磷酸肌醇3激酶和信息转导转录激活子6对支气管哮喘患者T淋巴细胞增殖的影响

目的探讨磷酸肌醇3激酶(PI_3K)和信息转导转录激活子6(STAT_6)对支气管哮喘(简称哮喘)患者 T 淋巴细胞增殖的意义。方法收集2004年8月至2005年2月哮喘患者(哮喘组)和正常对照者(对照组)的外周血标本各15例,体外分离获得并培养两组外周血 CD_4^+和 CD_8^+ T 淋巴细胞,其中哮喘组 CD_4^+和CD_8^+ T 淋巴细胞根据加入 PI_3K 和 STAT_6的抑制剂 LY294002和γ干扰素(IFN-γ)的不同分为4组,分别为对照组(A 组)、LY294002组(B 组)、IFN-γ组(C 组)和 LY294002+IFN-γ组(D 组),用流式细胞术检测细胞周期的时相分布、细胞周期调节蛋白(P27kipl、Cyclin D、Cyclin E)、PI_3K 和 STAT_6的表达水平。结果 (1)哮喘组 CD_4^+、CD_8^+ T 淋巴细胞的 G_0/G_1期分布比例、P27kipl 表达水平分别为82.0%、44.6%、13.2%、4.5%,对照组分别为99.0%、100.0%、47.2%、46.3%,两组比较差异有统计学意义(Z 值分别为3.54、4.23、3.09、2.51,P 分别<0.01、0.05);哮喘组 CD_4^+、CD_8^+ T 淋巴细胞 S 期分布比例、Cyclin E、PI_3K 和 STAT_6表达水平分别为18.0%、51.7%、7.9%、9.3%、7.6%、8.7%、8.2%、6.3%,对照组分别为0.2%、0.0%、3.7%、3.5%、3.3%、3.4%、1.9%、2.4%,两组比较差异有统计学意义(Z 值分别为2.88、4.61、1.95、2.06、2.51、2.32、4.38、2.22,P 均<0.05);(2)B 组CD_4^+ T 淋巴细胞 G_0/G_1、S 期分布比例、Cyclin D、Cyclin E 表达水平分别为95.6%、1.9%、13.3%、3.1%,A 组分别为82.0%、18.0%、35.0%、7.9%,B 组与 A 组比较差异有统计学意义(Z 值分别为2.04、2.23、2.78、1.99,P 均<0.05);B 组CD_8^+ T 淋巴细胞 S 期分布比例、Cyclin E 分别为1.0%、4.1%,A 组分别为51.7%、9.3%,B 组与 A 组比较差异有统计学意义(Z 值分别为3.06、2.56,P 均<0.05);C 组 CD_4^+ T 淋巴细胞的 G_0/G_1、S 期分布比例、P27kipl 表达水平分别为94.0%、1.5%、46.1%,A 组分别为82.0%、18.0%、13.2%,C 组与 A 组比较差异有统计学意义(Z 值分别为2.17、2.54、2.81,P 均<0.05);C 组 CD_8^+ T 淋巴细胞 S 期分布比例、P27kipl 表达水平分别为10.8%、23.1%,A 组分别为51.7%、4.5%,两组比较差异有统计学意义(Z 值分别为2.67、2.05,P均<0.05);D 组 CD_4^+ T 淋巴细胞 G_0/G_1、S 期分布比例、P27kipl、Cyclin D 表达水平分别为97.0%、0.0%、40.4%、21.5%,A 组分别为82.0%、18.0%、13.2%、35.0%,D 组 G_0/G_1、S 期分布比例、P27kipl、Cyclin D 水平与 A 组比较差异有统计学意义(Z 值分别为2.73、2.79、2.56、2.10,P 均<0.05);D 组CD_8^+ T 淋巴细胞 G_0/G_1、S 期分布比例分别为92.1%、1.7%,A 组分别为44.6%、51.7%,两组比较差异有统计学意义(Z 值分别为2.22、3.12,P 均<0.05)。结论 PI_3K、STAT_6蛋白在哮喘患者 T 淋巴细胞亚群增殖中可望作为干预哮喘 T 淋巴细胞过度增殖的靶点,但 PI_3K 和转录激活子6通路(JAK1-STAT_6)信号转导途径在介导哮喘中的相互关系有待深入研究。