PML-RARα245-hIL-2双基因表达载体的构建和表达研究

目的:采用长度为245 bp的PML-RARα融合基因片段构建一种新的PML-RARα融合基因与人白介素-2(hIL-2)基因真核双表达质粒。方法:利用RT-PCR从NB4细胞的RNA中扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp的基因片段,通过RT-PCR从Jurkat细胞中扩增hIL-2基因,并将两基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性。将重组质粒转染A549细胞,通过RT-PCR检测该质粒在真核细胞中的转录情况,利用点杂交和ELISA技术检测目的蛋白的表达。结果:Nhe I/Mlu I和Sal I/Not I双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα融合基因片段和hIL-2基因,测序结果证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。将构建的pIRES-PML-RARα245-hIL-2质粒转染A549细胞后经RT-PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML-RARα和hIL-2基因能够在真核细胞中进行正常转录并翻译出相应蛋白。结论:成功构建了含有245 bp的PML-RARα基因与hIL-2基因的真核双表达载体,该载体能够在真核细胞中正常转录并翻译出PML-RARα和hIL-2蛋白,为利用DNA疫苗治疗急性早幼粒细胞白血病提供了更丰富的资料。

pIRES-PML-RARα重组载体的构建和表达研究

目的:采用不同长度的PML-RARα融合基因片段与pIRES质粒构建真核表达载体,并检测其在真核细胞中的表达。方法:利用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)从NB4细胞的RNA中分别扩增出包含PML-RARα基因融合点的长度为245 bp和384 bp的基因片段,并将不同长度的基因片段分别克隆到pIRES质粒中,通过酶切和测序验证重组质粒的正确性。将重组质粒转染K562细胞,通过RT-PCR和实时荧光定量PCR检测该质粒在真核细胞中的转录。结果:NheⅠ/MluⅠ双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα融合基因片段,测序结果证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确。将构建的pIRES-PML-RARα质粒转染K562细胞后经RT-PCR和实时荧光定量PCR鉴定表明,插入到重组质粒中的PML-RARα基因能够在真核细胞中进行正常转录。结论:成功构建了含有不同长度的PML-RARα基因的真核表达载体,该载体能够在真核细胞中正常转录,为研发DNA疫苗用于治疗急性早幼粒细胞白血病提供重要资料。

左卡尼汀治疗慢性肾衰竭合并冠心病心律失常的效果观察

目的探讨左卡尼汀治疗慢性肾衰竭合并冠心病心律失常的临床效果。方法选取2011年4月~2012年6月入住本院进行治疗的48例慢性肾衰竭合并冠心病心律失常患者作为研究对象,将其随机分为对照组和观察组,每组24例,对照组进行常规治疗,如血液透析治疗、降压药物治疗、贫血纠正治疗、扩张血管药物治疗以及强心利尿药物治疗,观察组在常规治疗的基础上采用左卡尼汀进行治疗,患者进行透析后,静脉注射左卡尼汀1 g。两组患者均治疗3个月,治疗结束后,比较两组的临床疗效。结果观察组治疗总有效率为87.50%,明显高于对照组的66.67%,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后,两组患者的左心室射血分数均明显提高,左心室收缩末期内径和左心室舒张末期内径均明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组治疗后的各项指标改善程度均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论左卡尼汀能够有效治疗慢性肾衰竭合并冠心病心律失常,有效改善患者的肾功能和心功能,使患者的生活质量得到提升,值得临床推广应用。

左甲状腺素治疗妊娠期亚临床甲状腺功能减退的用药剂量研究

目的对左甲状腺素（L-T4）治疗妊娠期亚临床甲状腺功能减退（SCH）的用药剂量进行研究。方法选取2012年7月-2014年1月间在我院接受治疗的妊娠期SCH患者53例,每4周监测患者甲状腺功能,根据患者甲状腺激素（TSH）水平的实际情况对L-T4剂量进行调整,从而使患者TSH值达标。记录患者首次诊断时体质量、甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）水平、TSH值、新生儿体质量、产前体质量等。结果患者产生所使用的L-T4剂量与患者体质量、体质量增加值、首诊时TSH值、新生儿体质量等数据无明显关系（P〉0.05）;与孕期FT4波动及TPO-Ab阳性有关（P〈0.05）。结论患者在首诊时的TSH值、体质量、孕期体质量增加值、新生儿体质量等数据不能对患者产前L-T4的使用剂量进行预测,与孕期FT4水平及TPO-Ab阳性有关。

胺碘酮防治急性心肌梗死溶栓术后再灌注心律失常研究

目的胺碘酮防治急性心肌梗死(AMI)溶栓术后再灌注心律失常研究。方法80例接受溶栓治疗的AMI患者随机分为胺碘酮治疗组(A组,40例)和常规治疗组(B组,40例),观察两组患者成功溶栓后再灌注心律失常的发生率。结果溶栓后A组再灌注心律失常发生率较B组低(27.5%vs47.5%,P<0.05)。结论应用胺碘酮有效减少AMI患者溶栓后再灌注心律失常的发生率。

血液肿瘤DNA疫苗研究进展

DNA疫苗能够诱导机体产生特异性体液和细胞免疫反应,基于血液肿瘤抗原而设计的DNA疫苗,有可能促进机体的抗肿瘤免疫应答能力,而消除微小残留病变,预防复发和延长无病生存期。