姜黄素对活化肝星状细胞内脂质水平的影响及其机制

目的探讨姜黄素对活化肝星状细胞内脂质水平的影响及其可能机制。方法向C57/B6小鼠门静脉灌注链霉蛋白酶和胶原酶,采用梯度离心法分离小鼠肝星状细胞,以不同浓度(5、10、20μmol/L)姜黄素干预肝活化星状细胞和肝AML12细胞24h。油红O染色观察细胞内脂滴数量的变化; ELISA法检测细胞内甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)含量;RT-qPCR和Western blotting检测细胞内脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调控元件结合蛋白(SREBP-1c)、脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)和自水解酶域包含蛋白5(abhd5)等脂质代谢相关基因的mRNA及蛋白表达。结果细胞油红O染色后,镜下可见暗红色脂滴数量随姜黄素浓度的增加而逐渐增多且呈剂量依赖性,但姜黄素对小鼠AML12肝细胞内脂滴水平无影响。采用5、10、20μmol/L姜黄素干预小鼠肝星状细胞,细胞内TG含量[分别为(1.495±0.230)nmol/mgprotein、(3.758±0.717)nmol/mgprotein、(4.490±0.360)nmol/mgprotein]与对照组[(1.176±0.343)nmol/mg protein]比较明显升高(P<0.01);FFA含量[分别为(57.250±1.463)nmol/mgprotein、(78.425±1.030)nmol/mgprotein、(111.150±2.350)nmol/mgprotein]与对照组[(28.750±2.433)nmol/mgprotein]比较亦明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。此外,姜黄素明显上调了与脂质合成相关的FAS和SREBP-1c基因的mRNA和蛋白表达,下调了与脂质分解相关的ATGL和mRNA及蛋白表达(P<0.05),但对abhd5 mRNA和蛋白的表达无明显影响(P>0.05)。结论姜黄素能够调节肝星状细胞脂质代谢相关基因的表达,恢复活化肝星状细胞的脂滴水平,进而抑制肝星状细胞的活化进程。