广东省2005—2013年肺炎链球菌临床分离株的血清学分型

目的了解广东省临床标本中分离到的肺炎链球菌的血清型别分布特征,为确立当地肺炎链球菌菌苗的组成和疾病的防治提供重要的科学依据。方法收集广东省7个地区14家监测医院临床分离的383株肺炎链球菌,以荚膜肿胀实验结果为标准进行血清学分型研究。结果 383株肺炎链球菌主要来自痰、血液、脑脊液和其他标本(如眼分泌物、咽拭子等),共分出21个血清群,其中以19型最常见(47.8%),其次为6型(13.1%)、23型(10.7%)、14型(5.7%)、3型(5.5%)、15型(4.4%)。目前市面上使用的PVC7、PVC11和PCV23疫苗的覆盖率分布达到76.18%、82.35%和95.00%。结论广东省肺炎链球菌血清型别多样,主要流行型别为19F、6、19A、23F、14、3和15型,目前所使用的疫苗在我省具有很高的覆盖率。

2015年广东省沙门菌监测及其耐药性分析

目的 了解广东省腹泻患者感染沙门菌的情况,分析沙门菌的血清型分布和耐药特征.方法 采集粪便标本进行传统分离培养,对沙门菌进行血清分型和药物敏感试验.结果 2015年广东省沙门菌监测阳性率为7.64％,男女之比为1.52∶1,各年龄段患者均可感染沙门菌,以0～6岁的儿童感染为主,所占比例为81.74％.夏秋季沙门菌的分离率为10.73％,高于冬春季的分离率4.24％,差异有统计学意义（X2 =463.77,P〈0.01）.不同地区沙门菌分离率分别为：珠海16.82％, 河源15.85％, 阳江11.81％, 江门10.68％, 中山8.49％,茂名8.07％,揭阳8.05％,韶关7.35％,佛山6.97％,东莞6.03％,广州5.48％,湛江0.00％, 地区之间比较,差异有统计学意义（X2 =367.67,P〈0.01）.除1株沙门菌不能分型外,其余2 376株菌分为108种血清型.前4位优势血清型分别为4,5,12：i：-沙门菌、肠炎沙门菌、斯坦利沙门菌和鼠伤寒沙门菌.沙门菌对亚胺培南、阿奇霉素、头孢他啶、头孢噻肟和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑的敏感率较高,但多重耐药现象严重.结论 广东省人源沙门菌以4,5,12：i：-沙门菌和肠炎沙门菌为主.头孢他啶和头孢噻肟可作为治疗沙门菌感染的首选用药.沙门菌多重耐药现象严重,需要进一步加强耐药监测.

表皮生长因子对大鼠睾丸间质干细胞增殖和分化的影响研究

目的研究表皮生长因子对大鼠睾丸间质干细胞增殖和分化的影响。方法二甲磺基乙烷单次腹腔注射成年雄性大鼠(75 mg/kg),7 d后,分离曲细精管,构建曲细精管体外培养模型,进行处理:①表皮生长因子处理24 h,试剂盒进行5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)标记,Image-Pro Plus软件统计分析睾丸间质干细胞增殖情况;②表皮生长因子处理3 d后,换为含LH培养基继续培养至21 d,收集培养基上清液,放射免疫法检测上清液睾酮的分泌情况,同时收集曲细精管提取RNA,荧光定量PCR检测睾酮合成通路相关基因的表达情况,综合分析睾丸间质干细胞在表皮生长因子作用下的分化情况。结果表皮生长因子能够显著地促进睾丸间质干细胞的增殖;曲细精管培养基上清液的睾酮水平明显上升,并且在睾酮合成通路上Star、Cyp11a1和Hsd3b1经过表皮生长因子诱导后,在mRNA水平上均出现了明显的上调,表明睾丸间质干细胞出现了分化。结论表皮生长因子能够诱导睾丸间质干细胞的大量增殖和向睾丸间质细胞系的分化。

