川佛手化学成分研究(Ⅰ)

目的研究川佛手Citrus medica var.sarcodactylis的化学成分。方法对川佛手95%乙醇提取物的石油醚和醋酸乙酯部分进行色谱分离,根据光谱数据和理化性质确定各化合物的结构。结果分离得到5种已知成分,分别为柠檬内酯(limettin,Ⅰ)、6,7-二甲氧基香豆素(scoparone,Ⅱ)、5-异戊烯氧基-7-甲氧基香豆素(7-methoxy-5-prenyloxy-coumarin,Ⅲ)、白当归素(byak-angelicin,Ⅳ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅴ)。结论化合物Ⅳ为首次从芸香科植物中分离得到,其余4个化合物为首次从川佛手中分离得到。

川佛手化学成分研究(Ⅱ)

目的研究芸香科柑橘属植物川佛手Citrusmedica var. sarcodactylis的化学成分,为该药材的开发利用和质量评价提供依据。方法采用各种色谱技术进行分离纯化,通过理化常数测定和波谱分析进行。结果从川佛手中又分离得到7个化合物,其结构鉴定为:5-羟基-7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素(sibiricol,Ⅵ)、6-羟基-7-甲氧基香豆素(7-methylesculetin,Ⅶ)、佛手柑内酯(bergapten,Ⅷ)、Sigmasteryl acetate(Ⅸ)、5-甲氧基-糠醛(5-methoxyfurfural,Ⅹ)、柠檬苦素(limonin,Ⅺ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅻ)。结论化合物Ⅵ、Ⅶ、Ⅸ为从芸香科植物中首次分离得到。

显脉香茶菜化学成分的研究

在继续对显脉香茶菜 Rabdosia nervosa (Hemsl) C.Y.Wu et H.W.L i茎叶有效成分的研究中 ,又分得一种新的对映 -贝壳杉烷型二萜 ,经理化常数和波谱分析 ,确定其结构为 1α,15 β-二羟基 - 6 β-乙氧基 - 6 ,7- B-断裂 -对映 -贝壳杉 - 16 -烯 - 6 ,2 0 -环氧 - 7,2 0 -内酯 ,命名为显脉香茶菜丙素 (rabdonervosin C)

显脉香茶菜化学成分研究Ⅲ

目的研究唇形科香茶菜属植物显脉香茶菜Isodon nervosus(Hemsl)C.Y.Wu et H.W.Li的化学成分,寻找抗肿瘤活性成分。方法采用多种色谱技术进行分离纯化,通过理化常数和波谱分析进行结构鉴定。结果从显脉香茶菜中分离得到7个化合物,其结构鉴定为maoecrystal D(Ⅰ),rubescensin Q(Ⅱ),rabdoternin A(Ⅲ),rabdoternin B(Ⅳ),effusanin A(Ⅴ),nervosin(Ⅵ),oleanolic acid(Ⅶ)。结论化合物Ⅰ～Ⅳ为首次从该植物中分得。

显脉香茶菜的化学成分研究(Ⅴ)

【目的】对显脉香茶菜的化学成分进行研究。【方法】采用现代色谱方法进行分离、纯化,通过现代波谱技术对化合物进行结构鉴定。【结果】从显脉香茶菜中分离得到7个化合物,其结构鉴定分别为开展香茶菜戊素(effusanin E,1)、8β,13β-oxidoeperu-14-en-18-oic-acid(2)、香草酸(vanillic acid,3)、阿魏酸(fumalic acid,4)、咖啡酸(caffeic acid,5)、木栓酮(friedelin,6)、豆甾醇(stigmasterol,7)。【结论】化合物2～7均为首次从该植物中分离得到。

中药化学实验现代化教学设想

对中药化学实验的现代化教育的新型模式的开展 :包括内容的改进、设立开放实验室。

高良姜镇痛止呕有效成分的研究

[目的]提取、分离、筛选高良姜镇痛和止呕作用的有效成分。[方法]用聚酰胺柱、正相硅胶柱、中压液相柱等色谱方法对高良姜有效成分进行了分离、筛选。根据紫外光谱(UV)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振谱(NMR)分析鉴定化合物的结构。[结果与结论]分得高良姜素和山柰素两者混合晶体和单晶均有镇痛和止呕的药理作用,并确定高良姜素为药材质控标准的对照品。

