乌司他丁联合丙氨酰谷氨酰胺对重症急性胰腺炎患者细胞因子的影响

目的:观察蛋白酶抑制剂乌司他丁联合丙氨酰谷氨酰胺对重症急性胰腺炎(SAP)患者血清细胞因子的影响.方法:64例SAP患者随机分为治疗组(乌司他丁联合丙氨酰谷氨酰胺治疗)及对照组(乌司他丁治疗)各32例,对照组加用乌司他丁1×105U溶于50g/L葡萄糖溶液250mL中静滴,8h1次,治疗组在对照组治疗的基础上每天加用丙氨酰谷氨酰胺0.4g/kg.结果:治疗组第7、10天TNF-α(ng/L)、和内毒素(ng/L)水平明显低于对照组(7d:38.83±14.71vs51.92±18.29;0.46±0.13vs0.71±0.19;10d:31.49±12.65vs48.36±15.43;0.22±0.07vs0.43±0.15;均P<0.05),IL-6在第7天时明显低于对照组(117.68±14.87vs163.43±19.76,P<0.05),IL-18两组各时间点差异无统计学意义.结论:蛋白酶抑制剂乌司他丁联合生长抑素能抑制SAP患者TNF-α、IL-6的表达和合成,减少肠道内毒素易位,有利于提高SAP患者的救治成功率.

肠内免疫营养对烫伤大鼠Peyer’s结淋巴细胞的影响

目的观察不同肠内营养物对大鼠烫伤后Peyer’s结T淋巴细胞亚群的影响。方法选取Wistar大鼠104只,随机分为饲料组(Chow组,n=32)、标准肠内营养组(EN组,n=32)、肠内免疫营养组(EIN组,n=32)和对照组(n=8)。除对照组外,其余3组均造成30%TBSAⅢ度烫伤模型,伤后早期Chow组、EN组、EIN组分别给予常规饲料、标准肠内营养制剂(能全力)和肠内免疫营养制剂(士强),于伤后第1、4、7、10天用流式细胞仪检测观察Peyer’s结淋巴细胞总数及其T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)的变化。对照组大鼠制成假烫模型,其标本检测数据作为其它3组制模前数据。结果制模后各时点Chow组和EN组Peyer’s结淋巴细胞总数均显著减少(P<0.01或P<0.05),而EIN组仅在制模后第1、4天显著减少(P<0.01或P<0.05),EIN组在制模后第7、10天均明显高于EN组(均P<0.05)。制模后第1、4天Chow组Peyer’s结CD3+细胞和CD4+细胞数均显著减少(P<0.05),而EN组和EIN组变化不明显;3组在伤后各时点CD8+细胞数均无显著变化(均P>0.05)。结论烧伤后早期肠内免疫营养支持能快速有效地促进Peyer’s结淋巴细胞增殖,有利于肠道免疫屏障的恢复。

早期肠内谷氨酰胺补给对烫伤大鼠Peyer's结淋巴细胞亚群的影响

目的:观察烫伤大鼠伤后不同时间Peyer's结细胞总数及淋巴细胞亚群在营养支持影响下的变化形式,了解不同肠内营养支持对Peyer's结内细胞亚群的影响.方法:选取健康SD大鼠,随机分为标准肠内营养组(EN组,n=32)和谷氨酰胺补给组(EN+Gln组,n=32),制成烫伤动物模型(30%TBSAⅢ度烫伤),伤后早期分别给予标准肠内营养制剂(能全力)和标准肠内营养制剂+谷氨酰胺,于伤后第1、4、7、10天观察Peyer's结细胞总数及进行流式细胞仪细胞亚群(CD3+、CD45Ra+、CD3+/CD4+、CD3+/CD8+)分析.结果:烫伤后Peyer's结淋巴细胞总数在伤后1d明显减少,主要体现为B细胞总数的减少,EN+Gln组在伤后7d时淋巴细胞总数恢复至伤前水平[(5.29±1.03)×106vs(6.13±1.14)×106,P>0.05],而EN组没有恢复;EN+Gln组B细胞比例及总数在7、10d时与伤前比较无明显差异[(2.87±0.69)×106,(3.05±0.72)×106vs(3.29±0.62)×106,P>0.05],而EN组B细胞总数在10d时与伤前比较明显减少[(2.07±0.63)×106vs(3.29±0.62)×106,P<0.05];CD4+和CD8+细胞在伤后两组变化不明显.结论:肠内谷氨酰胺补给支持能快速有效地促进Peyer's结淋巴细胞增殖,尤其是B细胞,增加Peyer's结内淋巴细胞总数;有利于肠道免疫屏障的恢复和强化.

