环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是快速检测食源性致病菌的常用方法。该文分别针对单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的特异性基因hlyA和nuc设计引物,通过优化反应条件,建立了一种可同时检测单增李斯特菌...环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是快速检测食源性致病菌的常用方法。该文分别针对单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的特异性基因hlyA和nuc设计引物,通过优化反应条件,建立了一种可同时检测单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的基于淬灭基团释放环介导等温扩增检测方法(detection of amplification by release of quenching-LAMP,DARQ-LAMP),并评估了该方法的特异性和灵敏度。结果表明该方法可在60 min内完成对单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的同时检测,检测限分别为7.3×10^(2)copies/mL和2.3×10^(2)copies/mL,特异性良好、灵敏度高,在实际样品检测中检测限为2.8×10^(4)CFU/mL和2.4×10^(4)CFU/mL。该双重DARQ-LAMP方法能同时检测2种食源性致病菌,缩短检测时间,提高了检测效率,为多重LAMP检测食源性致病菌的研究提供了新的思路。展开更多
文摘环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是快速检测食源性致病菌的常用方法。该文分别针对单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的特异性基因hlyA和nuc设计引物,通过优化反应条件,建立了一种可同时检测单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的基于淬灭基团释放环介导等温扩增检测方法(detection of amplification by release of quenching-LAMP,DARQ-LAMP),并评估了该方法的特异性和灵敏度。结果表明该方法可在60 min内完成对单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌的同时检测,检测限分别为7.3×10^(2)copies/mL和2.3×10^(2)copies/mL,特异性良好、灵敏度高,在实际样品检测中检测限为2.8×10^(4)CFU/mL和2.4×10^(4)CFU/mL。该双重DARQ-LAMP方法能同时检测2种食源性致病菌,缩短检测时间,提高了检测效率,为多重LAMP检测食源性致病菌的研究提供了新的思路。