RND外排泵对多重耐药鲍曼不动杆菌AYE菌株生物被膜形成的影响

目的探讨多重耐药鲍曼不动杆菌AYE菌株RND外排泵基因影响生物被膜形成的作用机制。方法采用无标记基因敲除方法分别敲除AYE菌株的RND外排泵基因(ade B、ade FGH、ade IJK),采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)验证菌株外排泵基因敲除情况,通过结晶紫染色法检测菌株基因敲除前后生物被膜形成情况,比较4种外排泵抑制剂(PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP)对AYE菌株生物被膜形成的影响。结果qRT-PCR结果显示,AYE菌株RND外排泵基因(ade B、ade FGH、ade IJK基因)成功敲除,获得AYE△ade B、AYE△ade FGH、AYE△ade IJK菌株,生物被膜形成量分别为1.59±0.06、2.15±0.19、1.91±0.02,其中ade B和ade IJK基因敲除后菌株生物被膜形成量低于敲除前(AYE:2.31±0.01),差异均有统计学意义(均P<0.05)。在PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP作用下,鲍曼不动杆菌标准菌株AYE的生物被膜形成量分别为2.14±0.03、2.24±0.02、1.93±0.05、2.09±0.04,均低于对照组(AYE:2.31±0.01),差异均有统计学意义(均P<0.05),其中PAβN形成量最少。结论外排泵基因ade B、ade FGH、ade IJK对多重耐药鲍曼不动杆菌AYE生物被膜的形成有重要作用,外排泵抑制剂PAβN、奥美拉唑、维拉帕米、CCCP对鲍曼不动杆菌AYE菌株生物被膜的形成有抑制作用。