2010年-2011年广东地区PRRSV Nsp2和ORF5基因的遗传变异分析

为了解2010年-2011年广东地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,采用RT-PCR方法扩增所分离的16株PRRSV的Nsp2和ORF5的基因,应用DNA Star、ClustalX2和MEGA5等对所得序列进行比对及遗传变异分析。16株PRRSV的Nsp2和ORF5基因的推导氨基酸序列同源性分别为75.3%～100%和87.5%～100%,与国内高致病性PRRSV代表毒株JXA1的氨基酸同源性分别为74.2%～98.2%和87.5%～99%。Nsp2遗传进化分析显示,这16株PRRSV均属于美洲型毒株,其中15株病毒与以JXA1为代表的国内流行毒株处于同一分支,属美洲亚群Ⅰ;另外1株病毒与VR-2332和疫苗株MLV处在同一分支,属美洲亚群Ⅱ。2010年-2011年广东地区流行毒株仍为高致病性PRRSV,且存在经典疫苗毒株MLV。

肌肉注射防治猪繁殖与呼吸综合征继发感染试验研究

【目的】研究不同药物的肌肉注射方案对防治猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)继发感染以及5周龄死淘控制的效果。【方法】试验选取同批次患PRRS保育猪560头,随机分为7组,每组80头,分别设置5个处理组、对照组以及空白组,分别为G组5针+拌料和差弱猪保健、F组22针、E组5针、D组4针、C组2针+拌料、B组为对照组拌料和差弱猪保健、A组为空白组。记录猪只死亡时间、死亡数、平均日增重和料肉比。【结果】筛选出适合临床养殖的肌肉注射方案为C组。【结论】在生产中使用在肌注长效针剂后加持续拌料喂药和口服保健可以有效防控PRRS。

pH值对猪粪废水微生物燃料电池产电性能的影响

构建了以布阴极组为空气阴极的单室微生物燃料电池,并将其应用于猪粪废水的处理与产电.重点考察了阳极液pH值对猪粪废水处理和产电性能的影响.结果表明,阳极液pH=10时MFC的产电和废水处理性能最佳,输出功率密度达到2.10W/m3,与阳极液pH=6和pH=8时的电池相比,输出功率分别提高约2.7倍和1.9倍.同时,阳极液pH=10时,COD去除率和氨氮去除率也分别达到86.7%和92.8%,比阳极液pH=6和pH=8时MFC的COD去除率提高了约13.8%和6.7%;氨氮去除率提高了约5.3%和3.5%.本研究表明,调控阳极液pH值能够有效强化猪粪废水处理和产电,为猪粪废水资源化处理提供了一条新途径.

饮用酵母发酵菌液对矮脚黄肉鸡生长性能、消化酶活性和盲肠菌落结构的影响

本文以矮脚黄肉鸡为研究对象,探讨从不同日龄起分别饮用2种以酵母菌为主要活性成分的发酵菌液对肉鸡生长性能、消化酶活性和盲肠菌落结构的影响,为发酵菌液在肉鸡生产中的应用提供依据。选取1日龄健康矮脚黄肉鸡母鸡1 680只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复70只鸡。抗生素对照组(A组)在基础饲粮中添加30 mg/kg维吉尼霉素,空白对照组(B组)饲喂基础饲粮,试验组(C、D、E和F组)饲喂基础饲粮,分别按2种发酵菌液、14和27日龄2个开始饮用日龄分为4个组,2种发酵菌液在饮水中的添加水平为饮水量的3%。试验期78 d。分别于26、56和78日龄测定肉鸡的生长性能、十二指肠内容物消化酶活性、盲肠内容物细菌多样性等指标。结果表明:1)与空白对照组相比,27~56日龄,27日龄起饮用发酵菌液2肉鸡的料重比显著降低(P<0.05);57~78和14~78日龄,14日龄起饮用发酵菌液1和发酵菌液2肉鸡的料重比显著降低(P<0.05)。2)与空白对照组相比,56日龄时,27日龄起饮用发酵菌液2肉鸡的十二指肠内容物淀粉酶活性显著升高(P<0.05);26和78日龄时,14日龄起饮用发酵菌液1肉鸡的十二指肠内容物胰蛋白酶活性显著升高(P<0.05)。3)78日龄时,14日龄起饮用发酵菌液2和27日龄起饮用发酵菌液1肉鸡的盲肠内容物细菌多样性指数显著高于空白对照组(P<0.05);饮用发酵菌液使肉鸡的盲肠内容物细菌群落结构趋于一致,且越到试验后期相似性越高。由此可见,14日龄起给矮脚黄肉鸡饮用以酵母菌为主要活性成分的发酵菌液,可改变盲肠微生物组成,提高胰蛋白酶活性,有效降低料重比,提高养殖效率。

