木棉花水提取物抗炎镇痛作用的实验研究

目的初步研究木棉花水提取物抗炎镇痛作用。方法采用二甲苯和醋酸作为致炎和致痛因子,通过小鼠耳廓肿胀实验、腹腔毛细血管通透性实验与扭体实验,考察灌胃高、中、低剂量的木棉花水提取物的抗炎、镇痛作用。结果小鼠对于木棉花水提取物的最大耐受量为300 g/kg;木棉花水提取物高剂量(150 g/kg)和中剂量(100 g/kg)均能抑制小鼠耳廓肿胀,降低小鼠腹腔血管通透性;木棉花水提取液各剂量组均能有效地减少小鼠的扭体次数,且作用随剂量增加而增强。结论木棉花水提取物具有抗炎镇痛作用。

和厚朴酚对咪喹莫特诱导小鼠银屑病的干预作用

目的探索和厚朴酚达到血药稳态浓度后,对咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型的干预作用及其机制。方法将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、地塞米松阳性组、脂质体溶剂对照组及和厚朴酚高、中、低剂量组。采用银屑病皮损面积和疾病严重程度(PASI)评分观察疾病进展,HE染色观察皮肤细胞形态学改变,测量皮肤厚度,免疫组织化学法半定量分析IL-17、IL-23、JAK、STAT3、NF-κB、TNF-α的表达。结果模型组小鼠皮肤肥厚,长出鳞屑,表皮出现棘层增生变厚,真皮层出现炎症性浸润和微脓肿,IL-17、IL-23、JAK、STAT3、NF-κB、TNF-α均比正常组表达增加。与模型组相比,和厚朴酚能减轻表皮厚度,减少炎症性浸润和微脓肿,降低IL-17、IL-23、JAK、STAT3、NF-κB、TNF-α的表达,并且有剂量依赖性。结论和厚朴酚能通过抑制IL-17/IL-23炎症轴,改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损变化。

一种改进的小脑颗粒神经元原代培养方法及其性质鉴定

目的在已报导的原代小脑颗粒细胞(cerebellar granule neurons,CGNs)的提取培养方法基础上进行改进,以获得较少杂质、更高存活率及更高纯度的CGNs,为后续体外研究做准备。方法将Tryple Express消化液消化及前后两次离心后得到的单细胞悬液,经台盼蓝活细胞计数后接种在预先用多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)包被的培养板中。接种20~24 h后,加入10μmol·L-1的阿糖胞苷(cytosine arabinoside,Ara-C),以及从d 4开始每隔3天加入终浓度5 mmol·L-1的Glucose。借助荧光显微镜及神经元特异性标志物微管蛋白(β-Ⅲ-tubulin)对CGNs细胞进行形态观察及纯度鉴定。结果与原有的胰酶提取方法相比,改进后的CGNs提取方法细胞生长状态良好、突触发育完善、细胞碎片等杂质含量较少,并具有较高存活率及纯度(97%)。结论该方法简便可行,结果稳定,可以为体外神经元的生长发育、轴突再生和神经系统疾病的研究提供有力支持。

鞘氨醇激酶信号通路在肝纤维化中的作用机制

肝纤维化的形成主要体现为肝星状细胞的激活和细胞外基质合成降解的失衡。鞘氨醇激酶-1-磷酸鞘氨醇-1-磷酸鞘氨醇受体(SphK-S1P-S1PRs)信号通路在调控细胞的增殖、迁移以及炎症反应等生命活动中发挥重要作用。介绍了SphK、S1P、S1PRs的分布及生物学功能,简述了SphK-S1P-S1PRs信号通路在肝纤维化中的作用机制及其研究进展。多项研究证实SphK-S1P-S1PRs信号通路在肝纤维化疾病研究中起关键性作用,深入的探索有助于为临床上肝纤维化治理和药物新靶点开发提供新的思路。

病例讨论式学习在临床药物治疗学中的应用探索

病例讨论式学习是将医学理论知识与临床实践紧密结合的一种教学方式。这种教学方式可以激发学生学习兴趣,增加其自主学习的主动性,培养其分析问题解决问题的能力,提高其语言表达能力、思维创新能力、推理能力等。本文探讨了病例讨论式学习在我校临床药物治疗学教学中的实施方法及效果评价。

脐带间充质干细胞对2型糖尿病的免疫调节作用

背景:脐带间充质干细胞具有免疫调节功能和多向分化潜能,能够积极改善2型糖尿病的慢性低度炎症状态,对阻止2型糖尿病疾病进展具有重要意义。目的:综述脐带间充质干细胞通过免疫调节作用治疗2型糖尿病的研究进展。方法:以“脐带间充质干细胞,间充质干细胞,2型糖尿病,免疫,胰岛素抵抗,炎症”等为中文检索词,以“umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs,mesenchymal stem cells,MSCs,type 2 diabetes mellitus,T2DM,immunity,insulin resistance,inflammation”等为英文检索词,在中国知网、Web of Science和PubMed数据库筛选相关的综述、研究型论文和论著,根据纳入标准和排除标准整理出88篇论文进行归纳总结。结果与结论:脐带间充质干细胞可通过免疫调节作用降低机体炎症反应、诱导巨噬细胞向M2型极化,增加靶器官对胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗,缓解胰岛β细胞功能障碍等,进而有效延缓2型糖尿病发生发展。但在脐带间充质干细胞移植成为常规治疗手段之前,还需要进行大规模的基础与应用基础研究以确定其最佳治疗方案及疗效。

