基于加权基因共表达网络分析识别肥胖型多囊卵巢综合征的关键基因

目的 采用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis, WGCNA)方法识别肥胖型多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)的关键基因,探讨肥胖型PCOS的发病机制。方法 从基因表达数据库(gene expression omnibus, GEO)下载GSE5090芯片数据,通过WGCNA算法分析筛选基因共表达关键模块和核心基因,对关键模块进行GO和KEGG分析,对核心基因进行差异分析以确定肥胖型PCOS的关键基因。结果 在GSE5090芯片数据中,通过WGCNA分析构建出了31个共表达基因模块,其中重褐色模块(MEsaddlebrown)与肥胖型PCOS具有密切的相关性,包含53个基因。对此模块基因进一步筛选,识别出了ZNF492、MED17、CRABP1、KCNV2、KRI1、ACSBG2、MACO1、SCLY、CPSF1、MAGEA8 10个肥胖型PCOS核心基因。对此模块基因进行GO和KEGG分析发现相关基因与脂肪酸代谢关系密切,主要作用于核蛋白,通过调节染色体组织、有机酸分解等发挥生物学功能。进一步对核心基因表达量进行差异分析,基因ZNF492、CRABP1、KCNV2在肥胖对照组与肥胖型PCOS脂肪组织间存在明显差异。结论 ZNF492、CRABP1和KCNV2基因在肥胖型PCOS的发展中可能产生重要生物学意义,其具体机制有待进一步研究。

桂枝通络片通过抑制中性粒细胞胞外诱捕网缓解动脉粥样硬化

目的探讨桂枝通络片(GZTLP)通过调控中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)改善APOE基因敲除小鼠动脉粥样硬化的作用机制。方法将24只8周龄APOE基因敲除小鼠造模后随机分为4组:GZTLP大剂量组、小剂量组、模型对照组,正常对照组,每组各6只。GZTLP大剂量组、小剂量组分别给予GZTLP 1.87、0.47 mg·g-1灌胃,正常对照组和模型对照组灌胃给予等体积0.9%氯化钠溶液,灌胃6周,采用大体油红O染色整体观察主动脉内脂质斑块沉积情况;油红O染色观察主动脉根部脂质沉积;苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉根部脂质斑块病理形态学改变;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠外周血白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用免疫荧光法检测主动脉弓部斑块部位淋巴细胞抗原6G(Ly6G)、中性粒细胞外诱捕网形成标志基因髓过氧化物酶(MPO)和瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)的表达及Ly6G、MPO和Cit-H3的共定位情况。结果与正常对照组相比,模型对照组小鼠主动脉出现严重的脂质斑块沉积,形态学损伤,大量炎症细胞浸润,血清炎症因子IL-1β和TNF-α的含量增多,主动脉组织中Ly6G、Cit-H3和MPO的蛋白表达明显增多;与模型对照组相比,GZTLP组小鼠主动脉内脂质斑块沉积斑块减少,主动脉细胞排列较规整,炎症细胞浸润情况改善,血清炎症因子IL-1β和TNF-α的含量显著减少(P<0.05),主动脉组织中Ly6G、MPO和Cit-H3发生共定位及蛋白表达明显减少(P<0.01)。结论GZTLP能改善动脉粥样硬化,其机制可能与抑制中性粒细胞胞外诱捕网有关。

基于网络药理学与分子对接探讨温胆汤对心力衰竭合并抑郁共病同治机制

目的基于网络药理学探讨温胆汤对心力衰竭合并抑郁共病同治机制,并通过分子对接初步验证。方法通过TCMSP数据库与文献搜索得到温胆汤有效成分并预测作用靶点;在GeneCards、OMIM、DisGeNET以及TTD数据库搜索心力衰竭、抑郁症相关疾病靶点,与温胆汤作用靶点取交集。通过STRING平台完成交集靶点的蛋白质相互作用网络的构建并预测核心靶点,并对交集靶点进行基因本体注释及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,最后利用分子对接验证核心成分及核心靶点的结合能力。结果温胆汤治疗心力衰竭合并抑郁的核心成分为木犀草素、川陈皮素、β-谷甾醇、黄芩苷、豆甾醇等,核心靶点主要包括肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、蛋白激酶B1、白细胞介素-1β、肿瘤蛋白p53等,通过KEGG主要富集在晚期糖基化终产物及其受体、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B、环磷酸腺苷、丝裂原活化蛋白激酶等信号通路。分子对接结果表明,木犀草素等核心成分与肿瘤坏死因子、白细胞介素-6等核心靶点的结合活性较好。结论温胆汤可能通过抑制炎症反应及氧化应激反应、调节神经递质的释放等方面来治疗心力衰竭合并抑郁。

