HDS显著相关,提示精子核成熟度可以作为精液检查常规参数的补充,值得临床关注。

精子活性氧与精液常规参数及精浆生化指标的相关性研究

目的比较不同精子活性氧(ROS)水平的男性精液常规参数和精浆生化的差异,探究精子ROS与精液常规参数及精浆生化的相关性。方法回顾性分析2022年1—9月于男科实验室同时行精液常规分析、精子ROS分析检测以及精浆生化分析男性患者的数据。根据精子ROS水平分为三组:ROS低组(ROS<20%,n=1578)、ROS中组(20%≤ROS<40%,n=658)和ROS高组(ROS≥40%,n=251)。采用非参数检验比较各组差异,采用偏相关性分析确定ROS与精液常规参数及精浆生化指标的关系。结果ROS低组、中组和高组的禁欲时间存在差异(P=0.004),年龄、BMI、精液体积则无组间差异。ROS低组的精子浓度和正常形态精子高于ROS中组和ROS高组,分别为69.40(69.40)×10^(6)/mL vs.51.55(54.10)×10^(6)/mL vs.44.65(50.80)×10^(6)/mL(P<0.001)以及5.50%(3.00%)vs.4.80%(3.20%)vs.5.00%(2.70%)(P<0.001);ROS低组的前向运动精子高于ROS中组(46.00%(24.30%)vs.43.65%(23.80%),P=0.006),而与ROS高组之间无统计学差异。ROS低组的精浆锌和精浆肉碱浓度高于ROS中组和ROS高组,分别为2.64(1.58)mmol/L vs.2.30(1.43)mmol/L vs.2.14(1.23)mmol/L(P<0.001)以及235.72(177.53)μmol/L vs.231.30(159.77)μmol/L vs.210.40(141.74)μmol/L(P<0.001);ROS低组的精浆果糖浓度低于ROS中组(P=0.008),而与ROS高组间无显著差异。以禁欲时间作为控制变量的偏相关分析显示,精子ROS与精子浓度、前向运动精子、正常形态精子之间呈负相关,相关性系数(r′)分别为-0.218(P<0.001)、-0.055(P=0.006)、-0.112(P<0.001);精子ROS与精浆锌和肉碱浓度亦呈负相关,r′分别为-0.167(P<0.001)和-0.117(P<0.001),而与精浆果糖水平呈显著正相关(r′=0.062,P=0.002)。结论不同精子ROS水平的男性精子的数目、活力、形态以及精浆生化指标存在差异,且精子ROS与上述参数指标之间具有统计学的相关性,但相关程度低(|r′|<0.3),提示精子ROS可能是独立于精液常规参数及精浆生化指标的精子质量评估指标。

1例PLCZ1复合杂合突变致IVF多原核受精及ICSI受精低下

目的探讨一例继发不孕不育夫妻体外受精(IVF)中观察到大部分受精卵存在多原核(MPN)受精的遗传病因。方法该病例夫妻双方全血DNA样本行全外显子组测序。男方及其父母外周血DNA样本行磷脂酶Cζ1(PLCZ1)突变位点Sanger测序家系验证。成熟卵子在卵胞质内单精子注射(ICSI)后,行卵母细胞辅助激活(AOA)。结果女方未检出与MPN或受精障碍表型相关的变异。男方检出与受精障碍表型相关的1个致病性及1个疑似致病性变异,呈复合杂合,为PLCZ1(NM_033123.3)[c.588C>A/p.Cys196*];[c.590G>A/p.Arg197His]。患者配偶第二周期行拮抗剂方案促排卵,一半卵子行ICSI,正常受精率为12.50%(1/8),受精卵受精后凋亡;另一半卵子行ICSI+AOA,正常受精率为22.22%(2/9),形成4枚低等级卵裂胚。移植后未孕,囊胚培养失败。第三周期配偶行拮抗剂方案加生长激素促排卵,全部成熟卵子均行ICSI+AOA,正常受精率为44.44%(4/9),均形成优质胚胎。新鲜移植后单胎活产。这两个ICSI周期的受精卵均无MPN表型。结论PLCZ1基因缺陷的男性除受精失败和早期胚胎发育阻滞外,IVF时可呈现多精受精所致的多原核表型。采用ICSI+AOA的治疗策略可有效改善精子PLCZ1缺陷病例的受精情况及妊娠结局。