杉木转录组SSR挖掘及EST-SSR标记规模化开发

【目的】为解决杉木SSR标记数量不足、已开发的位点多态性较差等问题,以杉木转录组测序数据为基础,结合多重PCR技术批量挖掘SSR,规模化开发EST-SSR位点,为杉木分子遗传学研究奠定良好基础。【方法】杉木转录组序列数据（Accession：SRX151872）从NCBI的SRA数据库下载。利用CLC和CMi B软件批量挖掘SSR位点;利用四色荧光标记通用引物多重PCR（multiplex-PCR）技术实现SSR标记的规模化开发。【结果】杉木转录组de novo assembly序列拼接共得到35 633个contigs,总长度31.5 Mb,其中最小拼接长度155 bp,最大23 794 bp,平均长度884 bp。得到2 156个SSR位点,分布于1 822个contigs中,其中256个contigs中包含1个以上SSR位点,复合型SSR数量为118个,SSR平均分布密度为68.4个/Mb。不同SSR重复单元（motif）中,三核苷酸SSR重复单元数量最多,占总数的41.7%。批量引物设计得到1 582个有效位点的引物对,占SSR位点总数的73.4%。利用四色荧光标记通用引物多重PCR检测技术,对35个候选标记位点进行多态性检测,其中28个位点具有多态性,多态性位点比例达到80%,检测位点多态信息含量（PIC）平均值为0.573,表明所开发的EST-SSR位点具有很高的多态性。PCA分析结果表明,28个EST-SSR多态性位点具有很强的鉴别杉木不同地理种源,甚至同一种源不同单株的能力。【结论】将转录组SSRs挖掘和四色荧光标记通用引物多重PCR技术相结合,成功建立杉木EST-SSR高效开发流程和方法,得到较多高质量的EST-SSR标记位点,这些位点已用于后续杉木遗传多样性保护研究。与传统SSR标记位点开发技术相比较,转录组海量序列为高质量多态性位点的选择可提供充足的数据保证。四色荧光标记通用引物基因分型结果清晰、稳定可靠,不但试验成本仅为原来的10%-15%,而且结合多重PCR扩增技术,可使试验效率提高5-6倍。新方法的建立和应用不仅能促进杉木分子遗传学相关研究,而且对其他非模式生物或新物种SSR标记开发也具有重要的参考作用。

杉木叶绿体微卫星及其单倍型变异分析

杉木是我国南方重要的用材林树种,但其分子标记开发滞后于其他树种。文章利用种(属、科)间扩增法,从来源于黑松、日本柳杉等的21个叶绿体微卫星(SSR)位点中为杉木筛选适合的标记。结果表明:候选标记位点中有10个能够成功扩增,其中2个位点(CJCP1m_004和CJCP2m_002)具有多态性,其单倍型数量(A)分别为2和6,多样性指数(H)为0.233和0.733。多态性位点的单倍型序列分析结果表明,源于日本柳杉的CJCP2m_002在杉木中属高变异位点,其SSR重复单元类型为(AT)n··(T)n,不同于来源物种的重复单元类型(AT)n。筛选得到的叶绿体微卫星(SSR)标记在杉木分子遗传学研究中具有重要用途。

导致我国上市公司出现财务舞弊的因素分析

我国资本市场目前得到快速的发展,取得的成就备受瞩目,但是随之而来的上市公司中出现的财务舞弊现象是越来越严重,这不但对上市公司的健康发展造成伤害,同时对资本市场的资源配置运行带来了破坏,并且使上市公司的财务报告和由此而形成的审计报告都丧失了应有的风险预警的作用。在总结原有研究结论的基础之上分析现在我国上市公司的财务舞弊的动机,并提出相应治理建议,以期对我国的证劵市场中的财务舞弊现象起到遏制的作用。

古树名木保护管理存在的问题及对策

通过分析古树名木保护管理现状,总结出古树名木保护管理过程中存在的问题,提出了保护古树名木的保护与管理对策,为古树名木科学有效保护管理提供决策参考。

加快推进森林资源管理能力科学化与现代化

在本文中,探讨了森林资源管理能力科学化与现代化的推进,所采取的对策为健全森林砍伐与采集管理体系、创新森林资源砍伐与采集管理模式以及深化砍伐与采集管理改革试点工作目标。

