血清基质金属蛋白酶-9与冠心病相关性的临床研究

目的 观察冠心病患者基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)血清水平以及与冠状动脉内径狭窄程度的关系。探讨MMP- 9在冠心病发病中所起的作用。方法 行冠状动脉造影术诊断为冠心病者 32例 ,另选 30例正常人为对照组 ,用 EL ISA法测定两组之间血清 MMP- 9水平 ,并探讨 MMP- 9与冠状动脉内径狭窄程度的关系。结果 冠心病组血清 MMP- 9水平高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,冠状动脉内径狭窄程度与基质金属蛋白酶浓度值呈正相关 (r=0 .6 0 1,P<0 .0 1)。结论 MMP-

PDX1和BTC共表达的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病的实验研究

目的观察共表达PDX-1和BTC基因的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)植入1型糖尿病大鼠肾包膜下对糖尿病的治疗作用。方法分离纯化SD大鼠MSCs,将pTRE2hyg-PDX1,pTRE2hyg-BTC和pTet-On共同转染MSCs,诱导MSCs分化为胰岛样细胞(pancreatic islet-like cells PILCs),并移植到糖尿病大鼠肾包膜下,进行血糖、糖耐量实验、胰岛素的监测并作组织学分析。结果PDX-1和BTC共表达的MSCs置于基础分化培养基7 d后,形成分泌胰岛素的PILCs,移植组在移植PILCs后,血糖水平明显降低,体内胰岛素水平明显上升,腹腔糖耐量试验接近正常水平,与假手术组的差异有统计学意义(P<0.05)。移植组大鼠肾组织中检测到胰岛素的分泌。结论通过基因工程技术可促使MSCs分化为胰岛样细胞,移植PILCs后能够有效改善糖尿病大鼠葡萄糖处理能力,缓解糖尿病症状,是一种糖尿病基因治疗的新途径。

系统性红斑狼疮患者血清多肽的MALDI-TOFMS分析研究

目的:本实验应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)寻找SLE患者血清中与疾病相关及条件特异的差异性表达多肽,尝试建立SLE的多肽鉴别诊断模型。方法:将SLE患者分为活动期和非活动期两组,以健康志愿者作为正常对照组。应用弱阳离子交换磁珠分离纯化血清样本,MALDI-TOF-MS获取样本生物学信息,建立分类预测模型。结果:成功检测并鉴别出了一系列的差异性多肽,建立了具有高的预测能力和交叉验证能力诊断预测模型。盲法验证该分类模型显示,对活动期SLE组的诊断敏感性达91.7%,非活动期SLE组诊断敏感性达83.3%,对正常对照组的诊断特异性达86.7%。结论:运用多肽指纹图谱法从一个整体的角度进行疾病研究,为更好地理解SLE的发病机制和改进SLE的诊断方法进行了初步的探索。

凋亡素联合阿霉素与顺铂对肝细胞癌的凋亡作用研究

目的探讨凋亡素联合阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)对肝癌的凋亡作用,为肝癌治疗提供实验依据。方法通过腺病毒载体介导凋亡素基因导入Hepa1-6肝癌细胞中,联合应用ADM、DDP在细胞水平上观察凋亡形态,检测凋亡率,评估联合治疗凋亡效果。结果无凋亡素介导下10μmol/L的DDP联合及1.26μmol/L的ADM作用36 h效果最好,该浓度下有凋亡素介导的实验组Hepa1-6的凋亡率要高于对照组。结论带有特异性甲胎蛋白启动子的重组腺病毒载体,介导凋亡素基因导入肝癌细胞后,联合阿霉素、顺铂对能合成甲胎蛋白的肝癌细胞具有特异性靶向性致凋亡作用。

寡核苷酸微阵列法检测冠心病患者心血管易感基因SNPs

目的研究13个心血管易感基因中17个SNPs与冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heartdisease,CHD)的关系。方法采用寡核苷酸微阵列技术检测并分析32例冠心病患者和30例健康对照者,涉及RAAS和内皮功能相关基因、载脂蛋白等13个基因17个SNPs的基因型频率。结果病例组中ACEAlu和NOS3298偏离Hardy-Weinberg平衡(χ2分别为11.2和28.0)。ANP2238C、ApoBEcor1(-)和KCNQ1140G在中国人群中的分布频率小于5%。NPRC-55在病例组和对照组中的基因频率分布的差异具有统计学意义(P<0.05)。其他SNPs的频率分布差异未检验出。结论RAAS中的血管紧张素转换酶(ACE)的Alu插入与缺失变异和与内皮系统功能相关的内皮型一氧化氮合成酶(NOS3)的E298D以及C型尿钠肽受体(natriuretic peptide receptor C,NPRC)基因调控区域的-55位A的突变可能是导致中国人群冠心病发病的危险因素。

