Iodogen法碘标记McAb技术探讨

我们用Iodogen法标记McAb,体会到要想获得满意的标记效果,应控制好投料、pH、掌握反应时间及贮存时间几个环节。 材料和方法 一、材料: (一)Iodogen:化学名称为1,3,4,6—四氯,3α6α-二苯甘脲,分子量430,美国piere化学公司产品。用二氯甲烷(Sigma公司)溶解,分别配成50μl含3μg,5μg,10μg,25μg,50μg及100μg的浓度,取50μl涂布于2ml玻璃小瓶底部,用氮气轻轻吹干,当即盖上胶盖、封口,-20℃冻存备用。 (二)McAb BAC5:取液氮中冻存的杂交瘤细胞BAC5,复苏后培养至对数生长期,注射3.5×10~5个细胞/0.5ml至6～8周龄的BALB/c经产母鼠腹腔,10～14天后收集腹水。纯化腹水得纯度为93％的抗低分化鼻咽癌单抗BAC5,属IgG2a亚类,亲和力常数(Ka)值为8×10~9L·M^(-1),分子量149KD。 (二)无载体Na^(125)J,中国北京原子能中、研究院提。

绿茶酚胶囊升白细胞作用的临床观察

绿茶酚胶囊是由从茶叶中提取的多酚性成分(茶多酚)和维生素C等成分所组成。据文献报道,茶多酚有抗氧化、抗衰老、降血脂、抗癌等作用。我们应用绿茶酚胶囊治疗和预防肿瘤患者放疗和化疗后引起的白细胞下降取得良好效果,现报道如下。 1资料与方法 1.

用竞争结合分析法测^(125)I-BAC5的亲和力常数Ka值

放射性核素标记单克隆抗体(McAb)的临床应用愈来愈受人重视。核素标记抗体在应用前有许多质量参数应该确定,其中抗体的亲和力常数Ka值就是一项重要指标。我们用竞争结合法测定Mcab的Ka值,取得满意结果,现报告如下。 材料和方法 一、材料: (一)抗低分化鼻咽癌单克隆抗体BAC5:复苏抗低分化鼻咽癌杂交瘤细胞株BAC5,培养至对数生长期,以3.5×10~5个细胞/0.5ml注入6～8周龄BALB/c经产母鼠腹腔,10～14天处死小鼠取腹水经硫酸铵粗提后,再经DEAE-Sepharose 6B柱层析进一步纯化,所获单抗BAC5的纯度为93％,属IgG2a亚类,用直线外推细胞结合分析法测免疫活性分数为86.8％。 (二)无截体(125)~Ⅰ(-Na^(125)Ⅰ):北京原子能研究院提供,用Iodogen法标记BAC5,(125)~Ⅰ标记率为88.6％。标记BAC5的放化纯度92.8％,比活度83MBq/mg,比浓度33.2MBq/ml。 (三)靶细胞为低分化鼻咽癌上皮细胞CNE-2,复苏后在5％CO_2培养箱培养至对数生长期使用。

^(125)I标记McAb BAC5在荷瘤裸鼠移植瘤的分布研究

用放射性核素标记单克隆抗体(McAb)进行肿瘤的放射免疫显像,是诊断肿瘤的重要手段之一,也是近年来受人关注的动向之一。我们在进行抗低分化鼻咽癌单杭BAC5在荷瘤裸鼠体内分布研究中,发现标记McAb BAC5在肿瘤中央坏死部位与肿瘤周边未坏死部位的分布随时间而改变。时间愈长,坏死处浓集愈高,现将结果报告如下。 材料和方法 一、McAb

单克隆抗体的免疫活性测定

本文参照Lindmo T法,测定Ⅰ标记抗低分化鼻咽癌单抗BAC5的免疫活性分数,获得满意结果。 材料和方法 一、材料: (一)抗低分化鼻咽癌单抗BAC5:复苏抗低分化鼻咽癌杂交瘤细胞株BAC5,培养至对数生长期,以3.5×10~5细胞/0.5ml注入6～8周龄BALB/c经产母鼠腹腔,10～14天后取腹水。经硫酸铵粗提后,再用DEAE-Sepharose 6B层析纯化。所得BAC5纯度93％,属IgG2a亚类,亲和力常数(Ka)=8×10~9L·M^(-1),分子量149KD。 (二)无载体Na^(126)Ⅰ:由北京原子能研究院提供。用Iodogen法标记BAC5,标记率88.6％,标记BAC5放化纯度92.8％,比活度83MBq/mg,比浓度33.2MBq/ml。