复方贞术调脂方对HepG2细胞胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的观察复方贞术调脂方(FTZ)对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞的作用,为开拓FTZ的治疗范围,阐明FTZ调节糖脂代谢的机制提供实验依据。方法用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞使其产生胰岛素抵抗,用高、中、低3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测HepG2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞胰岛素信号PI-3Kp85 mRNA的表达,Western blot检测HepG2细胞胰岛素信号转导蛋白IRS1表达。结果模型细胞培养基上清液中葡萄糖含量高于正常细胞(P<0.05)。给予FTZ(1、25、100μg/mL)后,HepG2细胞培养基上清液中葡萄糖含量均低于模型细胞葡萄糖含量(P<0.05)。胰岛素抵抗细胞与正常细胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表达显著降低(P<0.05)。给予FTZ干预后,与胰岛素抵抗细胞相比PI-3Kp85 mRNA和IRS1的蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论FTZ可改善胰岛素抵抗HepG2细胞对葡萄糖的摄取。其改善胰岛素抵抗的作用机制之一可能是通过上调胰岛素信号PI-3Kp85 mRNA和IRS1蛋白质在胰岛素抵抗HepG2细胞的表达。

离子交换树脂纯化荷叶生物碱的研究

【目的】考察离子交换树脂纯化荷叶生物碱的工艺条件。【方法】以荷叶生物碱溶液为对象,以其主要有效成分荷叶碱为指标,研究阳离子交换树脂纯化荷叶生物碱的方法,包括树脂类型的选择、氨水浓度和乙醇浓度对洗脱效果的影响等。【结果】001×1强酸性阳离子交换树脂对荷叶生物碱成分的交换能力最强,且被树脂吸附的生物碱成分可用氨性乙醇溶液快速洗脱。验证试验结果表明:用含1.0 mol/L氨水的体积分数60%乙醇溶液进行洗脱,总固形物得率由过柱前的18.35%降低到过柱后的4.36%,荷叶生物碱的纯度约为632.8 mg/g,保留率达85.68%。【结论】001×1强酸性阳离子交换树脂对荷叶生物碱纯化效果好,生物碱含量高。

复方贞术调脂方对游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗HepG2细胞的作用

目的探讨复方贞术调脂方(FTZ)对游离脂肪酸(FFA)诱导的胰岛素抵抗Hep G2细胞NF-κBIRS1-GLUT4通路的影响,阐明FTZ缓解胰岛素抵抗的作用机制。方法采用FFA诱导Hep G2细胞使其产生胰岛素抵抗,3个剂量的FTZ干预后,葡萄糖氧化酶法检测Hep G2细胞培养液上清液中葡萄糖的含量,酶联免疫法检测Hep G2细胞培养液上清液中TNF-α、IL-6的含量,Western blot检测Hep G2细胞中NF-κB、IRS1、GLUT4蛋白表达,采用PDTC阻断NF-κB蛋白,测定其下游靶点IRS1的蛋白表达。结果FTZ可降低细胞上清液中葡萄糖、TNF-α、IL-6的含量,下调NF-κB的蛋白表达,上调IRS1和GLUT4的蛋白表达。阻断NF-κB之后,再加入FTZ,IRS1的蛋白表达量较未阻断时显著降低。结论 FTZ可改善FFA诱导的胰岛素抵抗,其作用机制可能是通过抑制NF-κB介导的IRS1-GLUT4通路来改善胰岛素抵抗。NF-κB是FTZ作用的关键靶点。