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靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR^(262-328)的构建及免疫原性分析
被引量:
2
1
作者
赵林
吴梅芝
+2 位作者
陈展歌
李黄金
周联
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期647-651,共5页
目的构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性。方法采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。目的蛋白经IPTG...
目的构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性。方法采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性。结果获得了2 031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95%以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1∶16 000以上的抗体滴度。结论成功制备了肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328。
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关键词
EGFR
二聚化界面
肿瘤疫苗
P64k
免疫原性
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职称材料
EGFR二聚化B细胞表位抗原肽基因克隆、表达与纯化
被引量:
1
2
作者
朱磊
吴梅芝
+3 位作者
赵林
黄绮玲
梁梅
李黄金
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期918-920,共3页
目的利用基因工程手段建立表皮生长因子受体(EGFR)二聚化B细胞表位抗原肽MVF-ER的高效制备方法。方法采用重叠延伸PCR扩增MVF-ER后克隆于表达载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,产物采用肠激酶酶切和镍离子螯合亲和层析法纯化。...
目的利用基因工程手段建立表皮生长因子受体(EGFR)二聚化B细胞表位抗原肽MVF-ER的高效制备方法。方法采用重叠延伸PCR扩增MVF-ER后克隆于表达载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,产物采用肠激酶酶切和镍离子螯合亲和层析法纯化。结果通过10对引物5步重叠延伸得到273 bp的扩增产物,目的基因与硫氧环蛋白(Trx)融合后可高效表达,经酶切和层析后得到纯度为95%的抗原肽。结论成功建立抗原肽"MVF-ER"的高效制备方法,为进一步研究EGFR过表达恶性肿瘤的治疗性疫苗打下了坚实基础。
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关键词
表皮生长因子受体
二聚化
B细胞表位
抗原肽
高效制备
下载PDF
职称材料
头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因研究
被引量:
8
3
作者
杨宏伟
侯玲俐
+5 位作者
吕军
张吉才
陶建蜀
陈武
高波
余宗涛
《中华医院感染学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第20期3092-3095,共4页
目的了解十堰地区鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因存在状况,揭示多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法回顾性分析2009年鲍氏不动杆菌的耐药率,PCR检测20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因。结果 2009年分离到鲍氏不...
目的了解十堰地区鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因存在状况,揭示多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法回顾性分析2009年鲍氏不动杆菌的耐药率,PCR检测20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因。结果 2009年分离到鲍氏不动杆菌205株,除头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在18.0%,黏菌素全部敏感之外,对其他抗菌药物的耐药率均约90.0%;20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌通过PCR检出blaTEM、blaPER、blaVEB、blaCARB、blaGIM、blaDHA;未检出blaSHV、blaOXA、blaGES、blaSPM、blaVIM、blaIMP、oprD2基因。结论目前分离株对黏菌素全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感性相对较高,对其他抗菌药物的敏感性较低,多药耐药鲍氏不动杆菌携带多种β-内酰胺酶基因,临床应根据药敏结果合理使用抗菌药物。
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关键词
医院感染
鲍氏不动杆菌
多药耐药
耐药基因
原文传递
题名
靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR^(262-328)的构建及免疫原性分析
被引量:
2
1
作者
赵林
吴梅芝
陈展歌
李黄金
周联
机构
广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系
广州中医药大学临床药理研究所免疫研究室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第6期647-651,共5页
基金
国家自然科学基金(81273423)
广东省科技计划项目(2011B080701004)
文摘
目的构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性。方法采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性。结果获得了2 031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95%以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1∶16 000以上的抗体滴度。结论成功制备了肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328。
关键词
EGFR
二聚化界面
肿瘤疫苗
P64k
免疫原性
Keywords
EGFR
dimerization interface
tumor vaccine
P64k
immunogenicity
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
EGFR二聚化B细胞表位抗原肽基因克隆、表达与纯化
被引量:
1
2
作者
朱磊
吴梅芝
赵林
黄绮玲
梁梅
李黄金
机构
广东药学院生命科学与生物制药学院生物技术系
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第10期918-920,共3页
基金
广东省科技计划项目(2011B080701004)
文摘
目的利用基因工程手段建立表皮生长因子受体(EGFR)二聚化B细胞表位抗原肽MVF-ER的高效制备方法。方法采用重叠延伸PCR扩增MVF-ER后克隆于表达载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,产物采用肠激酶酶切和镍离子螯合亲和层析法纯化。结果通过10对引物5步重叠延伸得到273 bp的扩增产物,目的基因与硫氧环蛋白(Trx)融合后可高效表达,经酶切和层析后得到纯度为95%的抗原肽。结论成功建立抗原肽"MVF-ER"的高效制备方法,为进一步研究EGFR过表达恶性肿瘤的治疗性疫苗打下了坚实基础。
关键词
表皮生长因子受体
二聚化
B细胞表位
抗原肽
高效制备
Keywords
EGFR
Dimerization
B cell epitope
Antigen peptide
High performance preparation
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因研究
被引量:
8
3
作者
杨宏伟
侯玲俐
吕军
张吉才
陶建蜀
陈武
高波
余宗涛
机构
郧阳医
学院
附属太和医院检验部
贵阳医
学院
检验
系
广东
药学院
生物技术
系
出处
《中华医院感染学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第20期3092-3095,共4页
文摘
目的了解十堰地区鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因存在状况,揭示多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法回顾性分析2009年鲍氏不动杆菌的耐药率,PCR检测20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因。结果 2009年分离到鲍氏不动杆菌205株,除头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在18.0%,黏菌素全部敏感之外,对其他抗菌药物的耐药率均约90.0%;20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌通过PCR检出blaTEM、blaPER、blaVEB、blaCARB、blaGIM、blaDHA;未检出blaSHV、blaOXA、blaGES、blaSPM、blaVIM、blaIMP、oprD2基因。结论目前分离株对黏菌素全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感性相对较高,对其他抗菌药物的敏感性较低,多药耐药鲍氏不动杆菌携带多种β-内酰胺酶基因,临床应根据药敏结果合理使用抗菌药物。
关键词
医院感染
鲍氏不动杆菌
多药耐药
耐药基因
Keywords
Nosocomial infection
Acinetobacter baumannii
Multi-drug resistance
Drug resistant genes
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR^(262-328)的构建及免疫原性分析
赵林
吴梅芝
陈展歌
李黄金
周联
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
下载PDF
职称材料
2
EGFR二聚化B细胞表位抗原肽基因克隆、表达与纯化
朱磊
吴梅芝
赵林
黄绮玲
梁梅
李黄金
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
下载PDF
职称材料
3
头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因研究
杨宏伟
侯玲俐
吕军
张吉才
陶建蜀
陈武
高波
余宗涛
《中华医院感染学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
8
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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