反复输血患者血小板抗体检测结果分析

目的探讨反复输血患者血小板抗体产生的影响因素及血小板相关抗体与血小板输注效果的关系。方法采用简易致敏红细胞血小板血清学技术(SEPSA)检测85例长期反复输血又需输注血小板的患者血小板相关抗体,分析抗体产生的规律,观察抗体阳性患者血小板输注效果。结果反复输血患者血小板相关抗体阳性率为14.12%,血小板相关抗体的产生与输血次数呈正相关,与输血前是否滤除白细胞有关。结论尽量减少输血次数、每次输血前滤除白细胞可降低血小板抗体阳性率,有效预防免疫性血小板输注无效的发生。

贮存红细胞中一氧化氮浓度的变化与输注效果的研究

目的分析贮存红细胞中一氧化氮浓度的改变与临床输注效果的关系,为进一步提高输血的安全性和有效性提供依据。方法 535份红细胞悬液保存期分别为:2d40份,7d120份,14d235份,28d105份,34d35份;分别输注给266位珠蛋白生成障碍性贫血患者,并分析输注的有效率。采用一氧化氮荧光探针技术检测不同保存期贮存红细胞中一氧化氮浓度,并比较临床输注效果。结果随着红细胞制剂贮存期延长,一氧化氮水平有持续下降的趋势(P<0.01);红细胞制剂输注有效率也随之下降(χ2=17.41,P<0.01),差异有统计学意义。结论随着保存期的延长,贮存红细胞悬液中一氧化氮浓度明显下降,直接影响临床输注有效率。

SPR技术检测血小板抗体及其临床应用的研究

目的利用表面等离子体共振(SPR)技术对血小板抗体筛选与配型的可行性进行研究,摸索一种血小板相容性输注的新方法。方法采用氨基耦联法在SPR芯片表面固定相应的通用型血小板抗原,并优化芯片分析条件,再用该芯片检测对照血清,分析该技术的特性;MAIPA法对比研究临床样本,同时运用SPR技术对10例血小板抗体阳性患者输注前进行血小板配合试验,选用配合型血小板输注,临床跟踪评价输注效果。结果 SPR技术检测血小板抗体的稳定性、敏感性与特异性均较好;SPR技术与MAIPA法对106例多次输注血小板的临床样本检测显示,2种方法比较差异无统计学意义(χ2=0.333,P>0.05),灵敏度为91%,特异性为97.9%,总一致性为97.2%;利用SPR技术配型输注的10例血小板抗体阳性患者,8例1h血小板增加值CCI>7.5,24hCCI>4.5,临床跟踪评价良好。结论 SPR技术筛检血小板抗体与MAIPA法性能基本相当,但SPR技术操作更简便快速、可靠直观,而且非标记,可满足临床血小板输注前抗体的快速检测和配型的初步要求。

珠蛋白合成障碍贫血患儿去白红细胞输注与FNHTR的相关性研究

目的评估去除白细胞输血的临床应用价值。方法取充分混匀的过滤前、后血袋内血样各3ml,分别用血球计数仪计数白细胞、红细胞和血红蛋白,分析经白细胞过滤器过滤前后供者相关血液参数的变化。同时,将78例(398人次)输注未滤除白细胞血液的地中海贫血患儿作为对照组;127例(645人次)输注滤除白细胞血液的患儿作为观察组,观察两组患儿的输血反应情况。结果过滤后白细胞去除率平均为97.9%,红细胞回收率为92.8%,血红蛋白过滤后的差异无统计学意义(P>0.05)。对照组与观察组的FNHTR发生率分别为21.8%和0.8%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论白细胞滤器能有效去除白细胞,预防输血反应发生。

抗体检测在自身免疫溶血性贫血患者中的应用

目的探讨自身抗体对自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者不规则抗体检出的影响。方法用戴安娜（Diana）全自动血型仪对23例AIHA患者进行氯喹放散试验检测自身抗体掩盖的不规则抗体，用乙醚放散试验检测自身抗体血型特异性。结果23例患者中间接抗人球试验阳性者17例，氯喹放散后检出不规则抗体4例（抗E2例，抗E，c1例，抗M1例）。自身抗体具有血型特异性者于间接抗人球试验阳性者中检出6例（抗E4例，抗c2例），于间接抗人球试验阴性者中检出1例（抗E）。结论采用氯喹放散试验、乙醚放散试验等检测被自身抗体掩盖的不规则抗体及鉴定自身抗体的血型特异性对AIHA患者安全有效输血具有重要意义。

Rh弱D抗原的临床检测意义

目的 探讨初筛为RhD阴性的样本进一步检测弱D抗原的临床意义。方法 对初筛为RhD阴性的样本进行间接抗人球蛋白试验（IAT）和三氯甲烷／三氯乙烯吸收放散试验。结果 49例初筛为RhD阴性样本中，IAT检出不完全D者4例，吸收放散试验检出D洗脱型（Delusion，Del）者6例，弱D抗原的检出与CE表型相关。结论 为保障输血安全，经常规血型血清学检测的RhD阴性样本需进一步进行IAT和吸收放散试验检测是否为弱D及Del。

