长效化GLP-1类似物研究进展

糖尿病是一种严重的自身代谢紊乱性疾病。据WHO预测,到2025年全球糖尿病患者人数将达3亿,其中90%以上是2型糖尿病,2型糖尿病容易导致胰岛素缺乏和血糖过高[1]。胰高血糖素样肽-1（glucagon-like peptide 1,GLP-1）不仅可以刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌及胃排空来降低血糖；

重组人甲状旁腺激素1-34的纯化研究

重组人甲状旁腺激素(rhPTH(1-34))在工程菌pET(32a+)-PTH(1-34)/BL21(DE3)中以胞内可溶性融合蛋白形式高效表达。经过高压匀浆破菌处理,取上清经过亲和层析、酶切、阴离子交换层析、反相层析和阳离子交换层析进行分离纯化,得到rhPTH(1-34)原液样品纯度在98%以上,比活性达到1.05×104U/mg。

乳糖诱导重组人甲状旁腺素(1-34)高密度发酵研究

利用乳糖诱导工程菌pET(32a+)-PTH(1-34)/BL21(DE3)高效表达人甲状旁腺激素1-34融合蛋白。并对乳糖浓度、诱导温度、诱导时机等参数进行优化,得到目的蛋白高表达乳糖诱导高密度发酵工艺。三批实验结果表明,人甲状旁腺激素1-34融合蛋白表达量在33%左右,工程菌生物量在55 g/L左右。

紫外法测定重组人红细胞生成素(Fc)融合蛋白的含量

目的建立紫外法测定重组人红细胞生成素（Fc）融合蛋白（rh EPO-Fc）含量的方法。方法利用Edelhoch法测定rh EPO-Fc的摩尔消光系数,计算得到其溶液百分比消光系数,并测定rh EPO-Fc溶液A280值,依据公式c=A/ε计算rh EPO-Fc的含量。结果 rh EPO-Fc溶液百分比消光系数为1.3,在0.02∽1.28 mg/m L浓度范围内,测定含量结果偏差〈4%。结论该方法操作简便、专属性强、结果准确可靠,可用于rh EPO-Fc含量测定。

改良分光光度法测定rhEPO-Fc注射液中聚山梨酯20含量

目的研究建立改良的分光光度法测定重组人红细胞生成素(Fc)融合蛋白(rhEPO-Fc)注射液中聚山梨酯20含量的方法。方法供试品经与三氯甲烷、硫氰钴铵反应,并65℃水浴静置后,直接取样测定吸光度值。结果供试品的聚山梨酯20测定含量与添加量基本一致,回收率在95%～105%之间,RSD为2.71%。结论本法的优点系无需对样品进行反复抽提后离心分离、浓缩,操作简便、可靠。