益生菌发酵黄芪对LPS诱导的人正常结肠上皮细胞NCM-460氧化损伤保护作用的机制研究

探究益生菌发酵黄芪(fermented Astragali Radix,F-As)与黄芪(Astragali Radix,As)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肠道细胞NCM-460氧化损伤的保护作用及其分子机制。利用MTT法确定了LPS、As和F-As的工作浓度;分别检测并比较了LPS组、As+LPS组和F-As+LPS组,细胞中氧化应激相关指标、抗氧化相关基因在转录水平和蛋白水平表达的变化。与Con组相比,LPS组的活性氧(reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)增加(P<0.01),而细胞的存活率、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)以及细胞中的抗氧化基因在转录水平和蛋白水平均显著降低(P<0.01);而As+LPS组和F-As+LPS组,细胞中的ROS和MDA水平降低(P<0.01),细胞的存活率GSH、SOD、T-AOC以及抗氧化基因在转录和蛋白水平得到恢复(P<0.01),且与As+LPS组相比,F-As+LPS组恢复得更显著(P<0.05)。研究结果提示,As和F-As均可以通过激活抗氧化基因的表达,清除细胞内过多的ROS和MDA,从而对LPS诱导的细胞氧化损伤起到保护作用,且F-As优于As。

白术化学成分、药理作用研究进展及质量标志物预测

白术为常用的大宗药材,具健脾益气、燥湿利水、止汗安胎之效。本文综述白术的化学成分、药理作用,并在此基础上从植物亲缘性及成分特有性、有效性、可测性、药性等角度预测白术的质量标志物(QMarker),发现白术化学成分多样,包含倍半萜类、黄酮类、多糖类、聚乙炔类、酚酸类、苷类等;有抗炎、抗肿瘤、调节胃肠道、抗菌、抗氧化、保肝、保护心血管和神经系统、免疫调节等作用,可用于胃肠道、神经系统及肝脏等疾病的治疗与预防;白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ等内酯类成分及多糖类成分等作为Q-Marker的备选成分。

熊胆粉及其活性成分治疗神经系统疾病作用机制研究进展

熊胆粉活性成分熊去氧胆酸(ursodesxycholic acid, UDCA)、牛磺熊去氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid, TUDCA)在不同的神经系统疾病动物模型中具有神经保护作用。其中UDCA、TUDCA可通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)信号通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase, ERK)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinasa, JNK)、p38 MAPK的磷酸化发挥抗神经炎症的作用;UDCA通过激活单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mechanistic target of rapamycin, mTOR)和抑癌基因诱导的假定激酶蛋白1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)/RBR E3泛素蛋白连接酶(RBR E3 ubiquitin-protein ligase, Parkin)信号通路,抑制小鼠帕金森病(parkinson’s disease, PD)中神经细胞凋亡,增加线粒体自噬起到改善线粒体功能障碍和神经保护的作用。熊胆粉、TUDCA通过上调G蛋白偶联受体(G protein-coupled bile acid receptor 5,TGR5)的表达抑制蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的激活及调控巨噬细胞的分化,减轻神经炎症反应,保护神经细胞;TUDCA下调蛋白激酶R样内质网激酶(protrin kinase R-like ER kinase, PERK)/PERK-真核细胞起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,eIF2α)/转录激活因子4(activating transcription factor 4,ATF4)/C/EBP同源蛋白(C/EBP-homologous protein, CHOP)信号通路的表达,上调CIBZ基因的表达,激活核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2 related factor 2,Nrf2)/NADPH醌氧化还原酶1(NADPH quinone oxidoreductase 1,NQO1)、TGR5/去乙酰化酶3(recombinant sirtuin 3)等信号通路,抑制内质网应激、氧化应激所引起的神经细胞调亡,TUDCA通过调节细胞自噬和能量代谢抑制细胞凋亡发挥神经保护作用。现将近年来对熊胆粉、UDCA、TUDCA治疗神经系统病作用机制进行综述,为熊胆粉及其活性成分的临床运用提供参考。

反枝苋药材的质量标准研究

目的:为反枝苋药材质量标准的制订提供参考。方法:以7批反枝苋药材为研究对象,对其进行外观性状及粉末特征显微观察;采用薄层色谱法(TLC)对反枝苋药材中芦丁、缬氨酸、亮氨酸进行定性鉴别,参照2015年版《中国药典》(四部)通则相关方法测定其水分、总灰分、酸不溶性灰分和水溶性浸出物含量。采用高效液相色谱法测定反枝苋药材中芦丁的含量,色谱柱为Agilent 5 TC-C1(82),流动相为甲醇-0.3%磷酸溶液(40∶60,V/V),检测波长为358 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,进样量为10μL。结果:药材外观性状及显微结构特征与现有描述相符。TLC鉴别结果显示,7批药材供试品色谱中,在与各对照品(芦丁、缬氨酸、亮氨酸)色谱相应的位置上均显相同颜色的斑点。7批反枝苋药材中水分的含量为7.43%~8.72%、总灰分的含量为11.82%~13.78%、酸不溶性灰分的含量为0.15%~0.55%、水溶性浸出物的含量为17.27%~24.74%。芦丁检测质量浓度的线性范围为10~200μg/mL(R2=1.0000);精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6);低、中、高质量浓度样品中芦丁的平均加样回收率分别为99.14%、97.98%、98.80%,RSD分别为0.97%、0.95%、0.96%(n=3)。7批反枝苋药材中芦丁的含量为0.314~1.102 mg/g。结论:本研究对反枝苋药材进行了性状观察、显微鉴别以及水分、总灰分、酸不溶性灰分和水溶性浸出物含量等检查项的考察,并建立了反枝苋药材中亮氨酸、缬氨酸和芦丁定性鉴别的TLC法以及芦丁含量测定的HPLC法,可为反枝苋药材质量标准的制订提供一定参考。

基于代谢组学研究生地黄对寒证大鼠的药性

目的确定生地黄Rehmanniae Radix的性味功效物质基础,阐明生地黄及其拆分组分的寒热药性归属以及中药药性的内部精细结构。方法采用水煎煮法、水提醇沉法和色谱分离技术,对生地黄的主要化学成分进行拆分。在建立寒证大鼠模型的基础上,测定与能量代谢和物质代谢密切相关的生理生化指标。同时,对大鼠尿液进行代谢组学分析,筛选出各给药组大鼠尿液中的差异代谢物,从而确定潜在的生物标志物和代谢通路。结果水煎液、多糖、环烯醚萜苷对寒证模型大鼠呈现相同的药性作用倾向,均能降低肝组织Na^(+),K^(+)-三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)酶活性和血浆中三碘甲状腺原氨酸(3,5,3′-triiodothyronine,T_(3))、甲状腺素(thyroxine,T_(4))、丙酮酸(pyruvic acid,PA)、多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的水平及琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)活性,升高血浆中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)活性。低聚糖对寒证模型大鼠呈现相反的药性作用倾向,能升高大鼠肝组织Na^(+),K^(+)-ATP酶活性和血浆中T3、T4、PA、DA、NE的水平及SDH活性,降低血浆中AchE活性。结论水煎液、多糖、环烯醚萜苷抑制能量代谢和物质代谢,具有寒凉性;低聚糖促进能量代谢和物质代谢,具有温热性。