广东百香果炭疽病病原菌的分离及鉴定

随着我国百香果产业的发展,病虫害成为生产中不可忽视的问题.采用组织分离法,对广东省河源市和平县和广州市南沙区百香果产区采集到的炭疽病果实和枝蔓样本进行分离纯化,获得4个高频率出现的菌株.通过致病性测定,确认果实病原菌菌株ZB2-1和枝蔓病原菌菌株DGZB,二者的形态特征与巴西炭疽菌(Colletotrichum brasiliense)相似,通过构建多基因联合系统发育树,发现两个菌株与巴西炭疽菌处于同一分支,自展值为100%.结合形态学特征、致病性测定以及构建多基因序列系统发育树的方法进行病原鉴定,结果表明,在广东省河源市和平县和广州市南沙区侵染百香果果实和枝蔓的炭疽病菌主要为巴西炭疽菌.

广东花生果腐病病原菌鉴定及药剂筛选试验

【目的】鉴定广东花生果腐病病原菌类型并筛选有效的杀菌剂种类,为生产上防控该病害提供参考。【方法】采用组织分离法从大田采集的患病花生果荚中分离获得果腐病的真菌纯培养物,回接验证分离菌株的致病性后确认其病原,通过克隆菌株的ITS序列并进行系统发育分析鉴定病原菌种类。采用菌丝生长速率法测定40%福美双水悬浮剂、98%噁霉灵可溶性粉剂、24%井冈霉素A水剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂和10%多抗霉素可湿性粉剂对该病原菌的抑菌效果。【结果】从韶关采集的花生果腐病样本中分离获得2株病原真菌,回接后均可以引起花生果荚腐烂,严重时导致果仁腐烂。基于菌株ITS序列的系统发育分析显示病原菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxyspourm)和茄病镰刀菌(Fusarium solani)。供试杀菌剂中40%福美双悬浮剂对2种病原真菌的抑菌效果最好,EC50分别为0.001 mg/L和0.021 mg/L,其次是噁霉灵,EC50分别为0.296 mg/L和0.217mg/L,井冈霉素A的EC50分别为20.575 mg/L和11.185 mg/L,苯醚甲环唑和多抗霉素对2株病原真菌没有抑菌效果。【结论】广东韶关地区花生果腐病主要由镰刀菌复合感染引起,以茄病镰刀菌为主,病原菌对福美双和噁霉灵敏感,生产上可以考虑使用这两种杀菌剂防控。

生防菌组合防控精品西瓜枯萎病的效果初探

【目的】筛选出对精品西瓜枯萎病具有防效的生防菌组合。【方法】将实验室筛选的5种生防菌株23(Bacillus amyloliquefaciens)、25(Exiguobacterium acetylicum)、28(B.pumilus)、37(B.licheniformis)、156(B.cereus)分别进行复配获得31个组合,通过平板对峙试验和分隔平板研究生防菌及其菌源VOCs的平板抑菌效果,测定其对西瓜种子和幼苗生长的影响,以及通过盆栽试验测定其对西瓜枯萎病的效果。【结果】31个生防菌组合对西瓜枯萎病菌的平板颉颃具有显著差异,其中组合28(23+28+37+156)抑菌率达68.06%;组合13(28+37)的菌源VOCs抑菌率可达41.60%;各组合预处理的西瓜种子和幼苗出苗率与对照无显著差异,但随着组合的复配单菌数量增加,种子萌发率和子叶出土率呈现下降趋势;盆栽试验中,各组合对西瓜枯萎病的防治效果存在差异,其中组合22(25+28+37)的防治效果高达61.1%。【结论】生防菌组合对西瓜枯萎病菌的平板颉颃和盆栽防治效果存在差异,预测2个或3个单菌复配的效果可能最佳,且颉颃型组合更利于防病。

