重组人表皮生长因子复方抗菌凝胶生物活性检测方法的建立

目的与方法通过探讨用MTT法检测重组人表皮生长因子(rhEGF)复方抗菌凝胶生物活性的试验参数,包括凝胶剂中卡波姆含量对测定的屏蔽作用、不同试剂对卡波姆组分屏蔽作用的解除、抗菌成分磺胺嘧啶银浓度以及EGF含量对复方凝胶检测方法的影响作用等,建立一套适合用于EGF复方抗菌凝胶剂生物活性的检测方法。结果优选出的最佳条件:EGF质量分数为20μg/g,卡波姆质量分数为1.0%,用尿素+PBS+甘氨酸作屏蔽剂,磺胺嘧啶分数浓度为0.5%～2.0%。结论本文方法可快速准确地对EGF复方凝胶活性进行检测,从而为复方凝胶剂的开发提供条件。

烧伤患者红细胞免疫功能的变化

目的 了解烧伤患者红细胞免疫功能的变化及其特点。方法 采用酵母花环试验测定了 5 2例烧伤患者及 40例健康体检者RBC C3 bRR和RBC ICR这两项红细胞免疫功能的主要指标。结果 严重烧伤患者RBC C3 bRR较对照组明显降低 ,而RBC ICR则明显升高。从而表明在烧伤患者体内 ,红细胞的免疫粘附功能低下。结论 在对烧伤的临床治疗过程中 ,我们不仅要调节白细胞免疫系统的功能 ,改善患者红细胞免疫功能也是十分必要的。

甲亢患者IgG特异性激活补体类循环免疫复合物的研究

目的 探讨甲状腺机能亢进 (Gravesdisease,GD)患者IgG特异性激活补体类循环免疫复合物 (IgG/C3 -TCIC)的存在状况及其病理生理意义。方法 采用捕捉法ELISA以羊IgG抗人C3 为包被抗体 ,HRP -羊抗人IgG为检测抗体 ,检测了 2 19例GD患者和 10 5例健康人血清中IgG/C3 -TCIC ;按不同年龄、性别、血清Ig、C3 、T3 、T4、FT3 、FT4、TG和TM水平正常与否 ,比较其阳性率 ;并分析其与血清总、游离、复合Ig与C3 的相关性。结果 GD患者血清中IgG/C3 -TCIC含量和阳性率显著高于正常对照组 (P <0 0 1,0 0 0 1) ;其阳性率与年龄、性别及血清甲状腺激素水平无关 ,仅在血清IgA水平升高组显著高于IgA正常组 (P <0 0 5 ) ;患者IgG/C3 -TCIC仅与复合IgM呈正相关 (r=0 1732 ,P <0 0 5 ) ,而正常对照IgG/C3 -TCIC与总游离IgM及复合C3 呈正相关 (r =0 4 96 8,0 4 731,0 2 113;P<0 0 0 1,0 0 0 1,0 0 5 )。结论 GD患者存在特异性免疫功能紊乱。Ig类型转换于该类TCIC的形成具有重要的调节作用。并提出深入研究其机理 。

1,2,4-三氯苯对3种海洋微藻的毒性效应

1,2,4-三氯苯(1,2种,4-TCB)是环境中普遍存在的持久性有机污染物之一,而1,2,4-TCB对藻类的毒性作用报道很少。以1,2,4-TCB处理后,3种海洋微藻(金藻Isochrysis Zhanjiangensis、角毛藻Platymonas Subcordiformis和扁藻Chaetoceros miielleri)的生长状况、蛋白质质量分数和叶绿素质量分数的改变来检测1,2,4-TCB对海洋微藻的毒性效应。结果表明:1,2,4-TCB对3种海洋微藻的生长均有一定的抑制作用,该效应表现出一定的浓度和时间依赖性;1,2,4-TCB处理4d后,3种海洋微藻细胞蛋白质质量分数和叶绿素质量分数下降,呈现一定的浓度—效应关系,这表明1,2,4-TCB对3种海洋微藻产生毒害效应,其作用机制可能与藻类光合作用功能降低和蛋白质功能受损有关。1,2,4-TCB在一定程度上降低了藻类饵料的利用价值,而且对食物链下游生物具有潜在的危害性。

ConA诱导小鼠脾淋巴细胞上清对下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的：探讨免疫对神经内分泌系统的上行调节通路。方法：采用ＣｏｎＡ诱导淋巴细胞培养上清液给小鼠腹腔注射，测定不同时间（０５，１，２，４，６ｈ）的小鼠血浆中ＣＲＨ，ＡＣＴＨ，皮质酮（ＣＯＲＴ）产生的动力学，同时在体外用ＣｏｎＡ诱导上清液分别与下丘脑，垂体，肾上腺组织共同培养后观察ＣＲＨ，ＡＣＴＨ，ＣＯＲＴ分泌情况。结果：在体内ＣｏｎＡ诱导上清可在２ｈ内明显促进ＣＲＨ，ＡＣＴＨ和ＣＯＲＴ的产生（Ｐ＜００５）。体外培养６ｈ可明显增加ＣＲＨ分泌，１６ｈ时ＡＣＴＨ和ＣＯＲＴ明显增加（Ｐ＜００５）。结论：ＣｏｎＡ诱导上清可在下丘脑－垂体－肾上腺轴（ＨＰＡＡ）三个不同的层次上进行调节。

