p38MAPK-eNOS-N0信号通路在人脐静脉内皮细胞凋亡中的保护作用

目的探讨p38MAPK信号通路在胰高血糖素样肽1(GLP-1)拮抗人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。方法实验分为对照组、糖基化终末产物(AGE)组、GLP-1组、AGE+GLP-1组、AGE+SB203580组、AGE+GLP-1+SB203580组及AGE+GLP-1+L-NAME组,Western blot检测p-p38MAPK/p38MAPK、磷酸化内皮型一氧化氮合酶/内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS/eNOS)蛋白表达情况,NO检测试剂盒(一步法)检测NO含量,DCFH-DA荧光探针检测细胞活性氧(ROS)含量,Annexin V/PI流式检测细胞凋亡率。结果与AGE组相比,GLP-1预处理可诱导p-p38MAPK蛋白表达下降(P=0.000);与对照组比较,GLP-1或p38 MAPK抑制剂(SB203580)预处理后,受AGE抑制的eNOS蛋白表达或诱导的ROS水平分别显著升高(P=0.004)或下降(P=0.000);GLP-1预处理后,因AGE诱导的细胞凋亡率显著降低(P=0.000),而加入L-NAME后,GLP-1的抗凋亡作用显著减弱(P=0.002);GLP-1预处理后,细胞NO含量较单纯AGE组明显升高(P=0.000),而予以L-NAME后,细胞NO含量显著降低(P=0.011)。结论GLP-1可抑制p38 MAPK信号通路的活化,拮抗AGE对血管内皮细胞的氧化损伤;上调eNOS蛋白的表达,拮抗AGE诱导的内皮细胞NO生成障碍及细胞凋亡,从而延缓糖尿病合并动脉粥样硬化的发生发展。

^(99)Tc^(m)-3PRGD2 SPECT/CT胃显像中过氯酸钾的应用

目的探讨^(99)Tc^m-3PRGD2 SPECT/CT胃显像前是否需要口服过氯酸钾封闭胃黏膜,为临床应用提供理论依据。材料与方法 18只成年雄性Wistar大鼠随机分成3组:过氯酸钾低剂量(36 mg/kg)组、高剂量(72 mg/kg)组及生理盐水对照组,每组6只。按1 ml/100 g分别灌胃,1 h后经鼠尾静脉注射^(99)Tc^m-3PRGD2,2 h后行^(99)Tc^m-3PRGD2胃显像,图像由同一阅片者先进行视觉分析,再行胃部/同侧肺部放射性比值(T/N)分析。结果 ^(99)Tc^m-3PRGD2制备简单,成品放化纯度为(98.90±0.70)%;过氯酸钾高剂量组、过氯酸钾低剂量组及对照组大鼠体重分别为(479.7±21.5)g、(481.0±17.6)g、(478.5±16.5)g,差异无统计学意义(F=0.027,P>0.05);3组大鼠胃部区域T/N比值分别为1.2219±0.0165、1.2204±0.0167、1.2186±0.0175,差异无统计学意义(F=0.055,P>0.05)。结论 ^(99)Tc^m-3PRGD2制备简单,放化纯度高,行^(99)Tc^m-3PRGD2 SPECT/CT胃显像时有望无需口服过氯酸钾封闭胃黏膜(尤其成品放化纯度>98%时),便于临床推广和使用。

肠道病毒71型中和表位肽SP55、SP70及VP2-28在人血清中的抗体滴度特征研究

目的:通过肠道病毒71型(EV71)阳性患者抗血清对动物模型的中和表位肽SP55、SP70及VP2-28进行评价,研究动物中确定的表位肽与人抗血清的反应特征。方法:采用体外微量中和实验的方法,筛选高中和抗体滴度的患儿血清共13个样本,其中2 048倍样本8个,4 096倍样本4个,8 192倍样本1个。使用MEGA5. 0软件对目标中和表位肽SP55、SP70和VP2-28进行序列比对,确定最终使用序列。ELISA分析3个中和表位肽分别在N端和C端偶联BSA的情况下,其在抗血清中的抗体滴度。结果:EV71的中和抗体水平会随着EV71总抗体水平的升高而升高。SP55肽无论在N端还是C端偶联牛血清白蛋白BSA都具体较高的抗体滴度,但SP55肽C端偶联BSA的抗体滴度随着抗血清的中和滴度的升高而升高。VP2-28肽N端偶联BSA的抗体滴度普遍高于C端偶联。SP70肽在人抗血清中的抗体滴度普遍不高,其中N端偶联的SP70肽好于C端偶联。结论:SP55肽和VP2-28肽在人抗血清中具有较高的抗体滴度,而不同方向的偶联对于中和表位肽具有很大影响。