重型β地贫患儿珠蛋白肽链失衡的调控研究

目的研究重型β地贫患儿外周血珠蛋白α、β、γmRNA比例变化及miR-144基因对其平衡的调控作用。方法分离培养患者外周血早红细胞,真核表达质粒PmiR-144-luc转染后培养72h,运用RT-PCR分别检测重型β地贫患儿空白组、基因转染组与健康对照组外周血α、β、γmRNA的比率变化。结果与健康对照组比较,重型β地贫患儿外周血珠蛋白α/β、α/β+γ、γ/β+γmRNA的比例水平均升高,差别有统计学意义;与重型β地贫患儿空白组比较,基因转染组珠蛋白α/β、α/β+γmRNA的比例水平均降低,差别有统计学意义;而γ/β+γmRNA的比例水平变化无统计意义。结论 miR-144基因可能调控重型β地贫患儿珠蛋白α、β、γmRNA基因比例的变化,将为重型β地贫的基因调节治疗提供新的实验依据。

保存前后滤除WBC的RBC悬液质量的对比性研究

目的探讨保存前后滤除WBC(滤白)的RBC悬液质量的变化,为临床选择滤白时机提供参考依据。方法对4℃保存5d的悬浮RBC 20袋(每袋2U)用血库型滤器滤白作为保存后滤白组(A组),由血站滤白的少白悬浮RBC 20袋(每袋2U)作为保存前滤白组(B组);分别在第7天、第14天、第21天、第28天和第35天测定两组血细胞指标、炎性细胞因子水平。结果 B组血浆游离血红蛋白(FHb)在第14天明显升高,K+浓度在21d显著升高,且二者浓度随保存时间的延长而增加(P<0.05);A组炎性细胞因子(IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α)水平在滤白后第21天时才明显升高,与B组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B两组回收率差异无统计学意义(P>0.05)。结论保存前后滤白都能达到很好的滤除效果,但不同的滤白贮存方式对血液的质量产生不同的效果,为临床选择不同的滤白RBC提供了实验依据。

异基因造血干细胞移植后红系恢复影响因素分析

目的探讨异基因造血干细胞移植后影响红系恢复时间的因素。方法回顾分析53例异基因造血干细胞移植患者的移植方式、人血细胞抗原(HLA)相合与否、ABO血型相合与否及亲缘关系的有无对红系恢复时间的影响。结果影响红系恢复时间的因素主要为ABO血型主要不合及受、供者的亲缘关系。结论ABO血型主要不合和非亲缘骨髓移植的患者红系恢复较慢。

RHD711delC等位基因检测和频率计算

目的了解RHD711delC等位基因或RHD710delC在一般人群中的基因频率。方法对890 403名汉族无偿献血者,采用盐水法和间接抗人球蛋白试验（IAT）测定D抗原,PCR-SSP检测RHD711delC等位基因以及RHD合子型,应用遗传统计方法分析基因频率。结果 Rh（D）表型检测显示2 385人为Rh阴性,108人为D抗原弱阳性表型（包括弱D型和部分D型）,其余887 910人为Rh阳性。2 385名Rh阴性个体中检测到19人携带RHD711delC等位基因（0.80%）,均为RHD711delC/d杂合子；108名D抗原弱阳性个体中,未检出RHD711delC携带者；随机抽检960名Rh阳性样本,发现1人为RHD711delC/RHD＋。根据上述结果,计算RHD711delC在被检人群中的基因频率为0.000 530；根据RHD711delC在Rh阴性人群的检出率,推算其在一般人群中的基因频率为0.000 225。结论 RHD711delC等位基因在中国汉族人群中的等位基因频率在0.000 225～0.000 530之间。

蛋白激酶C活性变化在急性ITP患者发病机制中的作用

目的研究急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)患者外周血T细胞蛋白激酶C(protein kinese C,PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少之间的关系。方法无菌采集30例急性ITP患者及30例健康对照组外周血,T细胞分离富集柱法分离纯化T细胞,非同位素标记法检测T细胞PKC的活性,ELISA法检测T细胞活化标志sIL-2R的表达,血细胞计数仪计数血小板的减少程度。结果急性ITP患者T细胞PKC的活性(0.94±0.23)nmol-1.min-1.ml-1高于正常对照(0.50±0.17)nmol-1.min-1.ml-1,差异有显著性(P<0.05),sIL-2R的表达(U/ml)以患者组(528±124)高于正常组(296±57),差异有显著性(P<0.05),PKC的活性变化与sIL-2R的表达呈显著正相关(r=0.8725,P<0.05),与血小板计数成显著负相关(r=-0.8107,P<0.05)。结论急性ITP患者外周血PKC活性增强可能导致T细胞活化,活性T细胞增多可能引起患者血小板的损伤,提示PKC信号传导在急性ITP的免疫病理机制中发挥重要作用。

