肝硬化患者CD4^+ T细胞的改变及意义

目的探讨肝硬化患者CD4+T细胞的改变及意义,为晚期肝硬化的治疗提供指导。方法选取各种病因所致的肝硬化成年患者作为肝硬化组,再根据其病原学细分为病毒性肝炎肝硬化组和非病毒性肝炎肝硬化组,同时选取健康人群作为正常对照组,研究不同病因肝硬化和外周血CD4+T细胞绝对数及百分比的关系。结果肝硬化组外周血CD4+T细胞计数低于正常对照组(P<0.001),CD4+T细胞的百分比与正常对照组差异无统计学意义(P=0.810)。病毒性与非病毒性肝炎肝硬化组的外周血CD4+T细胞计数和CD4+T细胞的百分比差异均无统计学意义(P=0.234,P=0.166);CD4+T细胞计数与淋巴细胞计数、血小板计数相关(P<0.01)。结论病毒与非病毒感染的肝硬化患者CD4+T细胞的计数和百分比无明显差异;肝硬化患者外周血CD4+T细胞计数下降,与脾功能亢进关系密切。

非酒精性脂肪肝细胞模型中INK4位点反义非编码RNA和p14^(ARF)及p16^(INK4a)的表达

目的研究INK4位点反义非编码RNA(ANRIL)、p14ARF和p16INK4a的表达与非酒精性脂肪肝细胞增殖的关系。方法油酸以不同浓度(25、50、100μmol/L)和时间(12、24、48 h)作用Hep G2细胞,采用油红O染色观察细胞内脂滴形成,同时运用ELISA检测细胞内三酰甘油含量,构建非酒精性脂肪肝细胞模型;采用MTT法检测细胞增殖情况。接着实时定量RT-PCR和Western blot检测长非编码RNA ANRIL以及其反义转录本p14ARF和p16INK4a的mRNA水平,Western blot检测p14ARF和p16INK4a蛋白表达水平。结果在50μmol/L油酸作用于Hep G2细胞24 h时,细胞增殖活力最为旺盛,且脂质含量增加明显。在这个细胞模型中ANRIL、p14ARF和p16INK4a的表达均低于正常对照组。结论不饱和游离脂肪酸作用下,ANRIL和p14ARF、p16INK4a表达呈同向性改变;在非酒精性脂肪肝细胞模型中,肿瘤抑制基因p14ARF和p16INK4a表达下降,促使Hep G2异常增殖,可能与非酒精性脂肪肝不经肝硬化阶段即癌变一定程度上存在相关性。