类凝血酶Agacutin的质量标准的研究

为研究止血活性的Agacutin的质量标准,通过鉴别试验、人血浆和牛纤原凝结活性、HPLC、SDS-PAGE、鲎试剂和其它体内试验等方法,研究了Agacutin的酶活性,纯度,分子量,内毒素,异常毒性,过敏试验和出血毒性等质量标准指标。结果显示,HPLC法纯度平均为98%,SDS-PAGE电泳显示了异二聚体和31733±1157 Da的全分子量。1单位酶的人血浆和牛纤原凝结时间为60±20 s和188±20 s.0.25 KU的异常毒性和过敏剂量、0.2 KU/0.2 ml出血毒测试、低于10 EU/KU内毒素的热源测试、磷脂酶A、L一氨基酸氧化酶和磷酸酶活性等显示了阴性反应。根据实验结果,初步确定了Agacutin的质量指标:正相HPLC纯度≥95%,SDS-PAGE为异二聚体和全分子量31±2 kDa,1单位酶的人血浆和牛纤原凝结时间为60±20 s和188±20 s,内毒素<10 EU/KU,异常毒性和致敏剂量为0.25单位,出血毒剂量0.2单位/0.2 ml.