^(137)Csγ射线辐照成分血在造血干细胞移植中的应用

【目的】观察输注经137Csγ射线辐照的成分血预防输血相关性移植物抗宿主病(TA-GVHD)的疗效。【方法】将73例输注经γ射线辐照的红细胞悬液共341u(2u/次);机采血小板167个治疗量(10u/治疗量)的患者输血前后24小时外周血的血红蛋白(Hb)、红细胞计数(RBC)、和血小板计数(PLT)进行比较,并观察输注后1个月患者有无皮肤、骨髓、肝肠等器官及相关脏器受损表现。【结果】输注辐照成分血后24 h患者外周血Hb、RBC、PLT较之输血前均明显升高,呈显著差异(P<0.01)。所有患者均未出现TA-GVHD相关脏器受损表现。【结论】γ射线辐照成分血能提高血小板计数和血红蛋白含量,有效预防出血和输血相关性移植物抗宿主病的发生。

孕妇红细胞血型不规则抗体检测的临床意义

目的 检测孕妇红细胞血型不规则抗体，了解其阳性率及分布，探讨不规则抗体检测在诊断非ABO系统胎儿及新生儿溶血病（HDN）中的应用价值。方法 使用DIANA全自动血型仪检测3000例孕妇血浆标本中的不规则抗体，阳性者鉴定抗体特异性、免疫球蛋白类型及效价，并对阳性者的新生婴儿采脐带血做HDN检测。结果 3000例孕妇不规则抗体阳性15例（阳性率为0．5％），抗体特异性分别为抗-E3例、抗-C2例、抗-Ec1例、抗-M3例、抗-Le^a1例、抗-Fy^a1例。另4例与所有红细胞和自身细胞均成阳性反应，未能确定其特异性。4例新生儿红细胞被来自母体的不规则抗体致敏，分别为抗-E2例、抗-C1例、抗-M1例。结论 检测孕妇不规则抗体对诊断非ABO系统HDN具有十分重要的应用价值。

ABO血型不合对异基因外周血干细胞移植造血重建的影响

目的 探讨ABO血型不合对HLA相合的异基因外周血干细胞移植（allogeneic peripheral blood stem cell transplantation，Allo—PBSCT）的影响。方法 回顾分析6例ABO血型主要不合，9例次要不合的HLA相合的Allo—PBSCT术后受者造血重建情况，选用同期ABO相合的Allo—PBSCT受者作对比。结果 15例ABO血型不合的Allo—PBSCT受者植入骨髓后均未发生急性溶血，有2例发生迟发性溶血。ABO血型不合对Allo—PBSCT骨髓植活、血小板恢复、粒系重建均无影响。在ABO血型主要不合组，红系恢复时间明显延迟。结论 ABO血型不合并不是Allo—PBSCT的障碍．仅在ABO血型主要不合时．出现红系恢复时间延迟。

自身免疫性溶血性贫血患者的血型血清学检查

目的探讨自身抗体对自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者血型鉴定的影响。方法用D IANA全自动血型仪对23例AIHA患者进行ABO、Rh(D)血型常规定型及氯喹放散实验后定型,同时进行直、间接抗人球蛋白试验。结果ABO受干扰者13例,正定型均为AB型,氯喹放散后能正确定型。23例直抗均为阳性,间抗阳性更易出现在ABO血型正反定不符病例中。23例患者中无Rh(D)阴性者。结论AIHA患者的自身抗体干扰血型鉴定,需采用多种技术才能正确鉴定血型,确保输血安全。

外周血Tfh/Tfr、Breg比例在CITP患者中的临床意义

目的分析慢性免疫性血小板减少症(CITP)患者外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)/滤泡调节性T细胞(Tfr)、负性调节性B细胞(Breg)比例及相关细胞因子白细胞介素(IL)-21、IL-10的变化,探讨Tfh/Tfr、Breg比例在CITP免疫紊乱中的作用及意义。方法选择30例CITP患者和30例健康体检者,淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测外周血Tfh、Tfr、Breg比例;采用ELISA检测上清液IL-21与IL-10表达水平;采用流式细胞术检测患者血小板相关抗体(PAIgG)阳性率。结果与健康对照者比较,CITP患者外周血Tfh比例升高,差异有统计学意义(P<0.05);Tfr、Breg比例降低,差异有统计学意义(P<0.05);CITP患者外周Tfh/Tfr升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Tfh/Tfr与PAIgG阳性率呈正相关(r=0.622,P<0.05),Breg比例与PAIgG阳性率呈负相关(r=-0.535,P<0.05)。CITP患者外周血IL-21/IL-10升高,差异有统计学意义(P<0.05),IL-21/IL-10与血小板计数呈负相关(r=-0.643,P<0.05),与PAIgG阳性率呈正相关(r=0.548,P<0.05)。结论CITP患者外周血Tfh/Tfr、Breg比例及IL-21/IL-10异常,以上指标参与免疫紊乱机制,可为CITP的临床诊断与治疗提供新思路。