主成分分析对佛手最佳产地的探讨

【目的】分析不同产地佛手中生物活性成分分布规律,探索佛手最佳产地的优选方法,以确定最佳产地。【方法】采用三维高效液相色谱法,梯度洗脱,测定17批不同产地佛手中5种生物活性成分(柠檬油素、6,7-二甲氧基香豆素、橙皮苷、5-羟基-7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素、6-羟基-7-甲氧基香豆素)的含量,并对其进行主成分分析。【结果】所建模式合理,具有一定的可行性和可靠性,为探讨佛手最佳产地提供了一种新的方法。【结论】佛手最佳产地以广东肇庆为最佳。

丹参注射液对自杀基因tk/GCV系统的协同增效作用

目的 探讨丹参注射液联合自杀基因系统对大鼠肝癌细胞和小鼠移植瘤的作用。方法 ①丹参注射液以不同浓度与GCV分别或共同作用于大鼠肝癌CBRH7919的tk^-细胞，以及含5％tk^＋的tk^＋、tk^-混合细胞，MTT法检测各组存活率，用Q值（实测药效与理论药效的比值）分析中药与自杀基因系统联合的相互作用是否有协同性，0．85≤Q〈1．15为相加；Q≥1．15为协同。②把小鼠肝癌细胞H22／tk（tk^＋）与H22（tk^-）细胞按1：4混合，再按2×10^6细胞/只接种到Balb／c纯系小鼠腋下皮下组织内，随机分为模型组、丹参（注射液）组、tk／GCV组、tk／GCV联合丹参注射液治疗的联合组，n=9～11；中药治疗从d2起共15d，自杀基因系统治疗从长出肿瘤后开始共10d，进行疗效观察。结果 ①各组存活率tk／GCV组为63．10％±2．17％，GCV组为67．03％±2．81％，5ml·L^-1丹参联合tk／GCV组为26．67％±4．23％（Q=1．22），5ml·L^-1丹参＋GCV组为42．17％±5．36％（Q=1．04）；10ml·L^-1丹参联合tk／GCV组为18．10％±5．56％（Q=1．26），10ml·L^-1丹参＋GCV组为33．84％±9．84％（Q=1．06）。②接种后各组均在d7触摸到肿瘤，成瘤率100％。联合组在治疗后肿瘤生长呈现明显抑制，最终肿瘤体积（1．53±0．88）cm^3，比模型组（3．19±1．76）cm^3减少52．01％（P〈0．05）；肿留质量（1．32±0．80）g，比模型组（2．28±1．20）g减少42．11％（P〈0．05），差异有统计学意义。丹参组、tk／GCV组肿瘤体积、瘤块质量与模型组比较差异均无统计学意义。结论 丹参注射液能提高自杀基因系统对大鼠肝癌细胞的杀伤力和对小鼠肝癌细胞移植瘤的抑制作用，两者联合作用的协同性提示丹参注射液能增强自杀基因旁观者效应。

利用硝酸银处理的硅胶色谱方法分离和提纯中药有效成分的思考

[目的]探讨了AgNO3-双键配合物的实验规律及原理。[方法]收集并整理经AgNO3处理的硅胶色谱柱分离的挥发油中含双键的混合物:通过分离纯化中药半边旗中的抗癌有效成分以及用银离子络合法从油脂中分离花生四烯酸等,从中找出规律,并用配位化学理论分析其原理。[结果]分离和纯化结果比较满意。[结论]AgNO3-配合物的稳定性规律是:当无空间障碍时,双键个数越多,络合越牢;环外双键比环内双键络合得牢;顺式比反式络合得牢;末端双键比顺式络合得牢;多重苯环芳烃的配合物比单环芳烃络合得牢。这些规律可以指导结构和理化性质相近、用普通色谱法或萃取法难以分离的双键化合物的分离和纯化。

