基于近红外光谱的陈皮炮制品快速质量评价研究

目的 基于近红外光谱技术建立陈皮定性判别模型和含量预测模型,用于评价陈皮及其炮制品的质量。方法 采用有监督识别方法及无监督识别方法对陈皮生品及制品进行定性判别。采用高效液相色谱法测定陈皮生品和制品中5种化学成分的质量分数,结合近红外技术建立各成分的偏最小二乘定量校正模型。结果 近红外光谱技术可以将陈皮生品与制品进行有效分开,5-羟甲基糠醛、川陈皮素和芸香柚皮苷含量预测效果良好。结论 基于近红外技术对陈皮生品及制品定性鉴别和含量预测的方法具有快速、高效、无污染等优点,为陈皮及其炮制品质量控制和临床应用提供参考。

基于近红外光谱的佛手及其炮制品快速质量分析研究

目的基于近红外光谱结合化学计量学快速判别佛手生、制品并对内在成分含量进行预测,为佛手饮片质量控制提供依据。方法利用高效液相色谱法测定佛手饮片中莨菪亭、橙皮苷、6,7-二甲氧基香豆素、白当归素、5,7-二甲氧基香豆素、佛手柑内酯含量,利用近红外光谱采集样品光谱信息,结合化学计量学方法建立佛手生、制品定性和定量模型,快速判别佛手生、制品和预测成分含量。结果近红外技术偏最小二乘法-判别分析对佛手及其炮制品的分类鉴别达到100%正判率;对含量测定的6种成分中的3种(莨菪亭、5,7-二甲氧基香豆素、白当归素)的含量预测精度高,其中莨菪亭定量模型的决定系数(R2)为0.8951,校正均方根误差(RMSEC)为0.0320,预测均方根误差(RMSEP)为0.0175,验证集R2为0.8463,交叉验证均方根误差(RMSECV)为0.0541;5,7-二甲氧基香豆素定量模型的R2为0.9080,RMSEC为0.0242,验证集R2为0.7937,RMSEP为0.0446,RMSECV为0.0387;白当归素定量模型R2为0.9184,RMSEC为0.0276,验证集R2为0.7714,RMSEP为0.0275,RMSECV为0.0404。结论基于近红外光谱技术对佛手及其炮制品的鉴别和含量预测的方法具有可操作性,且简单快速,对样品无损害。为佛手及其炮制品质量控制和临床应用提供参考。

基于主成分分析的不同产地茺蔚子质量评价研究

目的采用主成分分析法对不同产地茺蔚子的质量进行评价研究。方法以不同产地茺蔚子的水分、灰分、盐酸水苏碱质量分数以及色差值为考察指标,运用主成分分析法对数据进行分析和评价。结果不同产地的茺蔚子在水分、灰分、盐酸水苏碱质量分数以及色差值上有明显差异,经SPSS统计分析软件分析得2个主成分,其累计方差贡献率达79.52%。第1个主成分的方差贡献率为51.52%,故确定其所对应的盐酸水苏碱质量分数以及色差值为判断不同产地茺蔚子药材质量的重要性因素。经簇类独立软模式法(SIMCA-P)分析将19个茺蔚子样品基本按地域性聚为3类。结论利用主成分分析法可以对不同产地的茺蔚子进行区分,并且能结合水分、灰分、有效成分质量分数、传统颜色鉴别进行全面、真实的质量评价研究,评价具有合理性以及客观性。

基于主成分分析和聚类分析法的栀子炭质量评价研究

目的探讨不同炮制程度栀子炭(生品、轻炭、标炭、重炭)的质量评价标准。方法以干栀子及不同炮制程度的3类栀子炭的鞣质质量分数、吸附力、p H值和电导率为特征变量,运用主成分和聚类分析法评价栀子炭质量。结果干栀子及各栀子炭的4个特征变量值变化有一定的规律性,随着炮制程度的加深,吸附力随着炮制程度的变化而变化,鞣质质量分数和电导率先升后降呈抛物线变化,p H值逐渐升高。主成分与聚类分析结果一致,都将干栀子与各栀子炭品聚成4类。结论运用主成分与聚类分析法评价栀子炭质量,具有可靠性,可为评价中药栀子炭质量提供借鉴。

