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EV71病毒P1和3CD基因共表达重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的构建及鉴定
1
作者
蔡春林
姚相杰
+2 位作者
赵洁玲
卓菲
黎剑华
《广东医学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第18期2725-2727,共3页
目的通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体。方法设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual-CMV上,命名为pFBCM...
目的通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体。方法设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual-CMV上,命名为pFBCMV-IRES。从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT-PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,定向克隆至杆状病毒穿梭载体pF-BCMV-IRES的IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠杆菌DH5α中,经PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果通过对重组杆状病毒穿梭载体pFBCMV-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析,证明共表达EV71病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒双顺反子穿梭载体构建成功。结论共表达EV71病毒P1和3CD基因重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的成功构建,将为下一步制备EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础。
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关键词
肠道病毒71型
杆状病毒
类病毒颗粒
疫苗
下载PDF
职称材料
肠道病毒71型真核双基因表达载体的构建
2
作者
姚相杰
何雅青
+5 位作者
蔡春林
杨洪
冼慧霞
张海龙
罗敏
张仁利
《检验医学与临床》
CAS
2012年第23期2916-2918,共3页
目的通过克隆肠道病毒71型结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体。方法设计合成脑心肌炎病毒(EMCV)IRES序列的特异性引物,克隆至真核表达载体pcDNA3.0上,命名为pc-IRES。从手足口病...
目的通过克隆肠道病毒71型结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体。方法设计合成脑心肌炎病毒(EMCV)IRES序列的特异性引物,克隆至真核表达载体pcDNA3.0上,命名为pc-IRES。从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,并将其定向克隆至真核表达载体pc-IRES载体中IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠埃希菌DH5α中,最后经PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果通过重组质粒p-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析,重组真核双基因表达载体p-IRES-P1-3CD构建成功。结论成功构建共表达EV71病毒P1前体蛋白和非结构蛋白3CD真核双基因表达载体,这将为下一步制备基于DNA载体的EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础。
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关键词
肠道病毒71型
类病毒颗粒
疫苗
下载PDF
职称材料
题名
EV71病毒P1和3CD基因共表达重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的构建及鉴定
1
作者
蔡春林
姚相杰
赵洁玲
卓菲
黎剑华
机构
广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科
广东省
深圳市
疾病预防控制中心
微生物
检验
科
出处
《广东医学》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第18期2725-2727,共3页
基金
广东省医学科研基金资助项目(编号:B2010287)
广东省深圳市罗湖区软科学研究计划项目(编号:2010069)
文摘
目的通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体。方法设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual-CMV上,命名为pFBCMV-IRES。从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT-PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,定向克隆至杆状病毒穿梭载体pF-BCMV-IRES的IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠杆菌DH5α中,经PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果通过对重组杆状病毒穿梭载体pFBCMV-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析,证明共表达EV71病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒双顺反子穿梭载体构建成功。结论共表达EV71病毒P1和3CD基因重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的成功构建,将为下一步制备EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础。
关键词
肠道病毒71型
杆状病毒
类病毒颗粒
疫苗
Keywords
enterovirns 71
baculovirus
virus like particles
vaccine
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
肠道病毒71型真核双基因表达载体的构建
2
作者
姚相杰
何雅青
蔡春林
杨洪
冼慧霞
张海龙
罗敏
张仁利
机构
广东省
深圳市
疾病预防控制中心
微生物
检验
科
广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科
出处
《检验医学与临床》
CAS
2012年第23期2916-2918,共3页
基金
广东省医学科研基金(B2010287)
广东省深圳市罗湖区软科学计划(2010069)
文摘
目的通过克隆肠道病毒71型结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的真核双基因表达载体。方法设计合成脑心肌炎病毒(EMCV)IRES序列的特异性引物,克隆至真核表达载体pcDNA3.0上,命名为pc-IRES。从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,并将其定向克隆至真核表达载体pc-IRES载体中IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠埃希菌DH5α中,最后经PCR和双酶切鉴定转化菌落。结果通过重组质粒p-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析,重组真核双基因表达载体p-IRES-P1-3CD构建成功。结论成功构建共表达EV71病毒P1前体蛋白和非结构蛋白3CD真核双基因表达载体,这将为下一步制备基于DNA载体的EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础。
关键词
肠道病毒71型
类病毒颗粒
疫苗
Keywords
enterovirus 71
virus like particles
vaccine
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
EV71病毒P1和3CD基因共表达重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的构建及鉴定
蔡春林
姚相杰
赵洁玲
卓菲
黎剑华
《广东医学》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
下载PDF
职称材料
2
肠道病毒71型真核双基因表达载体的构建
姚相杰
何雅青
蔡春林
杨洪
冼慧霞
张海龙
罗敏
张仁利
《检验医学与临床》
CAS
2012
0
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职称材料
已选择
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