黑曲霉木聚糖酶基因xynA的克隆及真核表达载体的构建

从黑曲霉(Aspergillus niger)GI M3.452中克隆得到木聚糖酶基因xynA的成熟肽编码序列。通过重叠延伸PCR将不带原基因信号肽编码序列的xynA基因片段和猪腮腺分泌蛋白(parotid secretory protein,PSP)基因的信号肽进行拼接得到融合片段SPA,并将其克隆到真核表达载体pcDNA6/HisTMA中,得到重组质粒pcDNA-SPA,重组质粒经过酶切、测序鉴定其读码框的正确性,在脂质体介导下将重组质粒pcDNA-SPA转染猪肾细胞(PK15),通过RT-PCR证实其在PK15细胞中表达,并在细胞培养液中检测到木聚糖酶活性为7.6I U/mL。

猪轮状病毒的分离鉴定和全基因组序列分析

为了解广东省规模化猪场中猪轮状病毒(PoRV)流行毒株的基因特征,本试验在广东省某猪场采集腹泻仔猪肠道组织样品,经实时荧光定量PCR(qPCR)进行病毒初步鉴定;分离获得病毒后,通过间接免疫荧光、电镜观察进一步鉴定,并对分离毒株进行全基因组高通量测序和遗传进化分析。结果显示,qPCR初步鉴定该腹泻仔猪病料为PoRV感染,从阳性病料中分离获得1株能引起典型细胞病变的毒株,在电镜下可观察到似车轮状的病毒颗粒,在倒置荧光显微镜下观察有绿色荧光,将该PoRV分离毒株命名为GD2022,其完整基因型为G9-P[23]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1;基因遗传进化分析结果显示,GD2022为人轮状病毒、猪轮状病毒和狗轮状病毒基因组重组后的毒株。本试验结果丰富了PoRV基因组学和分子流行病学相关的研究资料,为轮状病毒防控提供了数据支持。

隐孢子虫研究进展

隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是由隐孢子虫(Cryptosporidium)引起的一种以腹泻为特征的人畜共患寄生原虫病。本病具有广泛的宿主类型，可以寄生于哺乳类、鸟类、爬行类及两栖类等150种以上的人和动物。对于免疫系统正在发育的幼儿和幼畜以及免疫缺陷病人，隐孢子虫入侵的机会较大，免疫系统发育正常的人和动物也能感染该病，但机会小一些。自Tyzzer(1907)在鼠胃腺中发现隐孢子虫以来，一直以为隐孢子虫感染并不常见，是一种条件性病原。直到1976年Nime才报道了第一例人的隐孢子虫病，从此以后，有关此病的报道越来越多，到了1986年，世界卫生组织(WHO)更将本病列为人的爱滋病(AIDS)怀疑指标之一。

卵丘细胞对卵母细胞成熟、受精和胚胎发育的影响试验

将从猪卵巢上获取的卵母细胞根据卵丘细胞层数的多少分为两类,并将这两类卵母细胞进行成熟培养、体外受精和孤雌激活,以验证两类卵母细胞的发育潜能。结果显示,将两类卵母细胞分别进行成熟培养时,优级卵的成熟率高于次级卵(67.42±1.52%vs 48.33±2.85%),且差异极显著(P<0.01);将成熟的卵母细胞进行孤雌激活后,优级卵的囊胚率高于次级卵(58.00±2.88%vs 41.00±6.40%),且差异极显著(P<0.01),但囊胚总细胞数两者无显著差异(P>0.05);将成熟的卵母细胞进行体外受精后,优级卵的囊胚率、囊胚总细胞数均高于次级卵(18.00±5.70%vs 4.25±2.31%,41.7±3.33 vs 36.2±2.10),且差异极显著(P<0.01);进行受精卵孵育时,未去除卵丘细胞的胚胎卵裂率、囊胚率、囊胚总细胞数均高于去除卵丘细胞的(88.14±7.48%vs 58.69±2.89%,51.2±7.33%vs 11.92±2.29%,41.7±3.33 vs 36.8±3.15),且差异极显著(P<0.01)。以上结果说明:卵丘细胞层数较多的卵母细胞成熟率高,且其孤雌和体外受精胚胎的发育潜能也好;卵丘细胞存在时,有助于卵母细胞的受精及以后的胚胎发育。