我国企业会计改革之路分析

我国企业会计改革已经走过了30多个年头,经历了数次的改革之后,总结出的有关改革经验为:企业会计改革离不开我们国家经济的发展;企业会计改革一定要妥善解决好国际发展趋势以及与我们国家的关系;企业会计改革不是一蹴而就能完成的;企业会计改革程序与战略必须同真实现象紧密相连。未来我们国家企业会计改革应该努力完成好以下几点:时刻追踪国际的脚步;时刻注意非上市企业所采取的会计准则;分析和撰写企业成本核算方面的建议;提高与完善企业会计的监督管理;强化改革的力度;明确协调企业会计与其他方面的改革。

浅谈森林资源资产化管理与核算

森林资源的资产化起始于20世纪90年代,目前在森林资源的资产评估、资产抵押贷款林木资产管理和产权制度改革等方面发挥着重要作用,并取得了实质性的进展.基于此,对当前的森林资源资产化管理以及森林资源的核算问题进行综述,分析我国在森林资源的资产化评估过程中存在的问题,并提出相关的完善建议,同时探究森林资源资产化核算的方法、原则以及计量基础,以增强人们对于森林资源资产化的理解.

导致我国上市公司出现 财务舞弊的因素分析

近几年来,我国资本市场快速发展,取得很大成就,但是随之而来的是上市公司出现财务舞弊现象越来越严重,这一方面对上市公司的健康发展造成了极大伤害,另一方面对资本市场的资源配置运行带来了破坏,并且使上市公司的财务报告和由此而形成的审计报告都丧失了应有的风险预警作用。本文在总结原有研究结论的基础之上,分析我国上市公司财务舞弊的动机,并提出相应治理建议,以期对我国证劵市场中的财务舞弊现象起到遏制作用。

南方红豆杉4个微卫星位点等位基因变异分析

以南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)的4个微卫星位点为例,通过等位基因长度和序列变异分析,对各位点等位基因的变异特点、变异来源和进化关系进行研究。结果表明:这4个位点在南方红豆杉种内表现出丰富而复杂的变异特点,既有SSR重复区突变形成的等位基因,也有因侧翼序列插入/缺失(Indel)形成的等位基因,还存在同一长度形态的同形异源等位基因(allelic homoplasy),同时,在1个mt SSR位点中检测到了线粒体基因的异质性(heteroplasmy)。SSR重复序列和侧翼序列突变的共同作用是引起等位基因长度异常的主要原因。等位基因分布及其进化关系研究表明,4个位点的序列突变更符合逐步突变模型(SMM),常见等位基因在进化上具有原始性。

杉木荧光标记通用引物多重PCR微卫星基因分型技术的建立与应用

荧光标记通用引物基因分型技术以其经济、实用的特点在微卫星标记研究中得到了较多应用。但传统以M13为通用引物的方法存在非特异性扩增条带多、基因分型质量差等问题。为加快微卫星基因分型新技术的推广和应用,提高林木分子遗传学研究水平,本研究参照Blacket等的方法,并结合微卫星多重PCR(multiplex PCR)技术,成功建立了杉木(Cunninghamia lanceolata)荧光标记通用引物多重PCR微卫星基因分型技术体系。新方法的关键在于应用了4个具有较高退火温度的通用引物和QIAGEN誖Multiplex PCR试剂盒,它们能有效减少非特异性扩增条带的产生,多重PCR体系的优化简单、快捷。通常只需调整通用引物的浓度和PCR产物稀释倍数,就能获得清晰、稳定的基因分型结果。研究表明,新方法不仅大幅度降低了实验成本,而且显著提高了微卫星基因分型效率。利用该技术实现了杉木EST-SSR标记位点的规模化开发,并开展了杉木种子园育种材料遗传多样性研究。本研究新技术的建立和应用可为杉木分子遗传学研究提供技术保障,也对其他物种的相关研究具有重要的参考价值。

开发林区资源促进山区经济发展

开发林区资源促进山区经济发展广东省韶关市林业局我市是我国南方重点林区之一，“八山一水一分田”。全市总面积１８４．６万公顷，其中山地面积１３９．１万公顷，农村人均８亩，改革开放以来，特别是１９８５年广东省第一次山区工作会议以来，我市认真分析山区的优势，...