广东省2013—2014年食源性疾病主动监测的病原学特征分析

目的 了解广东省腹泻病例中沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌和4种致泻性大肠埃希菌［肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）、肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、产志贺毒素大肠埃希菌（STEC）、肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）］的感染情况及其血清型别、耐药变化和分子特征。方法 对2013-2014年广东省食源性疾病主动监测检出的沙门菌、志贺菌、副溶血弧菌和4种致泻性大肠埃希菌菌株进行血清分型、药物敏感试验和PFGE分型。结果 2013-2014年检测粪便标本57 834份，分离到3 372株致病菌，检出率为5.83%；沙门菌的检出阳性率最高，其次是副溶血弧菌、致泻性大肠埃希菌、志贺菌。3 213株沙门菌分为143种血清型，最常见的血清型为鼠伤寒、4，5，12：i：-、肠炎、斯坦利和德尔卑沙门菌。沙门菌对头孢类和氟喹诺酮类药物均较敏感；不同血清型沙门菌对抗生素的耐药率有明显差异，10种最常见血清型中，肠炎沙门菌对头孢类药物的耐药率最高，德尔卑沙门菌对环丙沙星的耐药率最高。2 289株各血清型沙门菌的PFGE型别分布多样，表现出较大的指纹图谱多态性。85株副溶血弧菌分为10种血清型，最主要的血清型为O3：K6（61.18%），其次是O4：K8（10.59%）；tdh携带率高（81.18%），trh携带率较低（7.06%），有10株菌（11.76%）不携带该两种毒力基因；副溶血弧菌对亚胺培南、萘啶酸、复方新诺明、氯霉素、四环素的敏感率均〉95%。13株志贺菌分别为宋内志贺菌9株、福氏志贺菌3株、鲍氏志贺菌1株；对头孢他啶、环丙沙星、氯霉素较敏感（76.92%）。检出的86株致泻性大肠埃希菌中ETEC 29株（33.72%），EPEC 27株（31.39%），STEC 27株（31.39%），EIEC 3株（3.48%）。结论 2013-2014年广东省食源性疾病主动监测中沙门菌检出率最高（5.57%），其次是副溶血弧菌、致泻性大肠埃希菌、志贺菌；沙门菌、副溶血弧菌和志贺菌对头孢类和氟喹诺酮类药物敏感；沙门菌感染中仅发现聚集性病例，但未监测到暴发。

2013-2016年广东省腹泻患者致泻性大肠埃希菌病原学监测

目的了解广东省腹泻患者致泻性大肠埃希菌（DEC）的感染状况及菌株的血清型分布、药物敏感性和分子特征。方法采集粪便标本进行传统分离培养，对疑似菌株进行多重PCR毒力基因鉴定和生化鉴定，获得阳性菌株进行血清学分型、药物敏感试验和脉冲场凝胶电泳（PFGE）。结果腹泻患者中DEC的总阳性率为6.26%，肠致病性大肠埃希菌（EPEC）、肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）、肠出血性大肠埃希菌（EHEC）、肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）和肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）的阳性率分别为2.47%、1.54%、1.32%、0.62%和0.09%，以0～〈7岁的儿童感染为主。血清分型率为52.54%，EHEC分子血清分型率为15.00%。DEC对亚胺培南、环丙沙星、头孢他啶和头孢噻肟的敏感率较高。DEC多重耐药率为58.45%，EPEC多重耐药现象最严重。广东省腹泻患者ETEC、EHEC、EPEC和EAEC的PFGE图谱呈现高度多态性。结论EPEC是广东地区DEC流行的优势型别，首选三代头孢菌素为儿童感染治疗用药，成人还可选用环丙沙星。DEC多重耐药现象严重，应加强DEC的病原学监测和耐药性监测。

广东省2007-2016年人源沙门菌流行现状及病原学特征

目的 了解广东省人源沙门菌1，4，[5]，12：i：-的流行现状、耐药性与分子特征。方法 对2007－2016年广东省沙门菌腹泻病例监测检出的人源沙门菌1，4，[5]，12：i：-进行药物敏感试验、PCR检测和PFGE分型。结果 2007－2016年广东省共检出人源沙门菌1，4，[5]，12：i：-2 960株，检出率逐年增多，至2015年成为广东省人源沙门菌中最主要的血清型。病例中男女性别比为1.58∶1，发病年龄以婴幼儿为主。沙门菌1，4，[5]，12：i：-除对亚胺培南100%敏感外，对其他17种抗生素均有不同程度的耐药。2011－2016年对头孢他啶、头孢噻肟和环丙沙星的耐药率呈上升趋势。多重耐药现象严重，具有ASSuT多重耐药的有70.62%（435/616），具有ACSuGSTTm多重耐药的有27.11%（167/616）。第Ⅱ相鞭毛蛋白不表达主要（75.53%）是缺失fljA、fljB和hin基因，但保留了iroB、STM2740、STM2757基因，共有8种不同的缺失方式。2 347株菌有934种PFGE谱型别，表现出较大的指纹图谱多态性，最主要的优势PFGE谱型为JPXX01.GD0226型（97株菌，4.13%）。168株沙门菌1，4，[5]，12：i：-的PFGE图谱与鼠伤寒沙门菌PFGE图谱一致。结论 沙门菌1，4，[5]，12：i：-已成为广东省人源沙门菌中最主要的血清型，且多重耐药现象严重，第Ⅱ相鞭毛蛋白不表达主要由缺失fljA、fljB和hin基因引起，其PFGE型别多样，呈遗传多态性。