GWe对兔疫应答过程中抗体产生及IL-1活性的影响

研究了GWe对HRBC免疫后的功能调节作用。在连续给中药GWe的基础上，采用HRBC免疫普通小鼠，选择免疫后不同时间：1，3，5，7，9，11天，用QHS及血凝效价测定方法检测小鼠血浆Ab的动态变化，Ab产生峰值在第5天，GWe组与对照组相比差异有显著性。同时又检测了免疫不同时间的ConA诱导脾细胞上清中IL-1活性的变化，结果表明IL-1活性变化峰值在第5天，GWe组与正常对照组比较差异有非常显著性（P＜0．01）。研究结果提示GWe不仅能提高Ab产生，亦可促进IL-1的产生。

一种特异性检测Id／Aid—ICELISA方法的建立

本文成功地建立了一种检测只血清中Ｉｄ／Ａｉｄ－ＩＣ的Ｉｇ类捕捉法ＥＬＩＳＡ。经证实该法特异性高，重复性亦较好。该ＥＬＩＳＡ法的建立为进一步探讨机体内Ｉｄ／Ａｉｄ－ＩＣ的免疫学意义奠定了基础。

人胚胎干细胞体外培养及特性分析

目的探讨人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)的体外培养及其特性。方法 hESCs接种于饲养层细胞,培养液为含20%Knockout SR的Knockout DMEM,其中添加10 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),通过观察细胞形态、免疫细胞化学技术分析hESCs表面标志分子SSEA-3、SSEA-4、SSEA-1和TRA-1-60的表达,鉴定hESCs的未分化状态;G显带技术分析细胞染色体核型。同时,通过分析hESCs体外形成胚胎体、体内生成畸胎瘤的情况,鉴定hESCs的分化潜能。结果 hESCs在饲养层细胞上呈克隆生长,细胞为二倍体核型。hESCs表达SSEA-3、SSEA-4、以及TRA-1-60细胞表面特征性标志。体内、外分化实验证实hESCs具备多分化潜能。结论 hESCs在体外培养条件下能够保持未分化状态和发育的全能性,为进一步探索hESCs的诱导分化,以及hESCs的应用研究提供可行性保证。

重组人表皮生长因子复方抗菌凝胶的研制

目的研制既具有促组织修复作用又具有抗感染作用的重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)磺胺嘧啶银复方凝胶剂。方法以卡泊姆为水溶性凝胶基质,rhEGF为促组织修复成分,磺胺嘧啶银(SD-Ag)为抗菌成分,制备复方rhEGF抗菌凝胶剂。采用改良MTT法检测EGF生物活性,改良佛尔哈德法检测磺胺嘧啶银含量,并进行稳定性试验。结果与结论复方rhEGF抗菌凝胶剂制备工艺简单,质量可靠,使用方便,初步稳定性考察符合规定,符合凝胶剂的质量要求。

免疫过程中小鼠脾细胞ACTH受体表达的动态变化

通过测定在免疫应答过程中脾细胞ACTH受体的变化 ,以探讨神经内分泌系统与免疫系统的相互关系。用HRBC免疫小鼠 ,采用放射配体法测定ACTH受体 ,用饱和曲线与Scatchard作图进行分析 ,结果显示小鼠脾细胞上存在ACTH受体 ,在免疫应答过程中第 7天达高峰 (P <0 0 5 ) ,并与血浆ACTH含量密切相关 (r =0 77)。

白桑椹对老年大鼠的抗老化与降脂作用研究

研究了白桑椹对老年大鼠的抗老化与降脂作用。将老年大鼠分成3组:对照组、10%白桑椹果汁组和10%白桑椹果组。各组饲养8周后,将大鼠的血清和血液用于各项指标的测定。同时,设置正常(非老年)组作比较。结果表明,与正常组比较,老年大鼠的红细胞各项抗氧化酶活性降低,脂质过氧化水平提高,抗动脉硬化指数降低。与老年对照组相比,白桑椹果汁和白桑椹果组大鼠的红细胞抗氧化酶SOD、GSH-Px、膜结合酶(Na+-K+-ATP)酶活性以及高密度脂蛋白胆固醇均被提高;膜脂流动性得到改善;桑椹组的血清和红细胞膜中脂质过氧化产物MDA含量和血液总胆固醇含量降低;抗动脉硬化指数与对照组相比显著升高(P<0.05)。表明白桑椹果与其果汁具有一定的抗老化、降脂和抗动脉硬化的效果。

转化生长因子-β参与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞诱导的发育研究进展

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）足一类具有免疫调节功能的淋巴细胞，在维持机体免疫耐受和免疫应答稳态方面发挥重要作用。转化生长因子β（TGF—β）与CD4^＋CD25^＋Treg的发育分化和功能有着密不可分的关系，虽然作用机理尚不完全明了，但其重要性毋情置疑。

体外直接诱导人胚胎干细胞向神经细胞分化的研究

目的探讨体外直接诱导HSF6人胚胎干细胞(humanem bryonic stem cells,hESCs)分化为神经细胞的方法。方法采用直接的方法,在1%血清培养条件下,顺序添加bFGF、RA和Forskolin,诱导HSF6人ESCs分化为神经细胞。结果细胞发生神经样形态学改变,免疫荧光细胞化学分析结果显示,分化细胞表达神经干细胞特异性标志分子——巢蛋白(nestin),以及神经元标志分子——β微管蛋白Ⅲ(neuron-specific class Ⅲ beta-tubulin,TuJ1)。实验组nestin阳性细胞数占(95.2±3.03)%,明显高于未添加诱导因子组的(31.6±4.93)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究直接诱导hESCs分化为神经细胞,减少了常规经胚胎体(embryoid body,EB)的诱导方法而产生其它胚层细胞的机会,为进一步探索hESCs源性神经细胞的功能,以及为细胞替代治疗提供高纯度的hESCs源性神经细胞奠定了基础。