猪热休克蛋白70基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

根据GenBank中收录的猪HSP70基因序列,设计了1对特异性引物。运用RT-PCR技术从经热应激诱导的大约克猪组织总RNA中扩增得到了HSP70基因,并将其克隆至pMD18-T Simple载体上,进行序列测定。将编码猪HSP70的基因亚克隆至pET-32a(+)上,并将重组质粒pET-32-pHSP70在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中经IPTG诱导表达。核苷酸测序结果显示,获得的基因序列全长2200 bp,含1932bp的开放阅读框,编码643个氨基酸,与已知猪HSP70核苷酸序列和氨基酸序列的同源性都高达99.5%。SDS-PAGE电泳及Western-blot分析表明,猪HSP70在BL21(DE3)pLysS中得到了高效表达。

中药含药血清药理研究现状及应用于奶牛探讨

中药血清药理学是近十余年来才兴起的一门实验方法学，它是指将中药或中药复方经口给动物灌服一定时间后采集动物血液、分离血清，用此含有药物成分的血清进行体外实验的一种实验方法，最初是由日本学者在1984年提出的，并由田代真一命名为”中药血清药理学”。由于它同用中药粗制剂直接进行的体外实验相比，既具有体外实验条件可控性强、药物效应易于检测、可深入揭示药物作用机理的优点，又能够防止中药粗制剂本身的理化性质对实验的干扰，

适用微生态制剂治疗奶牛冬痢

奶牛冬季痢疾是一种以急性腹泻为主要特征的高度接触性传染病,大多数牛场每三年爆发一次。绝大多数研究者认为冠状病毒是冬季痢疾的病因。一直以来对本病还没有有效的控制或防治措施。我们在抗感染微生物理论指导下运用微生态制剂对本病进行全群防治,使疾病流行期缩短了至少一个星期,收到了很好的效果。

奶牛繁殖的常见问题及科学管理

奶牛的繁殖障碍即奶牛暂时性或永久性不孕症，主要有慢性子宫炎、隐性子宫内膜炎、慢性子宫颈炎、卵巢机能不全、持久黄体、卵巢囊肿、排卵延迟、繁殖免疫障碍、营养负平衡引起生殖系统机能复旧延迟等，高产奶牛更为普遍。造成奶牛繁殖障碍主要因素有三个方面：一是饲养管理不当，二是生殖器官疾病，三是繁殖技术失误。主要对策是科学合理的饲养管理、严格繁殖技术操作规范、实施母牛产后重点监控和提高奶牛不孕症防治效果。

一种基于支持向量机的种猪疾病早期预测方法

抗病育种是当前国内外发展健康养殖业的一项重要内容。笔者采用支持向量机的方法,利用免疫群体相关数据构建了一个种猪疾病早期诊断模型。利用该模型可以通过测量数个相关的生理生化指标较准确地预测初生仔猪的健康状况。该模型不仅可以应用于生猪生产,亦可用于高抗病型种猪的早期选种。

吩苯哒唑对带虫仔猪的应用效果研究

当前,规模化猪场都不同程度地感染寄生虫,主要危害猪群的有蛔虫、鞭虫、疥螨等.使得猪群采食量减少,生长率和饲料利用率下降,造成明显的经济损失. 吩苯哒唑(Fedendazole)是一种苯骈唑类广谱抗蠕虫药,据报道,吩苯哒唑作为一种驱虫药,主要可驱除下列寄生虫:后圆虫、蛔虫、成虫和幼虫(3、4期幼虫,肝,肺,肠道阶段)、结节尾线虫、红色猪圆线虫、猪鞭虫、有齿冠尾线虫幼虫等,为验证其对带虫仔猪的饲养效果,特进行本试验.

几种处理方法对鸡精液冷冻保存效果的影响

本文从冷冻保存主要环节的几种处理方法对鸡精液冷冻保存的效果进行了探讨,结果显示:采用液氮熏蒸法的冻后活力和复苏率均显著高于直接投入液氮法;采用细管冷冻的冻后活力和复苏率均显著高于颗粒冷冻;采用两步稀释法的冻后活力和复苏率均显著高于一步稀释;精液平衡0.5h、1h、2h精子冻后活力和复苏率均差异不显著;熏蒸时间为10min的冻后活力和复苏率均显著高于5min,且略高于15min但差异不显著;37～40℃解冻后精子活力和复苏率显著高于20～25℃,但与55～60℃差异不显著。