六味地黄丸对自杀基因系统杀伤肝癌细胞增效作用的量效关系

【目的】观测六味地黄丸含药血清对自杀基因HSV-tk/GCV系统杀伤大鼠肝癌CBRH7919细胞的增效作用,探讨建立自杀基因联合中药方药的肿瘤基因治疗联合方案的可行性。【方法】构建HSV-tk/GCV自杀基因治疗系统,并确定丙氧鸟苷(GCV)的工作浓度(39.2μmol/L);制备SD大鼠4 d和8 d六味地黄丸(剂量为32.gkg-.1d-1)灌胃含药血清和生理盐水灌胃空白血清;用大鼠肝癌细胞CBRH7919/tk-或tk+与tk-1∶9比例混合细胞按3×103个/孔铺96孔板,分为空白血清组、GCV加空白血清组、10%tk+/GCV加空白血清组、含药血清组、GCV加含药血清组及10%tk+/GCV联合含药血清组;含药血清又再分为低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组6个复孔,用完全培养基培养24 h后,各组分别加入相应空白血清或含药血清,孵育12 h,加入终浓度39.2μmol/L的GCV,培养60 h,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,Q值法分析自杀基因系统与含药血清联合的相互作用是否具有协同性。【结果】空白血清组、含药血清组、GCV加空白血清组、GCV加含药血清组细胞均未显示明显的细胞毒性。10%tk+/GCV加空白血清组及10%tk+/GCV联合不同浓度的含药血清组均具有显著杀伤作用(与空白血清组比较,P<0.05),联合组存活率显著低于10%tk+/GCV加空白血清组(P<0.05);含药血清中剂量和高剂量组的联合作用具有协同性(Q>1.15),且有浓度依赖性。给药4 d血清和给药8 d血清结果无显著性差异(P>0.05)。【结论】六味地黄丸含药血清对自杀基因系统10%tk+/GCV杀伤大鼠肝癌CBRH7919细胞具有协同增效作用,且有一定的量效关系。

当归多糖对小鼠脾脏树突状细胞增殖的影响

目的:研究当归多糖(ASP)对体外小鼠脾脏树突状细胞(DCs)增殖的影响。方法:采用MTT法,以细胞因子即粒-巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素4(IL-4)作比较,观察不同浓度ASP以及细胞因子+不同浓度的ASP对小鼠脾脏DCs的增殖作用。结果:ASP 31.25-250μg/ml可明显刺激小鼠脾脏DCs增殖,与细胞因子组相比,其中间浓度62.5-125 μg/ml作用明显;ASP+细胞因子,与对照组相比,均有显著的增殖作用,且其在较低浓度31. 25、62.5、125μg/ml明显高于细胞因子组。结论:ASP不仅能促进小鼠脾脏DCs的增殖,而且与细胞因子有显著的协同作用,具有类生长因子和协同生长因子的作用。

三种不同产地佛手的傅立叶变换红外光谱鉴别

建立快速鉴别不同产地佛手的方法。【方法】采用傅立叶变换红外光谱法(FTIR)直接测定3种不同产地的佛手,根据特征吸收峰的峰位、吸收强度及峰高比的量化指标I值,进行比较分析。【结果】每个产地的佛手峰高比I值都有固定的范围,广佛手为0．7～0．9,川佛手为1．3～1．6,金佛手为0．9～1．1,根据I值的大小可以初步判断其产地。【结论】FTIR为广佛手、川佛手、金佛手3种不同产地佛手鉴别的有效方法,该法具有无需分离提取,无需化学处理,简便、迅速、稳定、实用的特点。

盐酸小檗碱诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的研究

目的 :探讨小檗碱诱导人胃癌细胞株MGC 80 3的细胞凋亡。方法 :用 4μg/ml盐酸小檗碱在体外作用于人胃癌MGC 80 3细胞 48小时后进行吖啶橙染色、荧光照相 ,同时用原位末端标记 ,检测给药 48小时后MGC 80 3细胞的凋亡情况。结果 :荧光照相发现MGC 80 3细胞呈典型的凋亡细胞形态 ,细胞核和细胞质内可见致密浓染的黄绿色染色 ,甚至可见黄绿色碎片 ;而原位末端标记法 (insituend labelling ,ISEL)检测结果显示盐酸小檗碱组细胞凋亡指数显著高于空白对照组 (P <0 .0 5 )。 结论 :盐酸小檗碱诱导了人胃癌MGC 80 3细胞的凋亡。

黄芩苷对巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β的影响

【目的】观察黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞产生抵抗素和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。【方法】体外培养小鼠巨噬细胞RAW 264.7,取生长良好的细胞进行接种。模型组加入LPS(终浓度为0.1μg/mL或5μg/mL)或重组抵抗素(终浓度为100 ng/mL);中药组加入不同浓度黄芩苷(终浓度为50、100μmol/L),预处理1 h,后加入LPS或抵抗素。24 h后吸取上清,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组IL-1β和抵抗素浓度,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测抵抗素mRNA表达。【结果】与正常组比较,LPS组促进了巨噬细胞分泌抵抗素,抵抗素mRNA表达上调,LPS和重组抵抗素均促进了巨噬细胞产生IL-1β(P<0.05或P<0.01)。黄芩苷高、低剂量组均可显著抑制IL-1β和抵抗素的浓度,且抑制抵抗素mRNA表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】黄芩苷可明显降低促炎因子产生的炎症反应,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。

