蟛蜞菊乙醇提取物促进黑色素生成及其机理的初步研究

目的观察中药蟛蜞菊乙醇提取物促进黑色素生成的作用,并初步探讨其作用机理。方法 MTT法、L-Dopa氧化法、NaOH裂解法探讨不同浓度蟛蜞菊乙醇提取物作用于小鼠恶性黑色素瘤细胞(B16)72 h后,对细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑色素含量的影响。RT-PCR检测药物作用前后酪氨酸酶、小眼相关转录因子(MITF)等基因表达的影响。结果与对照组比较,蟛蜞菊乙醇提取物能促进B16细胞的增殖,促进酪氨酸酶活性增加和黑色素生成增多;可剂量依赖性上调酪氨酸酶和MITF的mRNA表达。结论蟛蜞菊乙醇提取物可促进B16细胞黑色素生成,其机制可能是通过促进B16细胞增殖、增强酪氨酸酶和MITF的基因表达来实现。

蜂蜜对急性酒精中毒大鼠的解酒作用研究

目的:研究蜂蜜对急性酒精中毒SD大鼠的解酒作用及其对酒精代谢关键酶的影响。方法:用75%食用级无水乙醇按10m L/kg一次性灌胃法构建急性酒精中毒大鼠模型,以解酒护肝鼎久口服液为阳性药物对照,采用蜂蜜高、中、低3个浓度进行灌胃干预。以大鼠血清乙醇浓度、肝脏乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase,ADH)和乙醛脱氢酶(Acetaldehyde Dehydrogenase,ALDH)、胃ADH和ALDH为考察指标。结果:与模型组比较,蜂蜜低、中浓度组大鼠血清乙醇浓度均显著降低(P<0.05),蜂蜜高浓度组大鼠血清乙醇浓度极显著降低(P<0.01),蜂蜜中、高浓度组极显著提高大鼠肝ADH和胃ALDH活性(P<0.01),蜂蜜各浓度组可显著提高胃ADH和肝ALDH活性(P<0.05或P<0.01)。结论:蜂蜜能够通过提高肝脏和胃的ADH和ALDH活性从而显著降低大鼠血清乙醇浓度,具有明显的解酒作用。

传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎作用影响的比较

目的:比较传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎活性的影响。方法:以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7为实验对象,比较传统炮制及现代加工制品的抑菌及抗炎作用。结果:现代加工制品的抑菌抗炎作用优于传统炮制品。结论:现代加工工艺能够有效的保护罗仙子中抑菌及抗炎物质的活性。

趋化因子受体-4和乏氧诱导因子-1α双抑制对MCF-7细胞的影响

目的同时抑制乳腺癌细胞株表达的趋化因子受体-4(CXCR4)和乏氧诱导因子-1α(HIF-1α),并考察其对乳腺癌细胞株MCF-7的影响。方法应用RNA干扰策略,通过优化siRNA序列和改造U6启动子,构建能够在乳腺癌缺氧微环境特异性表达的增强型启动子5HRE-U6(△U6p),并能同步沉默CXCR4和HIF-1α双基因的siRNA重组腺病毒表达系统,再通过体外侵袭试验考察抑制作用的有效性。结果 Ad-HIF-1/αCXCR4-siRNA能够抑制MCF-7的侵袭,较单一抑制CXCR4效果更强。结论趋化因子受体-4和乏氧诱导因子-1α的双靶向抑制较单独抑制前者更有效,可能成为抑制其转移的新靶标。

过氧化氢对PC12细胞plk1基因表达的影响

目的观察过氧化氢对体外培养的PC12细胞plk1基因表达的影响。方法采用MTT法观察不同浓度过氧化氢对体外培养的PC12细胞作用6 h后,对PC12细胞存活率的影响;Western-blot检测不同浓度过氧化氢作用后,PC12细胞plk1基因蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,过氧化氢剂量依赖性降低PC12细胞的存活率,增强PC12细胞plk1基因蛋白的表达水平。结论过氧化氢降低PC12细胞的增殖活力,其机制可能是通过增强Plk1蛋白表达水平来实现。

红景天苷对高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的研究红景天苷对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)表型转分化的作用,明确其对胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ型表达的影响。方法细胞株HK-2在高糖环境下(27.5 mmol/L)培养24 h,加不同浓度红景天苷(1×10-8、1×10-6、1×10-4mol/L)继续培养48 h,用显微镜观察细胞形态改变,MTT法分析细胞的增殖,Western blot及qRT-PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞分泌蛋白TGF-β1和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白。结果红景天苷能明显减弱高糖诱导的α-SMA、胶原Ⅰ/Ⅲ型表达上调,恢复高糖诱导的E-cadherin表达下调。结论红景天苷具有阻止高糖诱导肾小管间质纤维化的作用,其作用机制可能与红景天苷抑制细胞分泌TGF-β1相关。