HLA-B27 3种检测方法的比较

目的:比较3种HLA-B27检测方法的敏感度、特异性、适用性。方法:采用微量淋巴细胞毒试验、PCR-SSP和流式细胞仪方法同时检测128份待检标本HLA-B27。结果:淋巴细胞毒试验、PCR-SSP和流式细胞仪方法敏感度、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值分别为0.468、0.975、0.917、0.759;1.000、0.988、0.979、1.000;0.978、1.000、1.000、0.988。PCR-SSP和流式细胞仪方法敏感度显著性高于淋巴细胞毒试验,两两比较P<0.01;阴性预测价值优于淋巴细胞毒试验,两两比较P<0.05。结论:PCR-SSP和流式细胞仪方法均优于淋巴细胞毒试验,具有较好的临床适用性。

脐血采分过程中微生物污染的探讨

目的:探讨不同脐血采分过程中微生物的污染率。方法:脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP);100份脐血同时按密闭式和开放式两种操作方式进行脐血造血细胞分离处理;采用全新型BACTEC9050细菌培养系统对分离前、分离后脐血进行细菌(包括需氧菌和厌氧菌)和真菌培养。结果:脐血采集后细菌和真菌污染率分别为7.0%、0.0%;密闭式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到8.0%、2.0%;开放式分离处理后细菌和真菌污染率分别增加到12%和2.0%。结论:脐血采分过程是导致脐血细胞微生物污染的重要原因,尤其是厌氧菌,操作过程中必须严格执行消毒、隔离、灭菌技术和操作员管理制度以尽量降低污染率。

无偿献血工作中献血者满意度调查

目的了解无偿献血工作中献血者满意程度,及时改进献血服务质量。方法设计含有10项调查内容的满意度调查表,每年2次随机发放给献血者进行问卷调查。结果满意度调查表平均回收率为70.9%;2004和2005年共调查4次,献血者对血站综合满意度均在96.0%以上;对工作人员服务态度、技术水平、注射乙肝疫苗的满意度均稳定在98.5%以上;针对调查中发现的问题积极采取整改措施后,满意度明显上升。结论科学合理地开展献血者满意度调查能有效促进血站献血服务水平的提高。

两种融化方法制备冷沉淀比较

目的对两种融化新鲜冰冻血浆(FFP)制备冷沉淀方法进行比较。方法取12人份FFP,每一人份约为(220±20)m l,充分混匀后等量分装于2个塑料袋内,每一袋约为(110±10)m l,分别采用水浴融化法和冷藏融化法制备冷沉淀,并计算FⅧ回收率。结果水浴融化法制备冷沉淀的FⅧ回收率为(64.17±5.96)%,而冷藏融化法的FⅧ回收率为(47.63±4.06)%。经统计学处理分析,水浴融化法的FⅧ回收率明显优于冷藏融化法(t=27.232,P<0.01),但前者平均所需的时间仅为1 h,而后者平均需要时间为8.5 h。结论水浴融化法制备冷沉淀简便、快速,FⅧ回收率高,明显优于冷藏融化法,值得推广应用。

无偿献血静脉采血拔针按压方法比较

目的探讨无偿献血静脉采血拔针按压的最佳方法。方法将1000位初次无偿献血者随机分为观察组和对照组，各500人，观察组采用献血者大拇指按压法，对照组采用四指按压法，进行对比。结果观察组献血者的疼痛感、皮下瘀血均少于对照组（P〈0．01），有显著差异、结论无偿献血者静脉采血拔针时直接由献血者的大拇指按压可明显减轻献血者的疼痛，减少皮下瘀血的发生，保护献血者血管。

HCV无症状感染者外周血中病毒载量的检测分析

目的 了解丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus, HCV) 无症状感染者病毒载量分布以及与ALT水平的相关性。方法 采用荧光定量PCR检测80例HCV无症状感染者外周血中HCVRNA, 同时进行重组免疫印迹试验和血清丙氨酸转氨酶(ALT) 水平测定。结果 80例HCV无症状感染者外周血HCVRNA含量在102 1 ~105 8拷贝/ml, 其中82.5% (66 /80) 在104 0 ~105 8拷贝/ml。RIBA不同反应组HCVRNA含量间差异无显著性意义(P>0.05), ALT异常升高组HCVRNA含量与ALT正常组之间差异无显著性意义(P>0.05)。结论 HCV无症状感染者病毒载量处于相对低水平, 病毒载量与RIBA抗体反应模式和ALT水平的关系有待进一步研究。

脐血有核细胞分离、冻存方法的研究

目的探讨脐血有核细胞的分离、冻存方法,减少脐血的贮存空间。方法脐血采集按美国脐血库标准操作规程(SOP);68份脐血采用6%羟乙基淀粉(HES)、三联袋两次离心分离法将脐血分离成WBC层、RBC层和血浆层,脐血终体积为18～22ml。结果分离前后有核细胞计数、各系祖细胞数、CD34+细胞获得率分别为92.4%、96.5%、89.7%、80.2%、90.4%。结论证实HES分离脐血未造成有核细胞及各系祖细胞的明显损失。脐血可用简单的方法减少体积,节省液氮消耗量,降低了贮存空间,是一种用以建立脐血库的尝试。

两种血细胞分离机单采浓缩血小板时白细胞残留的比较

目的：探讨不同血细胞分离机单采浓缩血小板时白细胞的污染情况。方法：血小板采集按美国HAEMONETICS MCS-3P血细胞分离机和美国BAXTER CS-3000PLUS离心设备及其配套耗材，单采血小板程序常规操作，细胞计数采用日本F-820全自动血细胞计数仪。结果：血小板采集后，白细胞残留分别为(11．6±0．42)×10^6/L和(4．5±0．25)×10^6/L。结论：两种分离机采集血小板白细胞残留均符合血液质量标准。

脐血HLA-Ⅰ类抗原PCR-SSP分型的研究

目的 探讨PCR -SSP(聚合酶链反应 -序列特异性引物 )分型方法在脐血HLA -Ⅰ类抗原分型中的应用价值。方法 5 3份脐血用免疫磁珠分离T淋巴细胞 ,单克隆抗体配型板作血清学分型 ,其中 38份脐血用DNA快速抽提技术提取DNA后进行PCR -SSP基因分型 ,对两种方法分型结果进行对比研究。结果 38份脐血中 ,HLA -A位点PCR -SSP方法与血清学分型方法结果符合率 10 0 % ,HLA -B位点血清学方法分型误差率为13 .2 % ,其中 1个抗原错误 (占 1.3 % ) ,9个抗原漏检 (占 11.8% )。脐血采集后 2 4小时内作血清学分型较理想 ,超过 2 4小时则半数以上不能进行血清学分型。抽提脐血DNA一次成功率 10 0 % ,不受时间限制。结论 在脐血HLA -Ⅰ类抗原分型中 ,PCR -SSP方法准确、省血、标本限制少 ,明显优于血清学方法 。

应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒

目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以求敏感、特异及快速诊断肠道病毒(EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计2对通用引物,建立RT-n-PCR检测方法。结果共有104份临床标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%(104/327);在147例病例中粪便和咽拭子EV阳性比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%(64/165)。正常儿童与可疑EV感染病人EV阳性率比较差异有统计学意义(u=3.38,P<0.01)。结论RT-n-PCR可以准确快速地检测出肠道病毒,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。