一种氯霉素高灵敏消线法检测试纸条的制备

本文对氯霉素进行丁二酸酐衍生得到半抗原,将半抗原与载体蛋白BSA偶联作为免疫原,氯霉素与偶连载体蛋白OVA作为筛选抗原,获得氯霉素单克隆抗体,IC_(50)值为0.010 6 ng/mL,线性范围为0.002 3~0.049 5 ng/mL,特异性好,与相关药物没有交叉。在此抗原抗体的基础上制备胶体金试纸条,对鸡肉样本进行添加回收试验,消线法检测限为0.1 μg/kg,与目前市场上主流的比色法判读试纸条相比,消线法判读更加快速,不需要使用读数仪辅助判读,为农产品质量安全提供有力保障。

猪病毒性腹泻灭活疫苗对仔猪保护力研究

PEDV引起的产房仔猪腹泻是目前危害养猪业的主要三大传染病(ASF、PRRS、PED)之一,给养猪业造成巨大的经济损失。疫苗免疫仍然是防控PEDV的主要手段。为了提高疫苗的保护效果,本研究小组对PEDV疫苗在病毒含量、佐剂等方面进行了大幅改进,本文总结了改进后的疫苗免疫怀孕母猪,初生仔猪从母猪乳汁获得被动保护的研究结果,表明该疫苗为产房仔猪PED的防控提供了更有效的措施。

HPLC-UV法测定中兽药散剂中非法添加吗啉胍的方法研究

建立扶正解毒散、荆防解毒散、黄连解毒散、麻黄鱼腥草散、清瘟败毒散等中兽药散剂中违规添加吗啉胍的检测方法。样品经超纯水溶解、超声10 min,静置、过滤,取滤液进行高效液相色谱定量分析。结果发现吗啉胍在1.0~50.0μg/mL浓度范围内线性关系良好(R2=1.000);添加回收率为75.2%~115.3%,检测限为10 mg/kg,定量限为20 mg/kg。该方法操作简便,阴性样品无干扰,可用于上述5种中兽药散剂中非法添加吗啉胍的定量测定。

番鸭细小病毒VP3蛋白的原核表达及抗原性分析

为原核表达番鸭细小病毒(Muscovyduckparvovirus,MDPV)VP3蛋白,评价MDPVVP3蛋白在番鸭中的抗原性。将MDPVVP3基因按照大肠杆菌密码子偏嗜性优化后,克隆至原核表达载体pET-28a,经IPTG诱导表达和His镍柱纯化后,获得VP3纯化蛋白,并进行SDS-PAGE蛋白电泳和westernblots鉴定。通过透射电镜观察MDPVVP3蛋白在大肠杆菌中形成病毒样颗粒的情况,以纯化后的VP3蛋白免疫种番鸭,评价MDPVVP3蛋白的抗原性。结果显示,MDPVVP3蛋白可在大肠杆菌BL21(DE3)中以沉淀包涵体的形式高效表达,SDS-PAGE和Westernblots试验结果显示VP3目的条带大小为60kDa左右,与预期相符,纯化后VP3蛋白浓度为5.64mg/mL。通过透射电镜,可在VP3蛋白表达上清样品中观察到直径约为20nm的颗粒样物质,表明单独表达MDPVVP3蛋白可在大肠杆菌中自组装形成病毒样颗粒。将制备的VP3蛋白免疫种番鸭,利用间接ELISA试验检测番鸭血清中特异性抗体水平,免疫后14d,OD450值为0.75~0.90,表明制备的VP3蛋白抗原性良好。本试验在大肠杆菌中成功表达纯化MDPVVP3蛋白,具有良好的抗原性,具备研制MDPV亚单位疫苗的开发前景,本研究可为进一步评MDPVVP3蛋白的免疫保护效果提供前期基础。