人ω1型干扰素基因在大肠杆菌中的表达

人ω型干扰素(huIFN-ω)是继α、β、γ后被发现的第4种干扰素型别。IFN-ω除具有与IFN-α相似的抗病毒功能外,在结构上还与动物滋养层干扰素高度相似,因此它既是人体滋养层蛋白启蒙研究的工具,又可能为人类生殖生物学研究提供直接信息。本文作者曾采用聚合酶链反应(PCR)技术首先在国内分离和克隆了IFN-ω1结构基因,这一初始克隆包括完整的成熟多肽及部分信号肽编码区。在此基础上。

乙型肝炎病毒PreS2蛋白在大肠杆菌中的表达

通过融合乙型肝炎病毒(HBV)PreS2基因及大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因,使HBVPreS2蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,推算所表达的融合蛋白占菌体可溶性蛋白的15％左右。经检测表明,表达产物可与抗PreS2单克隆和多克隆抗体反应,并能与多聚人血清白蛋白相结合,同时还具有较强的β-半乳糖苷酶活性,可用于抗PreS2抗体的血清学诊断。利用β-半乳糖苷酶底物类似物亲和层析的方法对融合蛋白进行一步纯化,通过Western印迹及N端氨基酸测序对纯化产物进行鉴定,表明虽然在裂解细菌的同时已加入蛋白酶抑制剂,但仍有相当一部分(>50％)的融合蛋白已在PreS2与β-半乳糖苷酶之间发生断裂,对此现象进行了讨论。

人HBV前S1蛋白在大肠杆菌中的融合型表达

乙型肝炎病毒(HBV)的包膜蛋白依次由108—115氨基酸的前S1蛋白、55氨基酸的前S2蛋白和226氨基酸的S蛋白组成。前S1蛋白的N端既含有直接介导毒粒与肝细胞膜结合的位点,又含有许多免疫原性较强的T细胞与B细胞表位,抗前S1抗体水平还是HBV血清学检查的一项重要指标。