芽胞杆菌ZKY01防控花生果腐病研究

【目的】镰刀菌复合感染引起的花生果腐病是广东花生重大土传病害,严重影响花生的产量和品质。针对花生果腐病筛选出生防菌并对其开展鉴定、生理生化测试和田间防控效果评估,以期为花生果腐病绿色防控提供理论依据。【方法】采用平板拮抗法从实验室保存的生防芽胞杆菌中筛选对花生果腐病病原菌具有广谱拮抗活性的菌株,然后结合16S rDNA、gyrA和gyrB序列扩增结果和系统发育分析开展菌株鉴定,并测定菌株的生理生化指标和Biolog-GN板碳源利用能力,利用MSgg、BGM1、BGDM培养基测定菌株的生物被膜形成能力,并通过大田小区试验测定菌株的田间防病效果。【结果】生防菌株ZKY01对花生果腐病病原菌Fusarium sp.G15、F.oxysporum R5和F.solani R4.2具有较好的广谱拮抗活性,平板抑菌率分别为72.23(±3.36)%、54.14(±10.33)%和69.37(±2.17)%;系统发育分析结果显示,菌株ZKY01为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),该菌能在3%~10%NaCl溶液中正常生长,生长温度范围为10~50℃,能利用50种碳源;能在MSgg、BGM1和BGDM液体培养基上形成稳定的薄皮。田间防效测试结果显示,ZKY01可湿性粉剂苗期淋施,对镰刀菌引起的花生果腐病防治效果达到95.14%。【结论】贝莱斯芽胞杆菌ZKY01在镰刀菌引起的花生果腐病生物防治中具有较大的应用潜力。

亚洲柑橘木虱对两种寄主植物嫩芽及其挥发物的行为反应

亚洲柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama是柑橘嫩梢期的重要害虫,也是柑橘黄龙病的传播媒介。本文采用顶空固相微萃取和气质联用技术(GC-MS)测定了九里香Murraya exotica L.、砂糖橘Citrus reticulate cv. Shatangju不同发育状态嫩芽的挥发性成分,并利用四臂嗅觉仪测定了亚洲柑橘木虱成虫对九里香和砂糖橘嫩芽中的4种共有挥发性成分葎草烯、正己醛、石竹烯、反式-2-己烯醛的趋性反应,从行为学反应和化学成分等方面深入研究了亚洲柑橘木虱和寄主植物挥发物的关系,以期探究植物源气味在亚洲柑橘木虱寄主选择中的作用。结果表明:(1)砂糖橘未展开嫩芽、半展开嫩芽分别含有36种、41种挥发性物质,全展开嫩芽和新叶分别含有32种和37种挥发性物质,九里香未展开嫩芽和展开嫩芽分别含有20种和14种挥发性物质;(2)两种植物不同发育状态嫩芽的共有挥发物有8种,分别是葎草烯、正己醛、石竹烯、反式-2-己烯醛、[S-(E,E)]-1-乙基-5-亚甲基-8-(1-甲基乙基)-1,6-环癸二烯、α-荜澄茄油烯、γ-芹子烯和δ-杜松烯;(3)亚洲柑橘木虱成虫对10μL/mL石竹烯、100μL/mL反式-2-己烯醛以及1μL/mL葎草烯有明显的正趋性,研究结果可为亚洲柑橘木虱引诱剂的开发提供依据。

互叶白千层及其挥发物对柑橘木虱行为选择的影响及其应用

柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)是危害柑橘嫩梢期的害虫,是柑橘黄龙病的传播媒介之一.田间调查表明互叶白千层(Melaleuca alternifolia Cheel)隔离防护带对柑橘园中的柑橘木虱起到了有效的防控作用.本研究采用气相色谱-质谱联用技术分析了广东省德庆市柑橘园种植的互叶白千层植株的挥发物组分,结合气相色谱-触角电位技术研究了柑橘木虱成虫对互叶白千层精油的触角电位反应,并利用Y型嗅觉仪测试了柑橘木虱对该植物、植物精油及其主要挥发物的行为反应.结果表明,互叶白千层生物型为4-松油醇,挥发物中含有29种化合物.柑橘木虱雌成虫触角对互叶白千层精油中的α-松油烯、 γ-松油烯和4-松油醇均有电生理反应,雄成虫触角对γ-松油烯和4-松油醇有电生理反应.行为反应测试结果表明,柑橘木虱成虫对互叶白千层枝叶具有明显驱避作用,对20μL/mL、 30μL/mL互叶白千层精油以及100μL/mL 4-松油醇亦均具有明显驱避作用,而对0.1μL/mL γ-松油烯具有明显引诱作用.本研究从行为学反应和化学成分等方面深入研究了柑橘木虱和互叶白千层间的关系,研究结果可为利用4-松油醇型互叶白千层防控柑橘木虱以及开发柑橘木虱绿色防控技术提供理论依据.

