基质胶对绒毛外细胞滋养层细胞体外侵袭的介导作用

目的探讨基质胶（Matrigel）在绒毛外细胞滋养层细胞（EVCT）的体外侵袭中的作用。方法取健康早孕妇女（孕7～9周）人工流产绒毛组织,利用Percoll梯度离心法及差速贴壁法,将纯化的绒毛外细胞滋养层细胞,按所需浓度接种于涂有Matrigel培养板或24孔Transwell侵入系统中培养。用细胞免疫荧光法检测TGFβ2、cytokeration7、integrinα1β1。用CCK-8评价细胞生长状况。用Transwell细胞侵入系统检测EVCT的体外侵袭作用。结果①EVCT在Matrigel包被的Petri皿培养4h,用细胞免疫荧光法显示有95%以上的细胞表达TGFβ2、cytokeration7和integrinα1β1;②EVCT在Matrigel培养不同时间后,其生长指数未有明显变化,提示Matrigel对EVCT的生长未有明显影响;③EVCT在Transwell侵袭系统中培养不同时间后,侵袭细胞的OD值提示48h细胞侵袭作用达到平台期。结论 Matrigel在EVCT体外侵袭中并不影响其细胞纯度及其生长曲线,其介导的体外侵袭在48h达到侵入平台期。

绒毛外细胞滋养层细胞体外侵袭模型的建立

目的建立绒毛外细胞滋养层细胞（EVCT）体外侵袭模型，为探讨滋养层细胞侵袭调节机制提供实验平台。方法取健康早孕妇女（孕7-9周）人工流产绒毛组织，利用Percoll梯度离心法及差速贴壁法，将纯化的绒毛外滋养层细胞，按所需浓度接种于涂有Matrigel培养板或24孔Transwell侵入系统中培养。用细胞免疫荧光法检测TGFβ2、cytokeration7、integrin α1β1。用CCK-8评价细胞生长状况。用Transwell细胞侵入系统检测EVCT的体外侵袭作用。结果EVCT在Matrigel包被的Petri皿培养4h，用细胞免疫荧光法显示有95％以上的细胞表达TGFβ2、cytokeration7，integrin α1β1。EVCT在Matrigei培养不同时间后，其生长指数未有明显变化，提示Matrigel对EVCT的生长未见明显影响。EVCT在Transwell侵袭系统中培养不同时间后．根据侵袭细胞的OD值，提示48h细胞侵袭作用达到平台期。结论本实验成功地建立了EVCT体外侵袭模型，可利用此模型研究滋养层细胞的侵袭机制。从而为研究妊娠生理、妊娠病理、妊娠免疫耐受及正常细胞到肿瘤细胞之间的转化提供了实验平台。