广东省巴戟天DNA条形码及遗传多样性分析

目的构建广东省巴戟天DNA条形码数据库以及研究广东省不同产地巴戟天的遗传多样性。方法采用DNA条形码技术对149个巴戟天样本进行分析,构建DNA条形码数据库。利用ISSR分子标记技术对广东省8个居群的巴戟天进行遗传多样性分析。结果巴戟天五个通用条形码的PCR测序成功率为psbA-trnH>rbcL>matK>ITS2>ITS,149个巴戟天样本建立了含有569条序列的数据库。研究筛选出6条ISSR引物,从巴戟天中扩增得80条条带,多态性比率为92.50%,遗传相似系数在0.5625-0.8910,表明广东省巴戟天的遗传多样性较高。ISSR标记揭示的PCoA结果、UPGMA聚类分析结果一致,八个居群分为两大支。结论广东省巴戟天具有较高的遗传多样性。

消痤汤对痤疮模型大鼠炎症反应的改善作用研究

目的:观察消痤汤对痤疮丙酸杆菌诱导的痤疮(Acne)模型大鼠炎症反应的改善作用,并探究其作用机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、异维A酸软胶囊(3.125 mg/kg)组及消痤汤低(7.3 g/kg)、中(14.7 g/kg)、高(29.5 g/kg)剂量组,每组各10只。除正常对照组外,其余各组于大鼠耳廓导管开口处每日涂抹1 mL的油酸,隔日经耳廓皮下组织注射100μL痤疮丙酸杆菌悬液(6×10^(7)CFU/mL),连续14 d,建立痤疮模型。造模成功后,各给药组每天灌胃给药,正常对照组与模型组灌胃相应体积生理盐水。连续21 d后,使用游标卡尺测量大鼠耳廓厚度计算各组大鼠的耳廓肿胀率,通过HE染色观察其病理变化,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α、IL-6含量,免疫组化法分析耳部组织TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达,Q-PCR及Western Blot检测TNF-α、IL-6、AKT1、MMP-3表达。结果:与模型组比较,各给药组痤疮大鼠耳部病理情况有所改善,消痤汤中、高剂量组大鼠耳廓肿胀率及血清TNF-α、IL-6含量显著降低,免疫组化试验结果显示消痤汤中、高剂量组耳部组织TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达明显下调,Q-PCR和Western Blot结果显示除中剂量组耳部组织中IL-6 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)外,消痤汤中、高剂量组耳部组织中TNF-α、IL-6、AKT1、MMP-3 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论:消痤汤治疗痤疮丙酸杆菌诱导的痤疮机制可能是通过改善炎症反应发挥其治疗作用。

一测多评法同时测定枯芩、子芩中6个黄酮类成分的含量

目的:建立一测多评法同时测定枯芩、子芩中6个黄酮类成分的含量,并对枯芩、子芩进行区分。方法:以黄芩苷为内参物,分别确定汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A苷、千层纸素A、黄芩素5个黄酮类成分的相对校正因子,并测定含量。将结果与外标法(ESM)进行比较,对一测多评法结果进行验证。结果:以黄芩苷为内参物建立的汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A苷、千层纸素A、黄芩素相对校正因子分别为2.3578、2.6707、2.7829、2.5586、1.6006,18批黄芩样品一测多评法与外标法含量测定结果之间无显著性差异。子芩中黄芩苷与黄芩素、汉黄芩苷与汉黄芩素、千层纸素A苷与千层纸素A的比值显著大于枯芩(P<0.01)。结论:该研究建立的一测多评法可用于黄芩饮片的质量评价。