2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞增殖及凋亡的影响。方法运用四唑蓝（MTT）法和彗星电泳法检测2-甲氧雌二醇对HL60白血病细胞的增殖抑制及促凋亡作用；应用流式细胞技术检测Bcl-2蛋白的表达。结果（1）2-甲氧雌二醇在10～50μM浓度范围内作用72h以及30μM2-甲氧雌二醇在作用24、48、72h后对HL60白血病细胞有增殖抑制作用，这种作用呈时间-剂量依赖关系。（2）2-甲氧雌二醇在作用浓度为10、30、50μM时，HL60白血病细胞凋亡率分别为8．20％、28．20％、45．30％，与阴性对照组（1．00％）差异有统计学意义；30μM2-甲氧雌二醇在作用24、48、72h后，HL60白血病细胞凋亡率分别为3．71％、17．72％、43．58％，48、72h作用时间组与阴性对照组（1．00％）差异有统计学意义。（3）30μM2-甲氧雌二醇作用72h后的细胞，Bcl-2蛋白的表达较对照组显著减少。结论2-甲氧雌二醇具有对HL60白血病细胞增殖抑制及促凋亡作用，Bcl-2蛋白表达下调在此过程中可能发挥着重要的作用。

血清一氧化氮测定对早期诊断胎膜早破并绒毛膜羊膜炎的临床意义

目的初步评估血清一氧化氮（NO）在预测胎膜早破（PROM）并绒毛膜羊膜炎的临床意义。方法应用酶法对正常孕妇与PROM孕妇血清NO浓度进行测定。结果绒毛膜羊膜炎胎膜早破组孕妇血清NO水平明显高于非绒毛膜羊膜炎孕妇组及对照组，3组间比较差异有统计学意义（P〈O．01）。结论血清NO对早期监测绒毛膜羊膜炎的发展有重要意义。

外周血单核细胞来源树突状细胞体外扩增及诱导抗乳腺癌免疫的研究

目的研究外周血来源树突状细胞(DC)的体外扩增及诱导特异性抗乳腺癌细胞的免疫效应。方法(1)从外周血中分离单个核细胞后,获得单核细胞(monocyte,Mo)。粒-单集落刺激因子(GM-CSF)和白介素4(IL-4)诱导分化扩增培养7d后,应用流式细胞术进行表型分析。(2)诱导单核细胞分化的第3天加入人乳腺癌细胞株3A0的冻融抗原培养4d后,获得负载肿瘤抗原的成熟DC;将致敏DC与从外周血中分离的同种异体T淋巴细胞共培养3d,获得细胞毒T淋巴细胞(CTL);四甲基偶氮唑蓝法检测CTL及上清液对人乳腺癌细胞株3A0、人胚肾细胞株293T(对照细胞)、人肝癌细胞株HCCC-9810的细胞毒作用。结果(1)外周血来源Mo在GM-GSF和IL-4作用下,第7天后可分化生成成熟的DC,高表达DC特异性抗原CDla、CD80(B7-1)、CD86(B7-2)HLA-DR、CD83。(2)DC可负载并递呈肿瘤抗原,激活同种异体T淋巴细胞,诱导肿瘤特异性CTL产生。不同浓度CTL及上清液对乳腺癌细胞3A0有特异性杀伤、抑制作用(P<0.05)。结论外周血中Mo可体外分化扩增为成熟的功能性DC,并诱导出特异性杀伤乳腺癌细胞的免疫效应。

