镰刀菌诱导结香对白木香叶内生真菌分布和群落构成的影响研究

为了研究沉香形成前后白木香叶组织中内生真菌的分布和群落构成,采用石蜡永久制片法观察白木香叶组织显微结构,细胞化学法确定内生真菌的分布。通过改良的CTAB法对白木香进行总DNA提取,利用真核生物通用引物同时对植物和内生真菌rDNA ITS序列进行PCR扩增,构建内生真菌rDNA ITS文库,RFLP分析和序列测定,用PUAP软件进行系统发育分析,构建最大简约树。结果表明:镰刀菌诱导结香前后,白木香内生真菌菌丝主要分布于海绵组织和韧皮部,结香后韧皮部内生真菌菌丝相对丰度明显增大;茎点霉是未结香白木香叶内生真菌优势种群,刺盘孢菌是已结香白木香叶内生真菌优势种群;刺盘孢菌是未结香和已结香白木香唯一共有内生真菌,且丰度差异较大。不依赖分离培养的分子生物学方法可快速直观地用于植物组织内生真菌的鉴定。白木香叶内生真菌具有一定的遗传多样性,沉香形成前后白木香内生真菌群落构成差异较大。

铅锌尾矿中耐重金属镉的丝状真菌的分离鉴定

【目的】旨在从重金属污染地分离出耐重金属镉真菌,获得耐受重金属镉污染的高效菌株,为重金属污染微生物修复提供菌种资源。【方法】利用稀释平板涂布法,采用4种培养基对粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地9个样品进行分离,并结合形态学和ITS rDNA基因序列分析,鉴定分离到的耐镉真菌,最后对分离到的耐镉真菌进行最小抑制浓度(MIC)检测。【结果】从粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地分离出72株丝状真菌,经形态学和分子技术鉴定,它们主要属于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、枝孢属(Cladosporium)、油瓶霉属(Lecythophora)、拟青霉属(Paecilomyces)、镰刀孢属(Fusarium)等。MIC检测发现有4株丝状真菌耐镉浓度较高,Paecilomyces lilacinus(Thom)Samson(6-20p),Penicillium pinophilum Hedgcock(6-16p),Penicillium rolfsii Thom(6-16m)和Fusarium oxysporum Schlecht.(8-11p)分别为200、40、25和15 mmol/L。【结论】从粤东北梅州市梅县铅锌尾矿废弃地分离到的72株丝状真菌,不同程度耐受重金属镉,在重金属污染的治理中有可能发挥作用。本研究为镉污染环境的微生物修复提供了重要菌株。