肿瘤相关巨噬细胞(TAMs):从基础到临床

巨噬细胞是肿瘤微环境(TME)的重要组成,对肿瘤的发生发展至关重要。免疫系统对癌前突变细胞进行免疫监视,抑制肿瘤发生发展,巨噬细胞在其中发挥不可或缺的功能。然而,大量证据表明肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)在肿瘤进展过程中发生功能转换,变成有利于肿瘤的免疫抑制状态,促进肿瘤免疫逃逸。很多研究尝试通过不同方法理清巨噬细胞功能转换的机制,同时运用这些机制探索靶向TAMs的癌症免疫治疗新策略。本文将阐述巨噬细胞分类方法的演变,结合临床信息介绍靶向TAMs的癌症免疫疗法的新进展。

色素上皮衍生因子PEDF全基因敲除诱导脂肪堆积的作用及机制

【目的】研究色素上皮衍生因子PEDF表达水平与脂代谢的关系,探讨PEDF参与血脂代谢的可能调控机制,为揭示PEDF参与多种代谢疾病提供重要依据。【方法】应用Crispr/Cas9基因修饰技术构建PEDF-/-小鼠,高脂饮食(HFD)诱导肥胖小鼠模型,检测小鼠血脂水平(甘油三脂TG、总胆固醇TC、游离脂肪酸FFAs)的变化,实时定量RT-PCR检测脂肪组织中脂肪代谢关键基因(ATGL、PPAR-γ、FAS、HSL)的表达量。【结果】基因组水平鉴定和蛋白水平检测表明PEDF-/-小鼠构建成功;HFD诱导肥胖后,野生型(WT)小鼠体重增加百分比、内脏脂肪及血脂水平均比正常饮食组(CD)的高(P<0.05),差异均具有统计学意义,说明肥胖模型构建成功,而PEDF-/-组小鼠HFD后体重增加百比、内脏脂肪和血脂水平高于CD组(P<0.05),高于WT小鼠的HFD组(P<0.05);实时定量RT-PCR结果显示,WT小鼠HFD后ATGL、PPAR-γ和FAS转录水平都比CD组低(P<0.05),HSL m RNA水平无明显差别;而PEDF敲除后,ATGL、PPAR-γ和HSL转录水平较WT组的显著下调(P<0.01),而FAS水平CD组明显升高,HFD组显著下调;PEDF敲除后,HFD组ATGL m RNA水平高于CD组,PPAR-γ和HSL m RNA水平低于CD组。【结论】成功构建PEDF基因敲除小鼠;PEDF可能通过ATGL、PPAR-γ和HSL促进了脂肪分解,通过FAS抑制脂肪酸合成,从而参与了肥胖小鼠的血脂代谢及内脏脂肪沉积。

MRTF-A通过NF-κB参与AGEs诱导肾小球系膜细胞中FN、ICAM-1的表达

目的该研究观察在糖基化终末产物(AGEs)诱导大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中,心肌素相关转录因子MRTFA的变化及其对细胞黏附分子(ICAM-1)及纤维连接蛋白(FN)的影响,探讨MRTF-A是否通过影响NF-κB信号通路参与糖尿病肾病。方法 AGEs条件下,抑制剂CCG-1423抑制MRTF-A,或对MRTF-A进行过表达,干扰处理,通过Western blot检测MRTF-A、ICAM-1和FN的蛋白水平变化及p65在细胞核内的水平。结果在AGEs诱导的GMCs中,MRTF-A的蛋白表达增加;干扰或抑制MRTF-A能够下调AGEs诱导的FN和ICAM-1的蛋白表达及p65入核水平;而过表达MRTF-A则进一步上调FN和ICAM-1的蛋白表达及p65入核水平。结论 AGEs能够上调GMCs中MRTF-A的表达,且MRTF-A通过影响NF-κB信号通路参与介导了AGEs诱导的FN和ICAM-1的蛋白表达。

E3泛素-蛋白连接酶Parkin介导线粒体自噬参与荷瘤小鼠心肌损伤

【目的】观察荷瘤状态下小鼠心肌损伤情况,探讨park2基因编码的E3泛素-蛋白连接酶Parkin介导线粒体自噬在荷瘤小鼠心肌损伤中的作用及机制。【方法】通过PCR和蛋白质免疫印迹筛选和鉴定park2^(-/-)小鼠;通过皮下移植瘤技术构建荷瘤动物模型,采用小动物心脏超声分析小鼠心脏结构与功能,观察心室内径、心室容积、射血分数、缩短分数以及心室壁厚度的变化;采用病理学方法分析小鼠心脏的形态学特征;使用Fluo-3、Rhod-2、DHE-ROS及JC-1探针进行线粒体损伤指标检测;通过qPCR技术分析线粒体生成相关因子tfam,nrf1,线粒体融合相关因子opa1,mfn2,线粒体分裂相关因子fis1,线粒体自噬相关因子park2表达改变;通过Western Blot技术检测关键蛋白LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、Parkin表达水平。【结果】心脏超声检测结果显示,B16黑色素瘤荷瘤小鼠心脏功能下降明显(P<0.01);电镜结果显示,荷瘤状态下小鼠心肌细胞线粒体数量增多,出现空泡化改变(P=0.032);进一步分析显示荷瘤状态可引起心肌细胞线粒体损伤,并激活线粒体自噬;park2^(-/-)小鼠荷瘤后,其死亡率明显增加(P<0.05);对park2^(-/-)小鼠进行上述荧光探针、病理学观察及关键分子检测,结果显示park2^(-/-)小鼠线粒体损伤较WT小鼠严重,线粒体自噬过程受到抑制(P<0.01)。【结论】E3泛素-蛋白连接酶Parkin在荷瘤状态心肌损伤过程中具有一定的保护作用,这与其介导的线粒体自噬有关。

定量代谢组学研究进展

定量代谢组学可通过鉴定机体内所有的代谢产物,并测定其量及量的变化,用于考察机体在受到外界刺激或干扰时的代谢变化。借助定量代谢组学平台,对靶代谢物进行精确定量,有利于发现潜在的生物标志物以及阐释发病机制和药物作用机制,对疾病的早期诊断和防治起指导作用。综述定量代谢组学的实验流程、分析技术、定量方法及应用。