抗-D抗原决定簇互补区多肽遮蔽RhD抗原的效果

目的建立抗-D抗原决定簇互补区(CDRs)多肽遮蔽Rh D抗原的方法,并对遮蔽效果进行评价。方法根据抗-D CDRs氨基酸残基顺序合成多肽,使用流式细胞术检测红细胞表面Rh D抗原在多肽遮蔽前后的荧光强度;荧光显微镜下观察多肽与Rh D抗原的结合情况;使用在线分析工具对有效多肽进行理化性质及二级结构分析。结果不同多肽对Rh D抗原的遮蔽效果有较大差异,其中3号多肽遮蔽效果较理想,荧光强度显著降低。结论抗-D CDRs多肽可有效遮蔽Rh D抗原。

猪苓多糖对慢性乙型肝炎患者单核细胞源树突状细胞的影响初探

目的探讨猪苓多糖(PPS)对慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞源树突状细胞(MoDC)的影响。方法从CHB患者外周血中分离出单核细胞(Mo),然后将Mo与GM-CSF、IL-4体外培养9天,并于培养第6天加入PPS共同培养,在倒置显微镜下观察DC的形态,用MTT法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力,用ELISA检测DC培养上清中IL-12p40+p70的含量,并与对照组比较。结果PPS可刺激DC分泌IL-12p40+p70,增强DC刺激同种异体T细胞增殖的能力。结论PPS可以增强CHB患者外周血MoDC的免疫功能,提示其可能通过调节DC的功能参与免疫应答。

常染色体短串联重复序列基因座复合扩增等位基因丢失现象的研究

目的探讨常染色体短串联重复序列（STR）基因座复合扩增等位基因丢失现象的特征和原因，以及亲子鉴定中STR基因座等位基因疑似突变的确认策略。方法选择2017年1月至6月，于深圳市血液中心接受三联体亲子鉴定的3个家庭的9例家庭成员为研究对象。研究对象纳入标准：STR基因座等位基因初检结果不符合孟德尔遗传规律，疑为STR基因座等位基因丢失者。采用美国ABI公司生产的GlobalFiler Express试剂盒对受试者血斑片样本的21个常染色体STR基因座等位基因进行分型。采用美国Promega公司生产的PowerPlex 21复合扩增系统对受试者血斑片样本的STR等位基因分型结果进行验证。采用PCR-直接测序（SBT）法，检测受试者DNA样本人类白细胞抗原（HLA） -A/-B/-C/-DR/-DQB1基因座等位基因，并且对受试者HLA基因座单倍型进行分型，作为个体识别的补充验证。本研究所遵循的程序符合2013年修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》，并且与受试者或其监护人签订知情同意书。结果①本研究3个家庭的三联体亲子鉴定中，6例受试者丢失的等位基因分别发生在STR的3个基因座CSF1PO、D1S165和TH01，并且突变步数均不相同。上述丢失的等位基因，既可能为父源性，亦可能为母源性。②家庭1中，对母亲和孩子的CSF1PO基因座等位基因分型的初检结果显示，等位基因均为纯合子；验证结果显示，等位基因均为杂合子；二者的CSF1PO基因座等位基因初检结果均丢失等位基因10。③家庭2中，对父亲和孩子的D1S1656基因座等位基因分型的初检结果显示，等位基因均为纯合子；验证结果显示，等位基因均为杂合子；二者的D1S1656基因座等位基因初检结果均丢失等位基因16。④家庭3中，对母亲和孩子的TH01基因座等位基因分型的初检结果显示，等位基因均为纯合子；验证结果显示，等位基因均为杂合子；二者的TH01基因座等位基因初检结果均丢失等位基因9。⑤于3个家庭的9例受试者DNA标本中，共检出12种HLA-A/-B/-C/-DRB1/-DQB1基因座单倍型，并且HLA基因座单倍型遗传方式符合孟德尔遗传规律。结论对于疑似存在STR等位基因突变的STR基因座复合扩增中，采取单一的检测方法，可能存在漏检等位基因的风险，采用不同试剂盒进行验证其等位基因突变的真实性，能获得更加可靠的鉴定结果。

643例中国北方汉族急性淋巴细胞白血病患者人类白细胞抗原连锁不平衡分析

目的分析643例中国北方汉族急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）患者组和20359名健康对照组的人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）HLA—AB、BDR和A—B-DR单倍型频率及连锁不平衡分布差异。方法应用最大似然性算法（expectation—maximization，EM）计算患者组和对照组的HLA-A-B、B—DRB1和A—B—DRB1单倍型频率及连锁不平衡参数，采用x^2检验比较其分布差异。结果HLA-A30-B13、A2-B46、A33-B58，B13-DR7、B46-DR9、B52-DR15、B58-DR17，A30-B13DR7、A33-B58-DR17和A1-B37-DR10单倍型是两组常见、共有呈强连锁不平衡单倍型。A30—B13、A2-B46、A33-B44、B13-DR7、A30-B13-DR7和A2-B46-DR9的单倍型频率和连锁不平衡水平，患者组低于对照组，差异有统计学意义（x^2〉3．84，P〈0．05）。A2-B52、A2-B27、A24-B8，B60-DR9、B27-DR4、B52-DR14、B44-DR17、B27-DR12、和A11-B27-DR12的单倍型频率和连锁不平衡水平，患者组高于对照组，差异有统计学意义（x^2〉3．84，P〈0．05）。结论643例北方汉族ALL患者组HLA-A-B、B-DRB1、A—B-DRB1单倍型频率分布及连锁不平衡遗传特征和对照组具有高度的同源性。患者组与对照组之间的部分HLA单倍型频率及连锁不平衡分布存在统计学差异。本研究结果为ALL与HLA疾病相关性及HLA相合供者的寻找提供了基础数据。

HLA-DRB1＊1218新等位基因克隆测序鉴定及内含子序列分析

目的鉴定中国人群人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）DRB1＊1218新等位基因，分析新等位基因第1和2内含子序列信息。方法采用聚合酶链反应一序列特异寡核苷酸探针反向杂交法（polymerase chain reaction-sequence specific oligonucleotide probes，PCR—SSOP）对广东地区随机正常人群进行HLA常规基因分型，发现1个与HI。A-DRB1＊120201相近的未知基因，对先证者DNA应用组特异性引物扩增HLA—DRB1位点第2外显子，PCR产物经克隆到质粒载体中以获得单链，对克隆所得产物进行HLA—DRB1基因的第2外显子及第1和第2内含子双向测序分析，并与DRBl＊120201基因序列的第2外显子和DRBl＊03010101等位基因内含子相比较。结果发现该个体的一个HLA—DRB1＊080302基因被确认，而另一个HI。A—DRB1基因为新等位基因，其序列被GenBank接受（编号为FJ481086）。新等位基因与最相近的DRB1＊120201相比，在第2外显子上有1个核苷酸的不同，即第262位G—C（密码子59GAG—CAG，氨基酸59G1u—GIn）。DRB1＊1218与DRB1＊03010101等位基因第2内含子序列完全相同，而与DRB1＊03010101等位基因第1内含子序列相比较有12个碱基不同。结论发现并鉴定一个新的HLA等位基因，经世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为HLA—DRB1＊1218．