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基于不同载体免疫原制备河豚毒素抗体的研究
被引量:
11
1
作者
刘燕婷
钟青萍
+3 位作者
雷红涛
张挺
余海虎
孙远明
《卫生研究》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期234-236,共3页
目的比较牛血清白蛋白(BSA)和匙孔型血蓝蛋白(KLH)两种载体蛋白合成的河豚毒素人工抗原的免疫原性,并对其制备的抗体进行研究。方法用曼尼希法将半抗原河豚毒素(TTX)分别与大分子载体BSA和KLH偶联合成人工抗原TTX-BSA及TTX-KLH...
目的比较牛血清白蛋白(BSA)和匙孔型血蓝蛋白(KLH)两种载体蛋白合成的河豚毒素人工抗原的免疫原性,并对其制备的抗体进行研究。方法用曼尼希法将半抗原河豚毒素(TTX)分别与大分子载体BSA和KLH偶联合成人工抗原TTX-BSA及TTX-KLH,免疫6~8周龄Balb/c雌性小鼠,制备多抗;以卵清白蛋白(OVA)为载体蛋白,同样用曼尼希法制备包被抗原TTX—OVA。TTX—KLH多抗血清同时采用TTX-OVA和TTX—BSA作包被抗原检测,抗血清经问接酶联免疫吸附法(iELISA)以及间接竞争酶联免疫吸附法icELISA)检测。结果经TTX-KLH免疫获得的多抗血清较TTX—BSA免疫获得的多抗血清特异性高。两种包被抗原的检测效价一致:均为1:64000,而以TTX—OVA为包被原的检测值稍高,与TTX进行竞争酶联免疫检测,其IC50值波动范围为10~20ng/ml。结论TTX—KLH具有更好的免疫原性。
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关键词
河豚毒素
载体
人工抗原
抗体
食品检测
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职称材料
抗副溶血弧菌IgY的提纯及检测副溶血弧菌的间接ELISA的建立
被引量:
7
2
作者
何彬斌
钟青萍
王斌
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期95-99,共5页
分离纯化抗副溶血弧菌IgY,并建立一种快速检测副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附法(indirect ELISA),分析了该方法的敏感性、特异性和重复性.将水稀释法、乙醇沉淀法和DEAE-Sepharose FF离子交换层析联用以分离纯化抗副溶血弧菌IgY,然后以...
分离纯化抗副溶血弧菌IgY,并建立一种快速检测副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附法(indirect ELISA),分析了该方法的敏感性、特异性和重复性.将水稀释法、乙醇沉淀法和DEAE-Sepharose FF离子交换层析联用以分离纯化抗副溶血弧菌IgY,然后以纯化的IgY为一抗,辣根过氧化物酶标兔抗鸡IgY为二抗,建立检测副溶血弧菌的间接ELISA方法.结果表明:建立的间接ELISA方法,一抗的最佳工作质量浓度为15μg/mL,二抗的最佳稀释度为1∶10 000,副溶血弧菌培养液的检出限为1.0×105cfu/mL,该方法对测定的其他8种菌株没有交叉反应.建立的间接ELISA方法具有良好的灵敏度、特异性和稳定性,能够快速、准确地对副溶血弧菌进行检测.
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关键词
鸡卵黄免疫球蛋白
间接ELISA
副溶血弧菌
检测
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职称材料
PCR技术快速检测痢疾志贺菌的研究
被引量:
5
3
作者
陈红远
钟青萍
+1 位作者
王丽
孙远明
《卫生研究》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期597-600,共4页
目的快速、准确检测食品中的痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)感染。方法针对痢疾志贺菌的侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)设计引物,通过对PCR扩增体系中dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度、酶用量、退火温度和循环数进行优化,建立痢疾志贺菌PC...