丹参素钠对小鼠黑色素瘤细胞B16细胞间缝隙连接的影响

【目的】研究丹参素钠(salvianic acid A sodium,SAAS)对小鼠黑色素瘤细胞株B16细胞间缝隙连接(GJIC)的影响及其机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测SAAS对B16细胞生长的影响,荧光显微镜观察及流式细胞仪荧光示踪法结合分析缝隙连接(GJ)功能变化,并与阳性对照药全反式维甲酸(ATRA)比较,采用western blot法分析缝隙连接蛋白Cx32和Cx43的表达。【结果】以0～8μmol/L SAAS处理B16细胞48 h不影响其生存;用0、1、2、4、8μmol/L SAAS处理细胞48 h后,荧光显微镜下观察,SAAS能明显提高B16细胞Calcein传递,流式细胞术分析对照组和试验组的绿色荧光细胞(G4)与双阴性受体细胞(G3)比值(G4/G3)分别是0.10±0.01、0.16±0.02、0.20±0.01、0.21±0.02和0.25±0.02,各试验组G4/G3值显著高于对照组(P<0.01);western blot分析结果显示:用0、1、2、4、8μmol/L SAAS处理细胞48 h能显著提高Cx32、Cx43的表达。【结论】体外较低浓度SAAS能够促进B16细胞细胞间缝隙连接功能,但在一定药物浓度作用后,不能再提高其功能。SAAS促进GJ机制可能是通过上调Cx32、Cx43蛋白表达途径。

显脉香茶菜中冬凌草甲素的HPLC测定

目的建立显脉香茶菜中冬凌草甲素的HPLC含量测定方法。方法用KromasilC18色谱柱(250mm×4.0mm,5μm);流动相:甲醇-水(45∶55);体积流量:1mL/min;检测波长:235nm;柱温30℃;分析时间为20min。结果冬凌草甲素在茎和叶中含量分别为0.047mg/g和0.791mg/g,茎中含量约相当于叶中含量的1/17。冬凌草甲素平均回收率为98.33%。结论该方法快速、方便、分离度好,其他成分无干扰,适用于显脉香茶菜药材中冬凌草甲素的含量测定。

RO3306对人结肠癌细胞HT29增殖及凋亡的影响

目的观察RO3306对人结肠癌细胞HT29增殖及凋亡的影响。方法选用苔盼蓝染色细胞计数法、细胞集落形成法检测RO3306对人结肠癌细胞HT29细胞增殖影响;采用流式细胞术检测RO3306对HT29细胞周期及凋亡指数的影响。结果苔盼蓝染色和集落形成法结果均显示,RO3306作用HT29细胞后,细胞的生长抑制率随着药物浓度的增加、作用时间的延长而逐渐增高;流式细胞仪检测结果显示,RO3306在0.2mg/L,2mg/L浓度下作用48h对HT2凋亡指数呈现随浓度的提高而逐步上升的趋势,当药物浓度增加到20mg/L,HT29的凋亡指数显著上升,其细胞周期有明显阻滞,随着作用时间的推移出现了更明显的S期阻滞。结论 RO3306具有时间和浓度依赖性地抑制大肠癌HT29细胞的增殖,阻滞其细胞周期、诱导其凋亡。

靛玉红甲肟对肝癌HepG2细胞周期和凋亡的影响

目的探讨靛玉红甲肟对肝癌HepG2细胞增值和凋亡的影响。方法分别用0、10、20、40μmol/L靛玉红甲肟作用于HepG2细胞24、48、72h,采用MTT法检测细胞抑制率;用0、10、20、40μmol/L靛玉红甲肟作用于HepG2细胞24h后收集样品,采用流式细胞术法检测细胞周期及其凋亡率。结果 MTT法测定靛玉红甲肟对肝癌HepG2细胞的增殖具有抑制作用,且表现出剂量和时间的依赖性,随着浓度升高时间加长,抑制明显(P<0.01)。流式细胞术测定也表明靛玉红甲肟对肝癌HepG2细胞有诱导凋亡的作用,凋亡随着靛玉红甲肟浓度的增大不断地增加。细胞形态学方面也可观察出细胞随着靛玉红甲肟剂量和时间的增大而逐渐出现越来越多的凋亡,细胞核染色质深染,聚集于核膜下呈新月形,细胞膜突起呈小泡样,小泡脱落形成含核小体片段的凋亡小体。结论靛玉红甲肟确实可以诱导HepG2细胞凋亡,但靛玉红甲肟对肝癌细胞作用机制还不明确,需要作进一步的深入研究。