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人I型干扰素受体亚基稳定表达真核细胞的筛选及鉴定
被引量:
1
1
作者
余治健
李多云
+6 位作者
刘宝兰
刘晓军
邓名贵
杨唯枝
郑金鑫
陈重
邓启文
《深圳中西医结合杂志》
2015年第1期4-6,共3页
目的:筛选及鉴定人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)稳定表达真核细胞。方法:体外扩增IFNAR1基因片段,将双酶切后扩增片段和pc DNA3.1(+)连接构建重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。...
目的:筛选及鉴定人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)稳定表达真核细胞。方法:体外扩增IFNAR1基因片段,将双酶切后扩增片段和pc DNA3.1(+)连接构建重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1转染肝癌细胞系Hep G2,新霉素筛选挑取阳性克隆细胞,蛋白质印迹试验(Western blotting)分析阳性细胞IFNAR1表达水平。结果:经双酶切和测序验证pc DNA3.1-IFNAR1重组质粒构建成功。pc DNA3.1-IFNAR1转染Hep G2经新霉素筛选后获得稳定表达细胞系,蛋白质印迹试验(Western blotting)证实这些细胞具有较好蛋白表达水平。结论:体外成功构建不同IFNAR1稳定表达水平的Hep G2细胞。
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关键词
人I型干扰素受体亚基
IFNAR1基因
重组质粒
稳定表达
真核细胞
下载PDF
职称材料
题名
人I型干扰素受体亚基稳定表达真核细胞的筛选及鉴定
被引量:
1
1
作者
余治健
李多云
刘宝兰
刘晓军
邓名贵
杨唯枝
郑金鑫
陈重
邓启文
机构
广东
医学院附属
深圳市
南山区人民医院
广东省深圳市内源性感染诊治研究重点实验室
出处
《深圳中西医结合杂志》
2015年第1期4-6,共3页
基金
深圳市科技创新委员会重点学科经费课题(JCYJ 20130402151227167)
文摘
目的:筛选及鉴定人I型干扰素受体亚基(IFNAR1)稳定表达真核细胞。方法:体外扩增IFNAR1基因片段,将双酶切后扩增片段和pc DNA3.1(+)连接构建重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。重组质粒pc DNA3.1-IFNAR1转染肝癌细胞系Hep G2,新霉素筛选挑取阳性克隆细胞,蛋白质印迹试验(Western blotting)分析阳性细胞IFNAR1表达水平。结果:经双酶切和测序验证pc DNA3.1-IFNAR1重组质粒构建成功。pc DNA3.1-IFNAR1转染Hep G2经新霉素筛选后获得稳定表达细胞系,蛋白质印迹试验(Western blotting)证实这些细胞具有较好蛋白表达水平。结论:体外成功构建不同IFNAR1稳定表达水平的Hep G2细胞。
关键词
人I型干扰素受体亚基
IFNAR1基因
重组质粒
稳定表达
真核细胞
Keywords
IFNAR1
IFNAR1 gene
Recombinant plasmid
Stable expression
Eukaryotic cells
分类号
Q756 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人I型干扰素受体亚基稳定表达真核细胞的筛选及鉴定
余治健
李多云
刘宝兰
刘晓军
邓名贵
杨唯枝
郑金鑫
陈重
邓启文
《深圳中西医结合杂志》
2015
1
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