不同ACD与全血的体积比对供者外周血单个核细胞采集前后血液、离子及安全性的影响

目的:观察COM.TEC型血细胞分离机AutoMNC程序采集外周血单个核细胞时ACD与全血不同体积比对供者采血前后血液、离子及安全性的影响.方法:应用COM.TEC型血细胞分离机采集经粒细胞刺激因子动员的供者外周血单个核细胞45例,根据ACD与全血的体积比按1∶10、1∶12、1∶14分成3组,循环血量9000~12000 mL,血流速40~60 mL/min,观察3种不同ACD与全血体积比对采集前后血红蛋白及血小板、电解质Ca^2+、K^+、Na^+、Cl^-差异及采集过程中的变化.结果:采集前后血红蛋白质量浓度与Na^+、Cl^-浓度下降不显著,不同组间均无统计学差异(P>0.05);血小板与Ca 2+、K+下降有统计学差异(P<0.05),不同组间Ca^2+浓度下降、1∶10组低钙反应发生较其他两组明显,均有统计学差异(P<0.05);而血小板与K+浓度下降不同组间均无统计学差异(P>0.05).1∶14组出现2例供者采集管流出口小血栓形成.结论:采集前后血小板、Ca^2+、K^+浓度下降有显著差异,不同组间Ca^2+浓度下降有差异,而血红蛋白质量浓度、Na^+、Cl^-浓度采集前后无明显变化,组间无显著差异;ACD与全血体积比为1∶12时低钙反应发生较低且较安全.

CD34^+CD38^-KG1a白血病干细胞对同种异体自然杀伤细胞的抵抗作用及其机制

目的探讨CD34^+CD38^-KG1a白血病干细胞抵抗同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤作用的机制。方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34^+CD38^-KG1a细胞和4例健康个体外周血中NK细胞,并采用流式细胞术检测纯度;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞在不同效靶比(5∶1,10∶1,20∶1)下对K562和CD34^+CD38^-KG1a细胞的杀伤作用;聚合酶链式反应-序列特异性引物法分析NK细胞KIR和CD34^+CD38^-KG1a细胞HLA-Ⅰ基因分型;流式细胞术检测K562和CD34^+CD38^-KG1a细胞表面主要组织相容性复合体(MHC)-I类链相关分子A/B、人巨细胞病毒UL16结合蛋白(ULBP)1~3和人类白细胞抗原(HLA)-Ⅰ类分子的表达。结果分选的CD34^+CD38^--KG1a细胞和NK细胞纯度分别为(94.25±2.16)%、(91.70±2.05)%。NK细胞在各效靶比下对CD34^+CD38^-KG1a细胞的杀伤率均低于K562细胞(P<0.05)。4例健康个体NK细胞KIR基因型为KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1和KIR3DL2,CD34^+CD38^-KG1a细胞HLA-Ⅰ基因型为A30、30,B51、78,Cw4、16。K562细胞高表达NKG2D配体,CD34^+CD38^-KG1a细胞几乎不表达NKG2D配体,CD34^+CD38^-KG1a细胞中NKG2D配体表达率显著低于K562细胞(P<0.05);K562细胞中几乎不表达HLA-Ⅰ,CD34^+CD38^-KG1a细胞高表达HLA-Ⅰ,CD34^+CD38^-KG1a细胞中HLA-Ⅰ的表达率显著高于K562细胞(P<0.05)。结论CD34^+CD38^-KG1a细胞明显抵抗同种异体NK细胞的杀伤作用,其机制可能与高表达HLA-Ⅰ分子和低表达NK2D配体有关。