血清Pre-S_1蛋白的检测意义

目的通过对乙型肝炎患者血清前S1抗原(Pre-S1Ag)的检测,了解乙肝患者在HBeAg阴性时,Pre-S1Ag的阴阳情况,以及Pre-S1Ag与HBV-DNA的相关关系。方法收集本院门诊及住院乙型病毒性肝炎患者HBeAg阴性血清164例,HBeAg阳性81例,均经临床确诊,用酶联免疫吸附法检测了Pre-S1Ag,同时用PCR法检测了HBV-DNA。结果HBeAg阴性的164例中Pre-S1Ag的阳性例数为28例,阳性率17.1%(28/164),HBV-DNA的阳性例数为36例,阳性率22.0%(36/164),两者χ2=1.24,P>0.05。HBeAg阳性的81例标本中,Pre-S1Ag的阳性例数为62例,阳性率76.5%(62/81)HBV-DNA的阳性例数为63例,阳性率77.8%(63/81),两者χ2=0.04,P>0.05。99例HBV-DNA阳性的乙肝患者中Pre-S1Ag阳性89例,146例HBV-DNA阴性的患者中,Pre-S1Ag阴性145例,阳性1例,二者χ2=0.7,P>0.05,无明显性差异。结论HBeAg阴性的乙肝患者中有部分乙肝病毒在不断复制;Pre-S1Ag及HBV-DNA都是协助诊断乙肝病毒复制的有用指标。特别是无条件开展PCR的单位,Pre-S1Ag的检测同样可反映乙肝病毒复制的情况。特别在HBeAg阴性时,病毒仍有复制,对临床判断慢性乙肝病情与指导治疗都有一定临床价值,且操作简单、方便,易推广应用。

丙型肝炎病毒分片段试剂对抗-HCV临界值附近标本的确认价值

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)分片段(抗-HCV-C、抗-HCV-NS3、抗-HCV-NS4、抗-HCV-NS5)试剂对抗-HCV临界(CO)范围标本的确认价值。方法酶联免疫吸附法(ELISA)方法检测抗-HCV总抗体,结果为临界值(S/CO)或灰区状态(CO±10%)的可疑标本,分离血清后贮存于-29℃低温冰箱内,集中用丙型肝炎病毒(HCV)抗体分片段酶联免疫确认试剂,在全自动酶标分析仪上进行检测,收集可疑标本44例,其中抗-HCVCO±10%阳性24例及CO±10%阴性20例。同时收集抗-HCV总抗体S/CO值大于5.0的标本30例,健康对照标本20例。结果44例抗-HCVELISA总抗体检测S/CO值为灰区状态标本中,HCV分片段确认为阳性者为22.7%(10/44),可疑者为6.8%(3/44),阴性者为70.5%(31/44)。抗-HCVCO±10%阳性中的假阳性率为54.2%(13/24),抗-HCVCO±10%阴性中的假阴性率为5.0%(1/20)。30例抗-HCV检测S/CO值大于5.0的标本中,HCV分片段确认阳性者为80.0%(24/30),可疑者为13.3%(4/30),阴性者为6.7%(2/30);20例健康对照组HCV分片段确认试验均呈阴性反应。结论用HCV分片段酶联免疫确认试剂对抗-HCVELISA总抗体检测是较好的旁证试验,特别对不确定的灰区标本进一步的确认意义甚大,可降低抗-HCV在检测低危人群时所产生的假阳性及假阴性结果,提高临床丙型肝炎诊断的准确率,对血站安全用血、避免浪费血源有一定的实用价值,且操作简便,易于推广应用。

重症监护病房革兰阴性菌群变迁及耐药性研究

目的了解本地区重症监护病房的病原菌的菌种和耐药情况变迁，指导临床合理选用抗生素。方法2001年1月～2004年12月，从该院ICU患者标本中分离到453株细菌，其中革兰阴性菌280株。细菌鉴定及药敏试验采用VITEK-60全自动细菌鉴定仪。结果4年中病原菌感染率占首位的，分别是大肠埃希菌、产气肠杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌。对大肠埃希菌、产气肠杆菌和肺炎克雷伯菌活性最高的是亚胺培南（92％～100％）、头孢替坦（78％～94％）；对铜绿假单胞菌活性最高的是阿米卡星（91％）和哌拉西林／三唑巴坦（79％）；对嗜麦芽窄食单胞菌活性最高的是哌拉西林／三唑巴坦（100％）、头孢他啶（86％）、头孢吡肟（86％）和头孢替坦（86％）。不动杆菌的耐药率较高，对其活性最高的抗生素阿米卡星和亚胺堵南的敏感率也仪为（58％～67％）。结论亚胺培南、头孢替坦、阿米卡星和哌拉西林／三唑巴坦等抗生素对革兰阴性杆菌保持较高的敏感性。建议临床根据药敏结果选用抗生素。