双向电泳两种凝胶染色方法的比较

目的比较肾脏蛋白质双向电泳凝胶银染色法与考马斯亮蓝G-250染色方法的染色效果。方法利用蛋白质固相pH梯度双向电泳技术分离SD大鼠肾脏组织蛋白,应用银染色和考马斯亮蓝G-250染色两种染色方法,及ImageMaster 2D 5.0凝胶分析软件对凝胶进行染色分析。结果银染后的可见蛋白点比考马斯亮蓝染色法多,银染色法与考马斯亮蓝染色法平均匹配率为49.42%。结论银染法比考马斯亮蓝染色法的灵敏度高。

不同产前诊断指征与胎儿脐带血染色体异常核型分析

目的探讨不同产前诊断指征与脐带血染色体异常核型的关系。方法对2017年6月至2020年10月来该院就诊并且有产前诊断指征的3252例孕妇经脐静脉穿刺,分析不同产前诊断指征孕妇脐带血核型结果。结果3252例孕妇脐带血培养染色体核型共检出染色体异常核型182例,异常检出率为5.60%。其中染色体数目异常141例(77.47%),染色体结构异常41例(22.53%)。染色体数目异常发生率最高的为性染色体(48.93%),其次为21-三体(39.72%)、18-三体(6.38%)、13-三体(2.13%)。不同产前诊断指征异常核型检出率如下:无创产前检查(NIPT)异常核型检出率最高(46.77%),明显高于夫妇一方染色体异常核型(13.79%)、产前超声检查异常(7.09%)、高龄孕妇(7.05%)、血清学筛查联合产前超声检查异常(3.86%)、血清学筛查高风险或临界风险(2.70%)、有不良孕产史(1.05%),差异均有统计学意义(P<0.05);NIPT联合产前超声检查异常(64.29%)明显高于单项NIPT异常(42.66%),差异有统计学意义(P<0.05);NIPT联合血清学筛查和产前超声检查异常(40.00%)、NIPT联合血清学筛查(60.00%)与单项NIPT异常比较,差异均无统计学意义(P>0.05);高龄孕妇异常核型检出率(7.05%)明显高于非高龄孕妇(4.98%),高龄孕妇21-三体检出率(2.90%)明显高于非高龄孕妇(1.22%),差异均有统计学意义(P<0.05);高龄孕妇性染色体数目异常检出率(2.39%)与非高龄孕妇(1.97%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。高龄孕妇中NIPT联合血清学筛查异常2例,NIPT联合超声检查异常10例,异常核型检出率均达100.00%,明显高于非高龄孕妇的检出率[44.44%(8/18)、50.00%9(4/8)]。结论产前诊断指征与胎儿染色体异常密切相关,临床应结合孕妇自身情况,制订合理的筛查与诊断方案,提高异常检出率,减少出生缺陷发生。

类风湿关节炎的血清多肽差异

目的筛选风湿性关节炎患者血清中与疾病相关的差异性表达多肽,尝试建立类风湿关节炎(rheu-matoid arthritis,RA)的多肽鉴别诊断模型。方法以RA患者作为实验组,将活动期系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者作为疾病对照组,健康志愿者作为正常对照组,应用弱阳离子交换磁珠分离纯化血清样本,MALDI-TOF-MS获取样本生物学信息,用ClinProt2.1软件进行统计学分析,用遗传算法建立分类预测模型。结果成功筛选出一系列差异表达多肽,建立了具有高预测能力和交叉验证能力的诊断预测模型。验证该分类模型后,显示对RA组的识别率达100%,交叉验证能力达87.88%。结论将蛋白质组学技术应用于RA发病机制研究,从多肽指纹图谱新角度进行疾病分析,为更好地理解RA的发病机制、指导RA治疗及其预后提供依据。

原发性高血压病患者血管紧张素转换酶的基因多态性分析

目的 采用三条引物法进行血管紧张素转换酶 (ACE)基因分型 ,并与Rigat法进行比较 ,探讨ACE基因多态性与原发性高血压病 (EH)之间的关系。方法 抽取外周血DNA ,分别用三条引物法和Rigat法对 12 8例EH患者进行ACE基因分型 ,并以 15 0例正常人作对照组。 结果 Rigat法对DD型的错判率为 2 2 .2 2 %。正常血压人群ACE基因DD型、Ⅱ型、ID型分别有 10、62、78例 ,占 6.67%、41.3 3 %、5 2 % ,I和D的等位基因频率是 67%、3 3 % ;原发性高血压病人群ACE基因DD型、Ⅱ型、ID型分别有 14、47、67例 ,占 10 .94%、3 6.72 %、5 2 .3 4% ,I和D的等位基因频率是 63 %、3 7%。