不同品种龙眼花营养成分分析

【目的】探究龙眼花的营养成分,比较不同品种龙眼花营养成分差异,为探究龙眼花的深加工以及综合利用提供依据。【方法】通过考马斯亮蓝法、蒽酮法、2,4-二硝基苯肼比色法分别测定21个不同品种龙眼雌花和雄花可溶性蛋白、可溶性糖和维生素C含量;利用主成分分析对21个品种龙眼雌雄花营养成分进行综合评价,同时利用聚类分析将其归类。【结果】龙眼雄花可溶性蛋白、可溶性糖、维生素C含量高于雌花,雄花3种营养成分平均值分别为14.02、191.23、5.29 mg/g,而雌花则分别为12.54、167.25、5.21 mg/g。在21个检测品种中,3种营养成分都较高的龙眼品种有石硖、红壳、双孖木、水眼、从化大个圆、鸡卵眼、红核,从中提取3个主成分,累计贡献率达78.56%,可以较好地反映21个品种综合营养品质;以不同的营养成分聚类得到不同的结果,均可以在阈值为5时将21个品种分为3类。【结论】龙眼花可溶性糖含量较高,主要集中在100~250 mg/g,可溶性蛋白和维生素C含量分别集中在10~20 mg/g和2~10 mg/g,龙眼花营养成分丰富,可作为功能食品或药用开发的原料。

生防细菌PP19和SI17菌悬液对荔枝霜疫病的防病作用初探

【目的】筛选新型高效的生防有益细菌防治果树病害如采后荔枝霜疫病,减少在运输过程中的损失,延缓褐变;揭示生防菌发挥防病作用的可能机制。【方法】将前期优选的生防解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)PP19和生防乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)SI17,分别制备其菌体悬浮液,喷雾预处理采后荔枝果实,24 h后喷雾接种霜疫霉菌(Peronophythora litchii)SC18,随后观察果实病害严重度,检测不同时间点果皮对应的酶活性或物质含量。【结果】生防菌PP19和SI17菌悬液均显著降低采后荔枝霜疫病的发生,防效分别达到39.59%~88.76%和18.08%~91.01%;菌悬液提高果皮CAT、SOD、GLU、PAL、PPO活性,增加果皮花色素苷含量;同时,降低果皮花色素苷酶活性、H2O2含量及总酚含量。SI17比PP19更能提高植物几丁质酶活性。【结论】通过上述结果,推测两个生防菌发挥生防效果可能与改变了果皮抗病相关酶活性或物质含量有关。

一株镰刀菌酸高效降解菌的分离与鉴定及降解特性研究

为给镰刀菌酸(Fusaric Acid,FA)污染土壤和饲料脱毒提供菌株资源,从发生枯萎病的香蕉根际土里采集土壤样品,通过富集培养,分离出一株FA降解菌FAD1.通过菌落形态特征观察、16S rDNA基因序列比对,菌株FAD1鉴定为分枝杆菌属(Mycolicibacterium sp.),将其接种至以FA作为唯一碳(C)或氮(N)源培养基中观察生长特性,通过高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)和植物活体测试评估FAD1对FA的降解效果.研究表明,FAD1在以FA作为唯一C或N源的培养基中均可生长,其中在以FA作为唯一N源和额外添加C、N源培养基中对FA的降解效果最佳.在HPLC检测结果表明,FAD1在含有FA的培养基中培养至衰退期,FA降解率高达89%.植物活体测试显示,番茄(Solanum lycopersicum)幼苗在含有FA且未经FAD1发酵的培养基中浸泡40 h后失去膨压、叶面失水死亡,而其余经FAD1发酵后的处理组均存活.综上所述,FAD1能够在以FA作为唯一C、N源的培养基中生长,对FA具有一定的降解能力,在防治FA对植物、动物和微生物的危害方面具有一定的应用价值.

黑水虻幼虫肠道微生物研究进展

黑水虻Hermetia illucens L.是一种重要环境昆虫,广泛应用于有机废弃物无害化处理和资源化利用。研究发现来自幼虫的肠道微生物可以促进黑水虻幼虫的生长发育,并提高废弃物转化效率,黑水虻幼虫肠道微生物及其功能得到了广泛的关注。本研究系统综述了黑水虻幼虫肠道微生物的研究方法,以及近年来肠道微生物在协助黑水虻幼虫生长、提高粪污处理效率和消减环境毒素(抗生素、重金属等)中的作用,并进一步探讨未来黑水虻幼虫肠道微生物研究与利用需重点关注的方向,为黑水虻肠道微生物的研究与利用提供参考。