目的快速、准确检测食品中的痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)感染。方法针对痢疾志贺菌的侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)设计引物,通过对PCR扩增体系中dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度、酶用量、退火温度和循环数进行优化,建立痢疾志贺菌PCR快速检测方法,并对其特异性、敏感性进行分析。结果该方法检测的特异性好,痢疾志贺菌纯培养物和基因组DNA的灵敏度分别为1.06×102cfu/ml和106.34pg/PCR反应体系;直接检测模拟食品中的痢疾志贺菌,其检出限为3.21×104cfu/ml。结论该方法操作简单、检验周期短、特异性和灵敏度高,适用于快速、准确检测食品中致病菌的污染。
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关键词
痢疾志贺菌
PCR
侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)
快速检测
食品检测
原文传递
题名
基于不同载体免疫原制备河豚毒素抗体的研究
被引量:
11
1
作者
刘燕婷
钟青萍
雷红涛
张挺
余海虎
孙远明
机构
广东省高等学校食品质量安全重点开放实验室华南农业大学食品质量安全研究所
香港理工
大学
生物与应用化学系
出处
《卫生研究》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期234-236,共3页
文摘
目的比较牛血清白蛋白(BSA)和匙孔型血蓝蛋白(KLH)两种载体蛋白合成的河豚毒素人工抗原的免疫原性,并对其制备的抗体进行研究。方法用曼尼希法将半抗原河豚毒素(TTX)分别与大分子载体BSA和KLH偶联合成人工抗原TTX-BSA及TTX-KLH,免疫6~8周龄Balb/c雌性小鼠,制备多抗;以卵清白蛋白(OVA)为载体蛋白,同样用曼尼希法制备包被抗原TTX—OVA。TTX—KLH多抗血清同时采用TTX-OVA和TTX—BSA作包被抗原检测,抗血清经问接酶联免疫吸附法(iELISA)以及间接竞争酶联免疫吸附法icELISA)检测。结果经TTX-KLH免疫获得的多抗血清较TTX—BSA免疫获得的多抗血清特异性高。两种包被抗原的检测效价一致:均为1:64000,而以TTX—OVA为包被原的检测值稍高,与TTX进行竞争酶联免疫检测,其IC50值波动范围为10~20ng/ml。结论TTX—KLH具有更好的免疫原性。
关键词
河豚毒素
载体
人工抗原
抗体
食品检测
Keywords
tetrodotoxin, carrier, artificial antigen, antibody
分类号
R155.51 [医药卫生—营养与食品卫生学]
下载PDF
职称材料
题名
抗副溶血弧菌IgY的提纯及检测副溶血弧菌的间接ELISA的建立
被引量:
7
2
作者
何彬斌
钟青萍
王斌
机构
广东省高等学校食品质量安全重点开放实验室华南农业大学食品质量安全研究所
广州市
华南
农大生物药品有限公司
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期95-99,共5页
文摘
分离纯化抗副溶血弧菌IgY,并建立一种快速检测副溶血弧菌的间接酶联免疫吸附法(indirect ELISA),分析了该方法的敏感性、特异性和重复性.将水稀释法、乙醇沉淀法和DEAE-Sepharose FF离子交换层析联用以分离纯化抗副溶血弧菌IgY,然后以纯化的IgY为一抗,辣根过氧化物酶标兔抗鸡IgY为二抗,建立检测副溶血弧菌的间接ELISA方法.结果表明:建立的间接ELISA方法,一抗的最佳工作质量浓度为15μg/mL,二抗的最佳稀释度为1∶10 000,副溶血弧菌培养液的检出限为1.0×105cfu/mL,该方法对测定的其他8种菌株没有交叉反应.建立的间接ELISA方法具有良好的灵敏度、特异性和稳定性,能够快速、准确地对副溶血弧菌进行检测.
关键词
鸡卵黄免疫球蛋白
间接ELISA
副溶血弧菌
检测
Keywords
yolk immunoglobulin(IgY)
indirect ELISA
Vibrio parahaemololyticus
detection
分类号
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
下载PDF
职称材料
题名
PCR技术快速检测痢疾志贺菌的研究
被引量:
5
3
作者
陈红远
钟青萍
王丽
孙远明
机构
广东省
高等学校
食品质量
安全
重点
开放实验室
出处
《卫生研究》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期597-600,共4页
基金
广东省农业攻关重点专项(No2009A020101004)
文摘
目的快速、准确检测食品中的痢疾志贺菌(Shigella dysenteriae)感染。方法针对痢疾志贺菌的侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)设计引物,通过对PCR扩增体系中dNTP浓度、Mg2+浓度、引物浓度、酶用量、退火温度和循环数进行优化,建立痢疾志贺菌PCR快速检测方法,并对其特异性、敏感性进行分析。结果该方法检测的特异性好,痢疾志贺菌纯培养物和基因组DNA的灵敏度分别为1.06×102cfu/ml和106.34pg/PCR反应体系;直接检测模拟食品中的痢疾志贺菌,其检出限为3.21×104cfu/ml。结论该方法操作简单、检验周期短、特异性和灵敏度高,适用于快速、准确检测食品中致病菌的污染。
关键词
痢疾志贺菌
PCR
侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)
快速检测
食品检测
Keywords
Shigella dysenteriae
PCR
invasion plasmid antigen H(ipaH)
rapid detection
分类号
R155.51 [医药卫生—营养与食品卫生学]
TS207.4 [轻工技术与工程—食品科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于不同载体免疫原制备河豚毒素抗体的研究
刘燕婷
钟青萍
雷红涛
张挺
余海虎
孙远明
《卫生研究》
CAS
CSCD
北大核心
2008
11
下载PDF
职称材料
2
抗副溶血弧菌IgY的提纯及检测副溶血弧菌的间接ELISA的建立
何彬斌
钟青萍
王斌
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
7
下载PDF
职称材料
3
PCR技术快速检测痢疾志贺菌的研究
陈红远
钟青萍
王丽
孙远明
《卫生研究》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
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