夏桑菊颗粒体外抗Ⅰ型登革热病毒的作用

目的研究夏桑菊颗粒体外抗Ⅰ型登革热病毒(DENV-1)的作用效果。方法 MTT法测定夏桑菊颗粒和利巴韦林对C6/36细胞的最大无毒剂量以及DENV-1感染细胞病变效应;细胞免疫荧光法,以NS1蛋白为目标蛋白,测定DENV-1经不同稀释度的夏桑菊颗粒预处理后感染能力;荧光定量PCR法检测夏桑菊颗粒和利巴韦林对DENV-1拷贝数的影响,采用方差分析比较不同稀释度药物对病毒的影响。结果MTT结果显示夏桑菊颗粒和利巴韦林的最大无毒剂量分别为7. 81 mg/m L和3. 13 mg/m L;经过夏桑菊颗粒溶液处理后,感染病毒的细胞存活率增加(21. 9±4. 3)%和(15. 7±4. 1)%,同时,经过利巴韦林处理后,细胞存活率分别增加(39. 2±1. 9)%和(24. 2±3. 1)%,两者均能明显减弱病毒引起细胞病变的效应(P <0. 05);荧光实验结果显示夏桑菊颗粒可使病毒相对感染率下降(42. 1±7. 4)%和(24. 2±2. 5)%,利巴韦林可使病毒相对感染率下降(51. 1±2. 3)%和(49. 3±2. 9)%,两者对病毒的感染具有明显的抑制作用(P <0. 05); q PCR实验结果表明夏桑菊颗粒对病毒拷贝数的抑制率达到(42. 1±7. 4)%和(24. 2±2. 5)%,利巴韦林对病毒拷贝数抑制率达到(51. 1±2. 3)%和(39. 3±2. 9)%,两者对病毒的RNA复制产生了明显的抑制作用(P <0. 05)。结论夏桑菊颗粒通过体外预给药的方式会产生明显的抗DENV-1的作用,其作用效果与利巴韦林相近。

基于微球液态阵列分子技术的沙门菌血清分型研究

目的 了解基于微球液态阵列分子技术对广东省腹泻病例沙门菌分离株的分型效果。方法 在微球液态阵列分子平台上应用SSA试剂盒对沙门菌人源株进行分子血清分型。结果 2010-2014年广东省人源沙门菌4 942株分为189种血清型，前100种血清型占所有菌株的98.08%（4 847/4 942），其中98%可用SSA试剂盒完整分型；采用SSA试剂盒检测198株菌O抗原，可检出181株；用SSA检测H抗原的结果（98.32%，528/537）与传统血清凝集试验结果相符；fljB基因的符合率为93.09%（175/188），fljB基因假阴性率为7.35%（9/134），假阳性率为7.41%（4/54）；sdf基因和Vi基因符合率均为100%；用SSA试剂盒检测12株血清不能分型的沙门菌，有11株能成功分型。结论 SSA试剂盒能对96%以上的广东省人源沙门菌株进行分子血清分型，其结果与传统方法符合率超过98%。基于微球液态阵列分子技术的血清分型法比传统方法更具有高通量且快速的特点。

住院患者与环境分离的CRKP同源性及其传播特征

目的按探讨碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者及同病房患者与环境分离CRKP的同源性、耐药机制及传播特征。方法收集中山市中医院2017-2022年全院CRKP菌株,从2020年1月开始对CRKP感染患者的同病房患者筛查直肠拭子,对CRKP感染患者周围环境采样,筛查CRKP;使用胶体金法检测碳青霉烯酶基因,运用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)进行同源性分析。结果共收集CRKP菌株39株,其中患者菌株36株,筛查同病房患者直肠拭子61例,检出CRKP菌株2株,采集环境标本680份,1名CRKP患者的卫生间水槽下水口检出CRKP;39株CRKP中产KPC酶9株(23.08%),产NDM酶21株(53.85%),9株未检出常见的5种碳青霉烯酶;PFGE分析发现39株CRKP分为18个克隆型,6年内医院内发生过3次CRKP克隆传播。结论加强CRKP感染患者房间水槽的消毒,可阻止CRKP通过水槽引起传播;医院内各时段流行的CRKP基因型可能不同,明确其类型对指导治疗决策有重要意义。医院内流行是CRKP检出率上升的原因,同源性分析结果可为确定主动筛查的目标患者提供依据。

沙门菌和志贺菌实验室能力比对验证的模拟粪便标本的研制和评估

目的：研制适用于临床沙门菌和志贺菌实验室能力比对验证（ proficiency testing, PT）项目的模拟粪便标本,建立有效的标本制备与评估流程。方法分别把沙门菌、志贺菌和大肠埃希菌加标至基质扁豆中制成单一目标菌的模拟粪便标本；把不同比例的大肠埃希菌与沙门菌加标至基质扁豆中,制成混合菌的模拟粪便标本；用Cary-Blair运送培养基沾取混合物,制成PT标本。通过鉴定评估PT标本的准确性和稳定性。通过参与实验室反馈的鉴定结果评估外部质控考核结果。结果按100∶1~106∶1比例制备大肠埃希菌与沙门菌混合的PT标本,能在鉴定培养基有效分离两种菌落,按104∶1~106∶1的比例制备大肠埃希菌与沙门菌混合的PT标本,需增菌后才能有效分离沙门菌；16家参与实验室中有14家医院质控考核获得“满意”结果,占87.5%（14/16）,2家医院获得“基本满意”结果,占12.5%（2/16）。结论本研究制备的模拟粪便PT标本及实验质控流程适用于临床沙门菌、志贺菌及类似的微生物鉴定能力验证项目。