广东紫荆皮的质量标准研究及其易混品辨析

目的研究广东紫荆皮的质量标准。方法采用2015年版《中国药典》中方法对广东紫荆皮药材中的水分、灰分及浸出物进行了测定,对广东紫荆皮药材薄层鉴别的条件及指标成分的质量分数测定条件进行了优化。结果测得广东紫荆皮药材中水分不得超过15.5%,总灰分不得超过9.24%,70%(体积分数)乙醇热浸出物不得少于27.5%;以羽扇豆醇、没食子酸为对照品的薄层鉴别斑点清晰、分离度好。羽扇豆醇的质量分数测定在0.216 0~10.80μg内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为96.9%(RSD=2.1%,n=6),样品平均质量分数为12.40 mg/g;而其混淆品未检出此成分。结论本方法简便、专属性强、重复性好,能区分广东紫荆皮及其混淆品,为评价广东紫荆皮药材的质量标准提供科学依据。

基于图像处理技术的莪术和醋莪术快速质量分析研究

目的:基于图像处理技术和机器学习方法建立莪术与醋莪术颜色判别模型,并与成分含量进行相关性分析。方法:采用HPLC法测定莪术与醋莪术饮片中6个成分的含量,采集饮片图像并通过图像处理技术提取饮片RGB、HSV及L^(*)a^(*)b^(*),采用LDA、PLS-DA和SVM等方法对颜色信息进行机器学习,对莪术和醋莪术进行分类判别;利用Pearson相关性分析研究颜色特征值与化学成分含量间的相关性。结果:LDA、PLS-DA、SVM判别模型分类鉴别具有较高的预测精度和较小的预估错误率;莪术和醋莪术中成分含量与颜色特征值存在一定的相关性。结论:基于图像处理技术结合机器学习实现了对莪术和醋莪术的快速质量分析,该方法具有操作简单,高效准确的特点,为莪术饮片的质量控制和炮制程度的判断提供了参考。

中药黄芩对多重耐药哈维弧菌耐药性的逆转作用

目的研究中药黄芩对多重耐药哈维弧菌的耐药逆转作用并初步探讨其作用机理。方法以耐阿莫西林、呋喃唑酮和红霉素的哈维弧菌X12XC30为实验对象,用倍比稀释法测定黄芩对菌株X12XC30的亚抑菌浓度;以SDS为对照,采用影印培养法测定黄芩作用24 h和48 h的耐药逆转率;通过质粒凝胶电泳观察黄芩对该菌株质粒的消除情况。结果黄芩对阿莫西林和呋喃唑酮的总逆转率为3.00%(24h)和4.33%(48 h);SDS对阿莫西林和呋喃唑酮的总逆转率为0.33%(24 h)和1.33%(48 h)。结论黄芩对多重耐药哈维弧菌有耐药逆转作用。

运用主成分分析与聚类分析法评价不同炮制程度槐米炭的质量

目的对不同炮制程度的槐米炭(生品、轻炭、标炭、重炭)进行质量评价。方法测定不同炮制程度槐米样品的色素吸附力、鞣质质量分数、pH值及电导率,以这4个因素为质量控制指标,运用主成分分析与聚类分析法对40批槐米不同程度炮制品进行分析比较。结果不同炮制程度的槐米的色素吸附力、鞣质质量分数、pH值及电导率具有明显的差异,这4个指标具有一定的变化规律,随着炮制程度的加深,色素吸附力和鞣质质量分数呈先上升后下降的趋势,pH值呈上升的趋势,而电导率的趋势与p H的正好相反;主成分分析和聚类分析结果均表明,不同炮制程度槐米炭可聚为4类。结论运用主成分分析和聚类分析对不同炮制程度槐米进行评价,方法简单,可为槐米炭的质量控制提供科学依据。

