2010—2011年深圳市福田区人群流感抗体水平监测结果

目的通过了解深圳市福田区一般人群流行性感冒(流感)抗体水平,为预防和控制疫情提供依据。方法 2010—2011年共2次采集人群血清535份,以微量半致敏血凝抑制方法进行抗体检测。结果 2011年H3N2型抗体阳性率(62.2%)高于2010年(55.2%),新H1N1型抗体阳性率2011年(43.1%)较2010年(37.6%)略有升高,H1N1型抗体阳性率由2010年的51.4%降至2011年的6.5%。流感抗体效价1∶320主要分布在2011年甲型流感中,新H1N1型占阳性总数56.4%,H3N2占78.2%。结论福田区应加强人群中流感病毒抗体监测,及时掌握流感病毒流行特征和发展趋势。

深圳市福田区健康人群EV71病毒IgG抗体水平

目的分析和评价深圳市福田区健康人群肠道病毒71型(EV71)IgG抗体水平,为EV71病毒的预防控制提供科学依据。方法在福田区采用分层随机抽样方法调查健康人群5个年龄组共436人,并采集血清,用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法对其进行抗体检测。结果 152人抗体检测阳性,阳性率为34.86%。年龄分布中,6到12岁人群抗体阳性率最高,为56.45%;未成年人群抗体水平(37.83%)整体高于成年人群(18.97%)。性别分布中,男性(40.74%)高于女性(29.09%)。结论深圳市健康人群EV71病毒的抗体水平,从出生随年龄增长呈先上升后下降趋势。因EV71病毒主要经密切接触传播,故卫生习惯较差(如男性及未成年人群)和活动于人口密集区(如幼儿园、学校)的个体较为易感。

蛇中瘦肉精引起食物中毒的实验室检测分析

目的检测蛇肉等可疑样品中克伦特罗(瘦肉精)的含量水平,以指导中毒的救治。方法按照NY/T 468-2006《动物组织中盐酸克伦特罗的测定》及GB/T 5009.192-2003《动物性食品中克伦特罗残留量的测定》的方法。结果中毒病人尿液中检出盐酸克伦特罗含量为2.4～8.4μg/kg,可疑样品蛇肉、蛇血、蛇胆中盐酸克伦特罗含量为463～11 200μg/kg。结论根据实验室检测结果,确定食物中毒由食用含有盐酸克伦特罗的蛇肉引起。

2D-DIGE蛋白质组技术的探讨及其在微生物研究中的应用

目的:探讨双向差异凝胶电泳(two dimension difference gel electrophoresis,2D-DIGE)的实验方法,分析比较其优缺点,概述其在微生物研究中的应用。方法:以两株不同血清型的副溶血性弧菌为样本,通过2D-DIGE实验,得到两组蛋白质荧光染色分布图,与银染的效果比较。结果:直观的看到两株细菌的蛋白质差异,且可分析样品丰度变化。结论:该方法有一定的局限性,但却是研究蛋白质组丰度变化的强有力工具。

EVaGreen实时荧光PCR法检测人类双埃可病毒

目的:构建实时荧光PCR法以测定人类双埃可病毒RNA。方法:通过相关资料自行设计合成人类双埃可病毒引物,将病毒RNA进行反转录之后,进行基于EVaGreen染料的实时荧光定量(Real-time)PCR扩增,通过高分辨率溶解曲线、核酸电泳及产物测序验证PCR结果。结果:对该病毒保守区约260BP片段扩增成功,测序证实为人双埃可病毒序列,建立了该病毒EVaGreen实时荧光PCR检测方法。结论:为人类双埃可病毒的检测提供了一种快速简便的方法。

副溶血性弧菌蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立

目的:建立副溶血性弧菌蛋白质分离的双向电泳技术。方法:分析比较两种不同的副溶血性弧菌蛋白制备方法,样品纯化后,选择不同pH范围IPG胶条,双向电泳,蓝银染色,比较图片。结果:超声裂解法效果较好且操作简便快速,提取出来的蛋白质经过纯化处理后再进行双向电泳效果较好,该细菌蛋白质点主要集中在pH4.5～5.5之间,还有部分分布在pH6～7之间。结论:建立了副溶血性弧菌蛋白质双向凝胶电泳技术,为后续研究奠定了基础。

葡萄球菌肠毒素B基因的PCR快速检测法

目的建立快速检测葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)基因的聚合酶链反应(PCR)方法。方法①根据SEB基因的序列,设计PCR引物特异性扩增靶基因片段。通过对1株产SEB金黄色葡萄球菌和9株对照菌株进行PCR检测,评价该方法的特异性;通过对产SEB金黄色葡萄球菌菌株做10倍系列稀释后进行PCR检测,评价该方法的敏感性;②分析30株金黄色葡萄球菌SEB基因的携带情况。结果①建立PCR方法快速检测SEB基因,扩增产物长度为494 bp。PCR反应体系中有26 CFU的产SEB金黄色葡萄球菌即可检出SEB基因;②30株分离的金黄色葡萄球菌中有2株携带有SEB基因。结论 PCR法可以快速、敏感地检测SEB基因,为金黄色葡萄球菌食物中毒诊断提供依据。

一起硫丹引起鱼死亡的实验室检测

目的查找某养殖场的鱼大量死亡的原因,为这一事件的调查提供技术支持。方法对采集到的死鱼样及养殖场水样,用气相色谱仪/ECD进行初筛,然后再用气相色谱-质谱联用仪进行确认。结果用气相色谱仪/ECD从鱼样中检测到硫丹的含量为0.39 mg/kg,经气相色谱-质谱联用仪确认鱼样和水样中均含有农药硫丹。结论根据实验室结果分析认为这是一起因农药硫丹导致养殖场的鱼大量死亡的事件,应加强对农药生产、销售和使用的管理,加大监管力度。

选择性培养基对-20℃冷冻损伤致泻大肠埃希菌生长的影响

目的:分析常规检测中使用的伊红美蓝琼脂(EMB)、乳糖胆盐发酵培养基(LBB)、麦康凯琼脂(MCA)、肠道菌增菌肉汤(EEB)对-20℃冷冻损伤致泻大肠埃希菌生长的影响。方法:选用4株致泻大肠埃希菌作为研究菌株,-20℃冷冻贮存不同时间后,分析EMB、LBB、MCA、EEB对其生长的影响。结果:1.除EMB培养基外,LBB、MCA、EEB培养基可抑制-20℃冷冻损伤致泻大肠埃希菌的生长,MCA、EEB的抑制作用大于LBB的抑制作用;2.不同的菌株对冷冻的敏感性不同。在不同的冷冻时间,菌株的死亡率、损伤率不同。结论:常规检测中使用的LBB、MCA、EEB可抑制-20℃冷冻损伤致泻大肠埃希菌的生长。