TaqMan实时荧光PCR快速检测斑点叉尾鮰病毒

根据GenBank登录的斑点叉尾鮰病毒株ORF8基因序列,设计引物和Taqman荧光探针,建立了用于检测斑点叉尾鮰（Ictalurus Punctatus）病毒的实时荧光定量PCR方法;对实时荧光定量PCR反应条件进行了优化,评估了该方法的特异性、灵敏度和重复性,并建立了绝对定量方法。特异性试验证实,该方法只能检测到斑点叉尾鮰病毒,与真鲷虹彩病毒、蛙虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒、鳜鱼传染性脾肾坏死病毒等多种常见的水生动物病毒没有交叉反应,具有高度的特异性。标准曲线表明,在3.3×10~3.3×107拷贝数之间有较好的线性关系（r=0.998 3）,最少可检测到33个拷贝的阳性质粒,敏感度很高。同一样品于试验内及试验间的重复性试验发现,变异系数分别为0.7%和1.2%,重复性较好。该方法的检测时间从核酸抽提到出具结果仅需3h。试验结果表明,采用实时荧光PCR检测斑点叉尾鮰病毒方法具有特异性好、灵敏度高、检测耗时短的特点,并且能对病毒进行准确的定量分析,不仅适合口岸进出口检验检疫的需求,而且可以作为研究该病毒感染过程的有力工具。

中国马铃薯上几种纽带亚科线虫记述(Ⅱ)

2001-2004年，对中国16个省（直辖市、自治区）部分地区的马铃薯线虫进行了采样调查，并分离鉴定出7个纽带亚科线虫，其中6个是马铃薯上的新记录种。笔者对其中4个种：松树拟盘旋线虫（Pararotylenchus pini Mamiya,1968）、假强壮螺旋线虫[Helicotylenchus pseudorobustus （Steiner, 1914） Golden, 1956]、双宫螺旋线虫[H. dihystera（Cobb, 1890） Sher, 1961]和明茨螺旋线虫（H.minzi Sher，1966）的形态进行了描述。

气质联用检测饲料中氯霉素的方法研究

用乙腈/4%氯化钠(1∶1)混合液提取饲料中的氯霉素,采用两种方法对提取物进行净化分离。一种方法用Oasi s HLB固相萃取柱代替传统的C18柱对提取物进行净化富集,另一种方法不使用固相萃取柱。净化后的提取物用BSTFA+TMCS进行衍生,气相色谱-离子肼质谱联用仪检测,采用SIM模式电离,选择离子为225、208、178,通过对净化、提取及质谱条件的优化,该方法对不同饲料样品中氯霉素的加标回收率在76.1%～102.3%,相对标准偏差小于10%,方法的检出限为0.1ng/g。

小型肉制品出口企业应用HACCP体系存在的问题和对策

本文从肉制品出口企业对HACCP体系不重视、实施基础薄弱、关键控制点设置不合理等几个方面分析了企业HACCP体系应用存在的不足,并提出解决有关问题的几点对策。