广西莪术药材商品质量分级标准研究

目的:确定广西莪术药材商品质量分级标准。方法:对广西莪术长度、直径、个重、色度值L^(*)、a^(*)、b^(*)等外观性状指标及浸出物、挥发油、吸光度等内在指标进行测定,采用HPLC法对莪术醇、吉马酮、呋喃二烯、β-榄香烯等成分含量进行测定;采用SPSS 24.0软件对所测数据进行相关性分析,采用SIMCA-P 14.1软件对实验所建立的分级标准进行验证。结果:以直径、个重、色度值a^(*)及浸出物、莪术醇、吉马酮、呋喃二烯、β-榄香烯含量作为主要指标所建立的质量分级标准可将广西莪术药材分为3个等级。结论:该质量分级标准科学合理可行,可为广西莪术质量评价与实现其优质优价提供参考。

基于谱效关系筛选橘核抗氧化活性质量标志物

目的:基于谱效关系研究橘核抗氧化活性成分,筛选抗氧化活性质量标志物。方法:采用HPLC法建立21批橘核指纹图谱,采用主成分分析研究导致不同产地橘核质量差异的成分。以DPPH自由基清除率测定橘核抗氧化能力,通过Pearson相关性系数和灰色关联度进行谱效相关分析,并对筛选的活性成分进行药效验证,再采用UPLC-Q-Exactive/MS法测定药效活性成分含量。结果:建立的HPLC指纹图谱确定了16个共有峰,指认出橙皮苷、柚皮苷、柠檬苦素、诺米林、黄柏酮5个成分。通过谱效关系分析筛选出15个成分可能具有抗氧化活性。活性成分验证结果显示橙皮苷和柚皮苷具有抗氧化活性且呈一定浓度依赖性。含量测定结果显示在抗氧化活性高的样品中橙皮苷、柚皮苷含量较高。结论:该研究可阐明橘核抗氧化作用的物质基础,为橘核质量控制与评价提供一定依据。

安息香的化学成分研究

目的:研究安息香的化学成分。方法:采用薄层层析硅胶柱、RP-18反向硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱、半制备高效液相柱对安息香的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果:从安息香中分离得到6个香脂酸类化合物,分别鉴定为Bis(2-ethylhexyl)phthalate(1)、1-O-methy-guaiacylglycerol(2)、Threo-5-hydroxy-3,7-dimethoxyphenylpropane-8,9-diol(3)、苯甲酸(4)、香草酸(5)、香草醛(6)。结论:化合物1、2、3为首次从安息香中分离得到,该研究为安息香质量评价奠定了一定基础。

基于机器视觉系统佛手炮制前后的判别及颜色-成分相关性分析

目的 基于机器视觉系统探讨佛手炮制前后颜色判别及颜色-成分质量分数相关性,为佛手饮片质量控制提供依据。方法 利用高效液相色谱(HPLC)法测定佛手与蒸佛手饮片中橙皮苷、6,7-二甲氧基香豆素、莨菪亭3种成分的质量分数;采用机器视觉技术获得饮片图像并提取饮片RGB、L*a*b*、HSV 3个不同颜色空间的颜色特征,采用线性判别分析(LDA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)和支持向量机(SVM)等机器学习方法对佛手炮制前后建立定性判别模型,利用Pearson相关性分析研究颜色特征值与测得的3种成分质量分数间的相关性。结果LDA、PLS-DA、SVM判别模型分类鉴别具有较高的预测精度和较低的预估错误率;佛手和蒸佛手中成分质量分数与颜色特征值间存在一定的相关性。结论 基于机器视觉系统对佛手炮制前后的判别效果良好,且该方法操作简单、高效准确,可为佛手及其炮制品的质量控制和临床应用提供参考。

左金丸血清药物化学研究

目的:对左金丸血清药物化学进行初步研究,通过分析入血成分探讨左金丸在大鼠体内的药效物质基础。方法:通过比较左金丸水煎液、口服左金丸及单味生药大鼠血清和空白血清HPLC图谱,初步鉴定左金丸在大鼠血清中的移行成分。结果:口服左金丸水煎液后在大鼠血清中发现14个入血成分,其中5个为原型成分,9个为代谢产物。结论:该研究建立的方法可用于左金丸水煎液血清指纹图谱和药效物质基础研究。

