大鼠表皮干细胞中α促黑素细胞激素及其受体的表达

目的 观察体外培养的大鼠表皮十细胞（ESC）中α促黑素细胞激素（α-MSH）及黑皮质素受体1（MC1R）的表达情况. 方法 采用改良Ⅳ型胶原快速黏附法培养大鼠ESC,倒置相差显微镜下观察细胞生长形态变化,并采用免疫荧光法和流式细胞仪分别观察ESC标志物细胞角蛋白19（CK19）和整合素β1、整合素α6和CD71表达,通过免疫荧光法检测ESC中α-MSH的表达以及ESC标志物与MC1R共染的表达. 结果 （1）倒置相差显微镜下可见,接种10 min后即有细胞贴壁;培养2～3d时有小克隆形成;培养4～5d,细胞增殖明显加快,克隆逐渐增大;培养7～8d,细胞生长至70％ ～ 80％融合,呈铺路石状,折光性好.（2）免疫荧光法检测结果显示所分离的细胞均表达ESC标志物CK19和整合素β1,流式细胞仪检测结果显示所分离的细胞整合素α6阳性表达率为88.1％,CD71阳性表达率为1.3％.综上,所培养的细胞鉴定为ESC.（3）免疫荧光法检测结果显示ESC表达α-MSH,同时CK19与MC1R、整合素α6与MC1R荧光双染也呈阳性表达. 结论 体外培养的大鼠ESC可以表达α-MSH及MC1R.