瑞替加滨对慢性应激所致的大鼠抑郁样症状的改善作用及机制研究

目的:研究瑞替加滨(retigabine,RTG)对慢性应激诱导的大鼠抑郁样症状的改善作用,并初步探究可能的分子机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、RTG高剂量组(4 mg·kg^(-1))和RTG低剂量组(2 mg·kg^(-1))。采用长期反复低温水浸束缚方法,建立大鼠慢性应激模型。利用旷场实验、强迫游泳实验和糖水偏好实验评估大鼠的抑郁样症状;通过HE染色法和尼氏(Nissl)染色法检测大鼠海马的组织病理形态变化;采用Western Blot法检测大鼠海马中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、突触素(synaptophysin,SYP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的蛋白水平。结果:在慢性应激大鼠模型中,RTG给药显著上调旷场实验中的总运动距离、平均运动速度以及在中央区域停留的时间,升高大鼠的糖水偏好程度和缩短强迫游泳静止不动时间;明显改善海马组织病理性损伤;显著增加BDNF,SYP,GRP78和Bcl-2的蛋白表达,并减少CHOP,Bax和Caspase-3的蛋白表达。结论:RTG对长期反复低温水浸束缚诱导的大鼠抑郁样症状及海马结构病理学损伤均具有保护作用,该作用与缓解海马神经细胞内质网应激、减少细胞凋亡和改善神经可塑性有关。

龙虎人丹防治过量对乙酰氨基酚诱导的小鼠急性肝损伤的作用研究

目的观察龙虎人丹(LHRD)对过量对乙酰氨基酚(APAP)所致急性肝损伤的防治作用,探讨其防治药物性肝损伤的潜在分子机制。方法取30只C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组、APAP模型组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)阳性对照组(50 mg/kg)、LHRD低剂量(80 mg/kg)组和LHRD高剂量(160 mg/kg)组,固定时间灌胃给予相应药物6天,其中正常对照组和APAP模型组灌胃给予羧甲基纤维素钠(CMC-Na)。最后一次给药后所有小鼠禁食22 h,腹腔注射250 mg/kg APAP,其中正常对照组腹腔注射PBS,6 h后处死小鼠并取其血清和肝脏。采用试剂盒检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)活性及肝脏中谷胱甘肽(GSH)含量;HE染色观察肝脏组织形态学变化;荧光探针DCFH-DA法检测组织细胞内活性氧(ROS)表达;Western Blot检测肝脏组织谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)和核酸内切酶G(EndoG)表达。结果与正常对照组比较,APAP模型组血清ALT活性显著升高(P<0.01),细胞损伤显著加重,EndoG蛋白表达和ROS含量显著增加(P<0.01),肝脏GSH含量及GCLC蛋白表达均下调(P<0.05);与APAP模型组比较,NAC阳性对照组及LHRD给药组血清ALT活性下降(P<0.05),ROS含量及EndoG蛋白表达下调(P<0.01,P<0.05),肝组织形态均有改善,且肝脏GSH含量及GCLC蛋白表达量均显著上调(P<0.01,P<0.05)。结论 LHRD可改善过量对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤,其机制可能与增强肝脏抗氧化应激能力,保护肝细胞有关。

龙虎人丹对小鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

目的:探究龙虎人丹对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法:将36只C57小鼠随机分为6组:正常对照组、模型对照组、龙虎人丹20、40、80 mg/kg组及水飞蓟宾70 mg/kg组,每组6只。使用Lieber-DeCarli液体饲料喂养11 d后再给予单次乙醇灌胃来建立小鼠急性酒精性肝损伤模型。每日各组小鼠按相应剂量药物进行干预,第11 d正常对照组给予麦芽糖糊精,其余各组给予酒精灌胃,9 h后取血并收集肝组织,HE染色观察小鼠肝脏病理情况,检测小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)以及肝组织中三酰甘油(TG)的含量,Western Blot检测肝组织中CYP2E1蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠血清中的ALT、AST活性、TC、 LDL含量均显著增高(P<0.01),HDL含量显著降低(P<0.01),肝组织出现明显的空泡,脂肪变性和细胞坏死。与模型对照组相比,龙虎人丹20、40、80 mg/kg能有效改善小鼠血清中的ALT、AST活性、HDL、LDL含量(P<0.05或P<0.01)。组织病理染色结果显示龙虎人丹能够改善肝脏内脂质堆积和炎症因子蓄积,肝脏内TG含量显著下降(P<0.01)。Western Blot结果显示,龙虎人丹可显著下调肝组织中酒精代谢关键酶细胞色素P450 2E1(CYP2E1)蛋白表达(P<0.01)。结论:龙虎人丹能够保护酒精诱导的小鼠急性肝损伤,具有解酒保肝的功效。