干姜及其炮制品色差值与活性成分含量的相关性研究

目的:评价干姜及其炮制品色差值与活性成分含量的相关性。方法:采用高效液相色谱法测定6种活性成分的含量,采用色彩色差计测定干姜及其炮制品的色差值[明度(L^*)、红绿色轴分量(a^*)、黄蓝色轴分量(b^*)]。采用SPSS 24.0软件对色差值与活性成分含量进行相关性分析。结果:姜酮、6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇和10-姜酚检测质量浓度的线性范围分别为2.65~105.90、10.15~406.00、4.87~194.80、5.28~211.20、6.14~245.70、7.02~280.80μg/mL(r均大于0.999);定量限分别为7.46、13.68、14.37、16.62、17.03、17.99 ng,检测限分别为2.24、4.11、4.31、4.99、5.11、5.40 ng;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3%;平均加样回收率分别为101.34%、102.14%、101.22%,103.12%、103.74%、103.54%,103.06%、98.55%、99.43%,99.36%、103.51%、101.21%,100.85%、99.42%、99.60%,100.39%、97.69%、103.84%(RSD均小于3%,n=3);含量分别为0~0.66、0.06~7.57、0.03~1.45、0.29~3.47、0.15~2.85、0.04~2.83 mg/g。色差值L^*、b^*与干姜不同炮制程度呈极显著负相关(P<0.01),a^*与炮制程度呈正相关(P<0.05);干姜炮制前后L^*、b^*与姜酮含量呈极显著负相关,与其余5种成分呈极显著正相关(P<0.01);a^*与姜酮呈极显著正相关(P<0.01),与其余5种成分无相关性(P>0.05);干姜及其炮制品与姜酮含量呈极显著正相关,与其余5种成分含量呈极显著负相关(P<0.01)。结论:干姜及其炮制品的色差值与其活性成分含量相关,即随炮制程度的加重,其a^*增加,L^*、b^*降低;姜酮含量升高,6-姜酚、8-姜酚、6-姜烯酚、二乙酰氧基-6-姜二醇、10-姜酚含量降低。

一测多评法测定钩藤中7种生物碱类成分的含量

目的:建立测定钩藤中7种生物碱类成分含量的一测多评方法,探讨其可行性。方法:以钩藤碱为内参物,建立去氢钩藤碱、异钩藤碱、异去氢钩藤碱、缝籽嗪甲醚、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱6种生物碱类成分的相对校正因子;采用外标法验证一测多评法的可行性。结果:建立了一测多评法同时测定钩藤中7种成分的含量,去氢钩藤碱、异钩藤碱、异去氢钩藤碱、缝籽嗪甲醚、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱的相对校正因子分别为0.959、1.002、0.973、0.663、0.658和0.790。外标法与一测多评法定量结果无显著差异。结论:建立的一测多评法快速、准确、耐用性好,可用于该品种钩藤中7种生物碱类成分的定量分析,为建立简便、可靠的钩藤质量控制方法提供了基础。

钩藤总生物碱对HepG_2细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

目的:研究钩藤总生物碱(TAU)对体外培养HepG_2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:MTT法检测不同浓度TAU对HepG_2细胞增殖的影响;流式细胞术检测不同浓度TAU对HepG_2细胞周期和凋亡的影响;Western Blot法分析其可能的分子机制。结果:TAU对HepG_2细胞有显著的增殖抑制及促凋亡率作用,其作用呈浓度依赖性;中、高浓度TAU处理后HepG_2细胞发生周期阻滞,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例升高;Bcl-2、Casepase-3、Casepase-7、Casepase-9及PARP蛋白表达量显著下调,Bax、cleaved-Casepase-3、cleaved-Casepase-7、cleaved-Casepase-9及cleaved-PARP蛋白表达量显著上调。结论:钩藤总生物碱对HepG_2细胞有明显的增殖抑制作用,并能诱导HepG_2细胞凋亡,细胞周期阻滞可能是其作用机制之一,线粒体调节通路可能是其调节细胞凋亡的重要途径。