赖氏通元针法诊治耳鸣经验

耳鸣是临床难治疾病,且发病率高。赖氏通元针法认为,耳鸣不外虚实两端,虚者与神元关系密切,实者与外感六淫、痰湿血瘀以及气滞阳郁等病理因素相关。通元针法以神元为本、以任督二脉为总纲、以调节阴阳为大法、注重局部与整体相结合,并且强调补泻运用,具有扶正祛邪、固本培元的临床疗效。临床应用上通过“通督养神”法发挥心脑养神,温助阳气的作用;“引气归元”法起培元固本,调畅气机的功效;配合随证而治,使邪去正安。气血生化有源并正常上荣于耳窍,从而有效缓解患者的耳鸣症状。该文总结并分析了赖新生教授运用通元针法诊治耳鸣的经验,为临床应用提供新的针灸治疗方案。

脑梗死继发皮质脊髓束华勒氏变性大鼠模型制备及标准化评估

目的 优化大鼠光化学法脑梗死的实验方法,制备稳定的脑梗死继发脊髓束华勒氏变性大鼠模型并进行标准化评估。方法 通过光化学法建立SD大鼠大脑右侧运动皮层终末动脉永久性缺血性损伤模型(实验组)。第一阶段实验组根据45只SD大鼠质量分为3组:A组,150~250g;B组,250~350g;C组,350~450g。每组再根据5%玫瑰红B剂量随机平均分3个亚组:Ⅰ组,12.5mg/100g体重;Ⅱ组,20mg/100g体重;Ⅲ组,30mg/100g体重。第二阶段实验组在BⅡ组基础上,根据玫瑰红B的浓度分为3组:a组,5%;b组,7.5%;c组,10%;每组再根据注射时间随机平均分3个亚组:1组,注射时间<1min;2组,注射时间1~2min;3组,注射时间>2min。造模后24h扫描MRI,28d扫描扩散峰度成像(Dif fusional kurtosis imaging,DKI)后牺牲大鼠,取脑组织做常规HE、髓鞘LFB及免疫荧光GFAP染色。结果 脑梗死继发脊髓束华勒氏变性大鼠模型制备的最佳参数组合为:SD大鼠体重250~350g、5%玫瑰红B 20mg/100g体重、注射时间≥2min、冷光源探头距离暴露的颅骨大约20mm、照射强度300~320klx、照射时间30min,该参数组合制备模型的24h脑梗死阳性率、28d脑软化灶阳性率及28d存活率均为100%。结论 本研究详细描述了光化学法脑梗死继发脊髓束华勒氏变性大鼠模型建立过程并进行标准化评估,为神经变性疾病研究提供了一种稳定、可靠的动物模型。

“从阳引阴”为主、“从阴引阳”为辅探析艾灸审穴论治帕金森病肝肾阴虚证

艾灸配合中药、针灸可明显改善帕金森病患者的病情,但以肝肾阴虚为核心病机的帕金森病是否可灸尚未形成统一认识。从艾灸的方式、"从阳引阴,从阴引阳"和艾灸补泻法审穴论治3个方面阐述帕金森病肝肾阴虚证可灸的理由。并在"阴阳互根"的理论指导下,以核心病机为出发点,提出以"从阳引阴"为主、"从阴引阳"为辅的艾灸治则。"从阳引阴"包括补法灸百会、四神聪以"固阳益阴精",泻法灸大椎、风门、四花穴、手足三里以泻虚火、清痰热和祛肝风;"从阴引阳"则包括补法灸涌泉、神阙、关元、气海以助阳化阴。若患者在肝肾阴虚的基础上兼夹气虚、血瘀等证,则可加灸中脘、下脘、心俞、血海。

吕光耀从“湿浊”论治头痛

头痛之病机核心在于“湿浊”,且与肝气郁滞相关联。湿浊之邪存内,阻滞气血运行,则清阳之气、濡养之血不能上荣头目清窍,脉络空虚,头痛乃发。肝主疏泄,调畅气机,肝郁不舒则气机不畅,疏泄失职,清空受扰,发为头痛。临证从“湿浊”论治,化裁经典名方散偏汤,重用土茯苓利湿泻浊通络,川芎祛风疏肝止痛,活用引经药,不忘虫类药搜剔驱邪,强调顾护脾胃,重视失眠焦虑状况,并适当兼顾鼻鼽、风眩诸症,有效缓解头痛。