早期肠内谷氨酰胺补给对烫伤大鼠肠黏膜细胞紧密连接的影响

目的:了解早期肠内谷氨酰胺补给对烫伤后肠黏膜屏障功能的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:选取健康SD大鼠随机分为标准肠内营养组(EN组)和谷氨酰胺补给组(EN+Gln组),每组32只,制成烫伤动物模型(30%TBSAⅢ度烫伤),伤后早期分别给予标准肠内营养制剂(能全力)和标准肠内营养制剂+谷氨酰胺,于第1、4、7、10天观察血清D-乳酸,Western blo半定量分析紧密连接结构蛋白Occludin和RTPCR分析ZO-1mRNA表达的变化.结果:烫伤后血清D-乳酸水平升高,EN组在观察时间内血清D-乳酸水平没有恢复至伤前水平,EN+Gln组在伤后4d恢复(4.5±0.8mg/Lvs3.8±0.6mg/L);Western blot半定量分析显示EN+Gln组伤后Occludin表达先下降后上升在4、7d时明显高于EN组(1.18±0.14vs0.79±0.09,1.59±0.16vs1.12±0.13,均P<0.05)烧伤后1d时,2组ZO-1mRNA表达与伤前比较均明显下降(0.71±0.19,0.76±0.17vs1.00,均P<0.05),4d时EN+Gln组与EN组比较差异有显著的统计学意义(1.17±0.16vs0.76±0.15P<0.05),其余时间点各组间差异均无统计学意义.结论:早期肠内谷氨酰胺补给支持能快速逆转烧伤后TJ结构蛋白Occludin、ZO-1表达的下降,从而改善肠黏膜的屏障功能.

三七总皂甙对大鼠肝卵圆细胞增殖模型肝脏p-ERK1/2表达的影响

目的研究三七总皂甙(PNS)对大鼠肝卵圆细胞(HOC)增殖模型肝脏p-ERK1/2表达的影响,探讨PNS调节HOC增殖的可能信号途径。方法将66只健康雄性Wistar大鼠随机分成对照组(n=6)、模型组(n=30)和PNS组(n=30)。模型组、PNS组采用2-AFF/PH方法建立HOC增殖模型,PNS组大鼠建模时(即第一次2-AAF灌胃前1 h)予以PNS 25 mg/(kg.d)腹腔内注射,并持续至实验结束。模型组、PNS组在术后第4小时,第4、8、12、16天随机取6只大鼠检测。对照组大鼠未予特殊处理。采用组织病理技术观察肝组织的形态学变化;免疫组织化学和细胞形态学方法计数HOC;免疫组织化学及Western blot分析p-ERK1/2蛋白水平。结果对照组、模型组和PNS组术后第4小时未见HOC增殖。模型组术后第4天汇管区有HOC增殖反应,第8天HOC增殖达峰值,第12天HOC从汇管区向肝实质内浸润,第16天HOC增殖较第12天减少。与模型组比较,PNS组第4、8、16天HOC增殖均减少(均P<0.05),第12天HOC增殖增多(P<0.05)。对照组大鼠肝组织p-ERK1/2蛋白水平很低,模型组p-ERK1/2蛋白表达术后各时点分别为对照组的(2.24±0.17)、(3.87±0.35)(、5.28±0.48)、(2.96±0.33)、(2.12±0.19)倍;PNS组各时点p-ERK1/2的表达分别为对照组的(1.56±0.23)、(2.77±0.19)、(3.53±0.35)、(3.62±0.45)(、1.36±0.16)倍。与模型组比较,PNS组术后第12天p-ERK1/2表达升高(P<0.01),第4小时,第4、8、16天表达均减少(均P<0.05)。结论在HOC介导肝再生过程中,HOC的p-ERK1/2表达与其增殖趋势相同;PNS可使大鼠肝脏的HOC增殖及p-ERK1/2的表达降低、滞后、持续时间延长。

早期肠内免疫营养对烫伤大鼠Peyer's结Th1/Th2细胞因子的影响

目的:观察伤大鼠烫伤后不同时间Peyer's淋巴细胞Th1细胞因子IL-2、IFN-γ及Th2细胞因子IL-4、IL-10产生的变化.方法:选取健康SD大鼠随机分为标准肠内营养(EN)组和免疫营养(EIN)组,制成烫伤动物模型(30%TBSAⅢ度烫伤模型),伤后早期分别给予标准肠内营养制剂(能全力)和肠内免疫营养制剂,于伤后1、4、7、10d取回肠Peyer's结,分离并体外培养Peyer's结淋巴细胞24h,检测Th1/Th2细胞因子分泌的变化.结果:烧伤后1d时两组IL-2、IFN-γ的表达明显上升(19.7±7.3vs92.6±21.3、97.6±25.4;63.7±27.3vs279.4±89.7、292.7±97.4;均P<0.01),EIN组两者分别在10d及4、7、10d时明显低于EN组(41.6±16.5vs55.9±14.4;96.7±31.2vs182.6±52.9,73.9±26.5vs129.9±48.9,71.6±26.9vs104.3±31.7;P<0.01或0.05);EIN组在4、7、10d时IL-4、IL-10表达高于EN组(169.3±57.7vs94.9±28.6,157.6±74.3vs65.2±32.4).提示EIN能促进Peyer's结淋巴细胞Th2细胞因子IL-4、IL-10的表达.结论:烫伤能引起Peyer's结内细胞细胞因子IL-2、IFN-γ的表达明显上升,肠内免疫营养支持通过促进Th2细胞因子的分泌纠正局部Th2向Th1漂移的免疫偏差,改善局部的体液免疫,有利于肠道免疫屏障的恢复和强化.