钩藤叶5种活性成分的测定研究

为建立钩藤Uncaria rhynchophylla(Miq.)Miq.exHavil叶中5种活性成分含量测定方法,弥补钩藤叶质量控制方法的不足。本文通过对钩藤叶进行了抗氧化活性部位追踪,发现钩藤叶抗氧化活性主要与黄酮和多酚等成分相关;采用HPLC-PDA方法,以乙腈-0.1%磷酸水进行梯度洗脱,测定了钩藤叶中绿原酸、表儿茶素、芦丁、金丝桃苷和喜果苷等5种活性成分的含量。在该方法的条件下,5种成分分离良好,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<3.0%,平均加样回收率为96.73%~103.5%。不同采集地点的12批样品的聚类分析表明5种成分的含量差异与产地地理分布相关。建立的HPLC方法操作简单,准确度好,精密度高,为钩藤叶的综合开发利用提供了基础。

牡丹皮炭在血热出血证大鼠体内的整合药代动力学与药效学的相关性研究

目的:研究牡丹皮炭中多成分的整合药代动力学与止血药效作用的相关性,阐明牡丹皮炭的止血作用机制及其炮制机理。方法:大鼠分为空白组、模型组和给药组,模型组采用血热出血模型,各组于给药后不同时间点分别采用HPLC方法检测多个成分的血药浓度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)法测定TXB_2和6-Keto-PGF_(lα)值;结合AUC自定义权重系数,计算牡丹皮炭多成分整合药代动力学浓度,并与止血药效指标相结合,进行量-效-时相关性分析。结果:牡丹皮炭多成分整合血药浓度随时间变化与TXB_2和TXB_2/6-Keto-PGF_(lα)值呈正相关。结论:牡丹皮炭多成分整合药代动力学与药效作用相关研究具有一定的科学性和可行性,可用于牡丹皮炭止血作用机制及其炮制机理的阐述。

狗牙根改善胰岛素抵抗的活性成分研究

目的采用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗(IR)模型,并利用该模型从前期狗牙根中已获得的3个茋类化合物中初步筛选出能有效改善该IR模型的活性成分。方法高浓度胰岛素诱导HepG2细胞,建立HepG2细胞IR模型;用WST-1法测定胰岛素和各药物对HepG2细胞增殖活性的影响;葡萄糖氧化酶法检测胰岛素和各药物对HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果选定本实验的最佳造模条件为1×10^(-7)mol/L胰岛素刺激HepG2细胞24 h;对狗牙根内的茋类化合物的活性研究发现,cystibenetrimerol B在实验浓度范围内无明显改善细胞IR模型的活性,parthenostilbenin A和quadrangularin C都有不同程度的改善IR的作用,改善模型细胞葡萄糖消耗的效果相对更好。结论parthenostilbenin A和quadrangularin C可能是狗牙根中改善IR的有效活性物质。

多重位点特异性PCR法同时鉴别牛膝和川牛膝配方颗粒

目的建立一种同时鉴别牛膝和川牛膝药材及配方颗粒的多重位点特异性PCR鉴别方法。方法通过比较牛膝属相近物种核基因ITS序列,设计牛膝和川牛膝的特异性引物,经过优化PCR反应体系及PCR反应条件,建立了牛膝和川牛膝配方颗粒的多重位点特异性PCR鉴别方法。结果在退火温度为58℃、循环次数为31时,牛膝和川牛膝配方颗粒分别可扩增出187 bp和164 bp的特异性条带。该方法对牛膝和川牛膝药材的掺伪检出限分别为1%、5%,对两者配方颗粒的掺伪检出限分别为10%、50%。结论所建立的多重位点特异性PCR鉴别可有效鉴别牛膝和川牛膝配方颗粒及其掺伪体系。