JAK2V617F点突变在真性红细胞增多症中的诊断价值

目的：探讨JAK2酪氨酸激酶点突变（JAK2V617F点突变）在真性红细胞增多症（PV）中的临床价值。方法：运用实时定量聚合酶链式反应（RQ—PCR）检测25例血红蛋白量（HGB）男185～200g／L，女165～200g／L组（A组）及18例血红蛋白量男、女〉200g／L组PV患者（B组）、30例健康体检者（C组）外周血单个核细胞JAK2V617F点突变率；并比较PV患者中JAK2V617F点突变阳性组与阴性组之间的年龄、性别、血红蛋白量（HGB）、红细胞压积（HCT）、白细胞数（WBC）、血小板数（BPC）等临床特征。结果：43例Pv患者外周血单个核细胞中JAK2V617F点突变率为88％；25例A组及18例B组PV患者外周血单个核细胞中点突变率分别为88％，89％，两组间无统计学差异，P〉0．05，30例C组点突变均为阴性；43例PV患者中，JAK2V617F点突变阳性组与点突变阴性组比较，两组在发病年龄、HGB、HCT均无统计学差异；阳性组白细胞计数、血小板计数分别为（12．8±6．0）×10^9／L、（486±108）×10^9／L，均显著高于阴性组的（7．9±1．1）×10^9／L、（320±97）×10^9／L，P〈0．05。结论：JAK2V617F点突变结合血红蛋白量测定可以作为真性红细胞增多症的辅助诊断依据。JAK2V617F点突变阳性组与阴性组患者临床特征存在一定差异。

深圳地区12960例地中海贫血筛查受检者的地中海贫血基因型分析

目的探讨深圳地区地中海贫血基因型特征，及其罕见基因型碱基突变位点。方法选择2014年5月至2015年10月于广东省深圳市第二人民医院拟行地中海贫血筛查的12960例受检者为研究对象。研究对象纳入标准：①红细胞平均体积（MCV）〈80fl的门诊及住院患者；②于本院行产前筛查的孕妇。排除标准：①不愿意参加本试验者；②已被确诊为其他血液系统疾病者。受试者先进行血常规MCV、血红蛋白（Hb）电泳和红细胞脆性检测的地中海贫血筛查试验，对筛查试验阳性（红细胞脆性〈70％）的患者，采用跨越断裂点PCR及反向斑点杂交（RDB）技术进行地中海贫血基因常见缺失型和点突变的基因型检测。对常见基因型检测不能确诊的患者，采用巢式PCR和PCR-直接测序（SBT）技术进行罕见基因型分析。本研究遵循的程序符合深圳市第二人民医院制定的伦理学标准，得到该委员会批准，并征得受试对象本人的知情同意，与之签署临床研究知情同意书。结果12960例受检者中，地中海贫血筛查试验阳性患者为2194例，通过常见基因型检测，确诊1019例为地中海贫血，检出率为46．4％。537例a地中海贫血患者中，以东南亚缺失型（--^SEA／αα）比例最高，占66．1％（355／537），其次为α地中海贫血2（-α^3.7／αα）占15．6％（84／537），而基因型（α^CSα／α^CSα、α^QSα／α^Qsα、α^WSα／α^WSα）和4种HbH病基因型（-α^3.7／α^QSα^QS、--^SEA／α^CSα^CS、--SEA／α^QSα^QS、--^SEA／α^WSα^WS）较为少见。α地中海贫血罕见基因型检出率为0．1％（3／2194），包括2例HKαα／^--^SEA及1例HKαα/αα。在456例β地中海贫血患者中，β^41-42（-TCTT）／β和β^654（C〉T）/βA基因型检出率最高，分别为33．8％（154／456）和30．3％（138／456）。在26例β复合α地中海贫血患者中，以p复合a地中海贫血1（--^SEA／αα）基因型检出率最高（34．6％，9／26）。β地中海贫血罕见基因型检出率为0．2％（4／2194），包括2例β^37（G〉A）,突变点为413G〉A或405G〉A，1例β^88-93（-AGTG），突变点为557处出现杂合峰，1例β^-88（C〉T），突变点为-88C〉T。结论深圳地区地中海贫血基因型有独特的分布特征，巢式PCR技术有助于发现HKαα／--^SEA及HKαα／αα基因型。采用PCR—SBT技术能鉴定罕见地中海贫血基因型并发现新突变点。本研究结果为在深圳地区开展遗传咨询和产前诊断提供了参考数据。